浙江省自然科学基金(Y2101241)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：刘小贤于健宁马纪林汪卫周红娟更多>>
- 相关机构：浙江省中西医结合医院浙江中医药大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转化生长因子-β1对大鼠腹膜间皮细胞炎症因子及细胞外基质表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠腹膜间皮细胞炎症因子表达和细胞外基质(ECM)积聚的影响。方法体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24h后,采用RT-PCR检测TGF-β1(10ng/ml)刺激后0、3、6、12、24、48h单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-6(IL-6)、Ⅰ型胶原(Collagen I)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)mRNA的表达情况;Western blot检测TGF-β1(10ng/ml)刺激后0、4、12、24、48h Collagen I和PAI-1表达情况;ELISA法检测MCP-1和IL-6表达情况。结果 TGF-β1处理6h后MCP-1、IL-6和PAI-1mRNA即开始逐渐升高,与0h组的差异均有统计学意义(均P<0.05),24h后显著升高(均P<0.01);TGF-β1处理12h后Collagen I mRNA表达开始明显升高,与0h比较差异有统计学意义(P<0.05),24h后有显著升高(P<0.01);TGF-β1处理4h后IL-6表达水平升高(P<0.05),24h后显著升高(P<0.01);处理12h后MCP-1和PAI-1表达水平较0h明显升高(P<0.05),处理24h后Collagen I表达水平显著升高(P<0.05);TGF-β1显著增加MCP-1、IL-6、Collagen I、PAI-1及其mRNA的表达上调。结论 TGF-β1可能通过诱导大鼠腹膜间皮细胞炎症因子上调表达和ECM积聚导致腹膜纤维化。
- 刘小贤汪卫王圳郑红霞马纪林于健宁张雯
- 关键词：腹膜间皮细胞炎症因子细胞外基质转化生长因子-Β1
- 转化生长因子-β1在大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用及机制被引量：2
- 2012年
- 目的 研究转化生长因子-β1（TGF-β1）在大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）转分化中的作用及机制.方法 体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24h后,随机分为正常对照组（不加TGF-β1处理）及TGF-β1（10ng/ml）刺激组.采用RT-PCR法及Western blotting检测TGF-β1处理后不同时点NADPH氧化酶亚单位p67phox、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙粘素（E-cadherin）及Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）mRNA和蛋白的表达情况.结果 TGF-β1刺激RPMCs能导致E-cadherin mRNA和蛋白表达下调,p67phox、α-SMA、CollagenⅠmRNA和蛋白表达上调,呈现一定的时间依赖性.结论 TGF-β1诱导了大鼠腹膜间皮细胞转分化,NADPH氧化酶可能在其转分化过程中发挥重要作用.
- 刘小贤周红娟汪卫于健宁马纪林
- 关键词：腹膜间皮细胞转分化NADPH
- NADPH氧化酶在TGF-β1诱导的大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨NADPH氧化酶在TGF—β1诱导的大鼠腹膜间皮细胞（PMCs）转分化中的作用。方法体外培养SD大鼠原代PMCs．静止24h后，随机分为对照组（A组）、DPI（NADPH氧化酶抑制剂，10μmol／L）组（B组），TGF—β1（10μg／L）组（C组），TGF—β1＋DPI（10μmol／L）组（D组，DPI预处理1h）。观察NADPH氧化酶亚单位p67phox、活性氧（ROS）、α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA），E-钙粘素（E—cadherin）和Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ）的表达。用荧光染料（DCF）及激光共聚焦显微镜检测细胞内ROS。分别用RT—PCR方法和Western印迹检测p67phox、E—cadherin、α-SMA和Collagen ⅠmRNA和蛋白的表达情况。结果TGF—β1显著增加了ROS的产生，刺激24h达到高峰；DPI可抑制TGF—β1诱导的ROS的产生；DPI可抑制TGF—β1诱导的NADPH氧化酶亚单位p67phoxmRNA和蛋白的表达上调，与单纯TGF—β1刺激组比较有统计学差异（P〈0.05）；与此同时DPI可显著抑制TGF—β1诱导的E—cadherin表达下调和α-SMA、CollagenⅠ表达的上调。结论依赖NADPH氧化酶的ROS介导了TGF—β1诱导的大鼠PMCs转分化，NADPH氧化酶可能是腹膜纤维化防治的潜在靶点。
- 刘小贤周红娟汪卫蔡龙于健宁马纪林张雯
- 关键词：NADPH氧化酶腹膜间皮细胞转分化
- TGF-β_1对大鼠腹膜间皮细胞ROS和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪的干预作用被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨TGF-β1对大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)活性氧(ROS)和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪注射液(AGI)对其的干预作用。方法:体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞至第二代,静止24h后,随机分为:正常对照组(A组),AGI(2g/ml)组(B组),TGF-β1(10ng/ml)组(C组),TGF-β1+AGI(2g/ml)组(D组,AGI预处理1h)。用荧光染料(DCF)及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)。RT-PCR检测NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA的表达;Western印迹检测p67phox的蛋白表达。结果:TGF-β1可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS产生,刺激20min后,ROS的表达较对照组显著上升(P<0.05)。AGI可显著抑制TGF-β1刺激后ROS的产生(P<0.05);大鼠腹膜间皮细胞经TGF-β1刺激后,NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA和蛋白的表达均上升,AGI可抑制TGF-β1诱导的p67phox mRNA和蛋白的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1可诱导大鼠腹膜间皮细胞产生的ROS增加、NADPH氧化酶亚基p67phox表达上调;AGI可抑制NADPH氧化酶的表达和活性ROS的产生,从而为AGI防治腹膜纤维化提供了理论依据。
- 刘小贤周红娟蔡龙马纪林陶筱娟于健宁
- 关键词：腹膜间皮细胞NADPH氧化酶
