上海大学生创新活动计划(52-12-308-201)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 短乳杆菌发酵生产尿苷磷酸化酶条件的优化
- 2013年
- 采用响应面法对短乳杆菌产尿苷磷酸化酶发酵培养基及发酵条件进行优化。以葡萄糖酵母膏培养基为基础培养基,通过单因素和Plackett-Burman设计法确定促进尿苷磷酸化酶合成的4个较为重要的有效因子:葡萄糖(P=0.002)、酵母粉(P=0.054)、磷酸根(P=0.059)和尿苷(P=0.001);在此基础上采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,并利用Box-Behnken设计对影响显著因素进行优化,得到最适培养基组成和培养条件为:NaCl 5g/L、葡萄糖18.30g/L、酵母粉15.71g/L、蛋白胨15g/L、磷酸根3.99g/L、肌苷20mmol/L、尿苷21.38mmol/L、初始pH8.0、摇床转速110r/min、发酵温度32℃、培养时间14h、接种量1.0%。在此优化条件下,短乳杆菌产尿苷磷酸化酶能力达到1.325U/mg,较优化前(0.883U/mg)提高了50.0%。
- 王伟洁李红梅邓龙华高露姣黄艳青
- 关键词：短乳杆菌BOX-BEHNKEN设计
- 短乳杆菌产胸苷磷酸化酶发酵培养基的优化
- 2013年
- 胸苷磷酸化酶在核苷类物质合成中具有重要作用,本研究以短乳杆菌为胸苷磷酸化酶生产菌种,对短乳杆菌产胸苷磷酸化酶发酵培养基进行优化。首先通过Plackett-Burman设计筛选出影响短乳杆菌产胸苷磷酸化酶的3个较为重要因素:发酵时间(P=0.030)、接种量(P=0.033)和葡萄糖浓度(P=0.019)。在此基础上采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,并利用响应面中心组合设计对影响显著因素进行优化,得到最适培养基组成成分和培养条件为:发酵初始pH 8.0,葡萄糖18 g/L,酵母膏15 g/L,NaCl 7.5 g/L,蛋白胨10 g/L,胸苷15 mmol/L,摇床转速110 r/min,发酵温度38℃,发酵时间10.57 h,接种量1.54%。在此优化条件下,短乳杆菌产胸苷磷酸化酶能力得到了很大提高,短乳杆菌胸苷磷酸化酶活从0.400 U/mg湿菌体提高到1.172 U/mg湿菌体,比优化前提高了2.93倍。蛋白质凝胶电泳分析显示经优化后每克湿菌体胸苷磷酸化酶的含量明显高于优化前。
- 王伟洁李红梅薛芳陈宝珍高露娇
- 关键词：短乳杆菌胸苷磷酸化酶响应面法发酵培养基
