国家自然科学基金(39870855)
- 作品数：19 被引量：100H指数：7
- 相关作者：吴静徐锦堂赵松滨郝念李姝燕更多>>
- 相关机构：暨南大学暨南大学附属第一医院华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
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- 低能量激光对体外培养的兔角膜内皮细胞超微结构的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察低能量激光照射对体外培养的兔角膜内皮细胞超微结构的影响。方法传代的兔角膜内皮细胞分为两组:一组为处理组,采用低能量激光照射,1次/d,连续7d;另外一组为对照组,不行激光照射。通过扫描电镜及透射电镜等检测观察兔角膜内皮细胞经激光照射前后形态学超微结构的变化。结果扫描电镜和透射电镜检测表明,与对照组相比,激光照射组内皮细胞表面可见丰富的微绒毛,细胞核较大,细胞核膜结构清晰,核仁明显且数目较多,染色质丰富,胞浆内细胞器发达。结论角膜内皮细胞经低能量激光照射后的超微结构变化表明其增殖活性提高。
- 刘存宁吴静徐锦堂陈建苏潘红卫赵松滨
- 关键词：低能量激光角膜内皮细胞超微结构增殖活性
- 角膜体外重构异种生物载体材料植入性实验研究被引量：5
- 2005年
- 目的:分析测定异种(猪)角膜基质组织免疫原性,观察其角膜层间植入后与受体角膜愈合情况,以评价该材料生物相容性,并在此载体上体外重构角膜内皮组织,探讨其作为角膜重建载体材料可行性。方法:(1)将新鲜、脱水两种猪角膜基质植片分别植入F344大鼠角膜基质层间,术后12、90d对外周血进行CD25和CD4/CD8双色免疫荧光标记,流式细胞仪测定分析。(2)猪角膜基质植入新西兰白兔角膜层间,定期临床观察植片愈合情况,并取受体兔角膜进行组织学观察。(3)将猫角膜内皮细胞接种于保留后弹力层的脱水猪角膜基质上,加入培养液培养7d,组织学观察体外重构的角膜内皮组织形态结构。结果:(1)测得新鲜组、脱水组大鼠外周血T淋巴细胞CD4+CD25+、CD8+CD25+双阳性表达率及CD4+/CD8+比值与同基因移植组、阴性对照组比较无显著差异(P>0.05)。(2)兔眼临床观察:全部植片存活,12只术眼未见有角膜水肿混浊、角膜新生血管、排斥反应发生,新鲜植片在2个月左右已透明,脱水植片在6个月后透明。兔角膜组织学观察:新鲜植片4个月时与兔角膜基质相融愈合,脱水植片经角膜细胞再分布、胶原纤维改建重塑于8个月后与兔角膜基质相融愈合,两组植片愈合过程中未见有淋巴细胞浸润及新生血管生成。(3)体外重构的内皮组织形态结构与正常内皮层相似。结论:异种(猪)角膜基质免疫原性低,具有良好的生物相容性,是目前较为理想的角膜体外重构载体材料。
- 吴静郝念李姝燕徐锦堂王彦平
- 关键词：角膜基质生物相容性材料
- 异种角膜基质异位植入后免疫病理学研究被引量：4
- 2006年
- 目的观察异种角膜基质异位植入后的免疫病理变化,评价其免疫相容性。方法将一定大小的新鲜的和甘油脱水的猪角膜基质植入到小鼠皮下组织内,同时以异种皮肤、假手术为阳性和阴性对照;术后1个月取材进行组织病理学观察,并通过免疫荧光细胞化学法检测植入材料内T淋巴细胞总数和亚群的变化。结果新鲜的和甘油脱水的猪角膜基质皮下植入后1个月,可见少量的淋巴细胞、巨噬细胞、CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞浸润,且CD4+细胞多于CD8+细胞,但未达到阳性对照水平(P<0.05)。结论异种角膜基质异位植入后早期局部未引发免疫排斥反应,免疫相容性好。
- 陈根云吴静徐锦堂赵松滨
- 关键词：角膜基质异种材料异种移植免疫病理学免疫荧光
- 猫角膜内皮细胞与人脉络膜色素瘤细胞共培养后增殖能力的变化被引量：1
- 2008年
- 目的观察猫角膜内皮细胞(CEC)与人脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1)共培养后增殖能力及细胞周期的变化。方法将角膜内皮细胞分别与肿瘤细胞OCM-1、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变化。结果与空白对照组角膜内皮细胞周期比较,肿瘤细胞组与基质细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例增加,G1期细胞比例下降,肿瘤组增加幅度高于基质细胞组的。肿瘤细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例比空白对照组的平均增加近19%,增殖能力显著提高。结论与肿瘤细胞OCM-1共培养能促进角膜内皮细胞增殖。
- 黎颖莉吴静李永平何文婷徐锦堂
- 关键词：角膜内皮细胞共培养增殖
- 层粘连蛋白对兔角膜内皮细胞bcl-2表达的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:观察层粘连蛋白(LN)对兔角膜内皮细胞bcl-2表达的影响。方法:将体外培养的兔角膜内皮细胞分成3组:正常对照组、层粘连蛋白(LN)处理组、阴性对照组,采用免疫组化法和酶联免疫法分别检测3组的染色深浅及吸光度大小,以显示各组间bcl-2表达的水平。结果:免疫组织化学染色及评分结果显示LN组bcl-2为强阳性表达,正常对照组bcl-2为弱阳性表达,阴性对照组bcl-2为阴性表达。酶联免疫吸附试验检测3组吸光度分别为1.21±0.18(LN组)、1.05±0.14(正常对照组)和0.04±0.01(阴性对照组)。结论:层粘连蛋白能促进兔角膜内皮细胞bcl-2基因表达,从而可以有效地抗细胞凋亡。
- 朱晓谦吴静徐锦堂赵松滨
- 关键词：层粘连蛋白基因,BCL-2角膜内皮细胞
- 角膜体外重建异种生物载体材料生物相容性研究被引量：10
- 2004年
- 目的 研究异种 (猪 )角膜基质的生物相容性 ,评价其作为角膜体外重建载体的可行性。方法 将新鲜、脱水两种猪角膜基质分别植入新西兰白兔角膜层间 ,定期临床观察植片愈合情况 ,并于术后 2周、1、2、4、8个月取兔角膜进行组织学观察。结果 临床观察 :全部植片存活 ,12只术眼未见角膜水肿混浊、角膜新生血管、排斥反应发生 ,新鲜植片在 2个月左右已透明 ,脱水植片在 6个月后透明。组织学观察 :新鲜植片 4个月时与兔角膜基质相融愈合 ,脱水植片经角膜细胞再分布、胶原纤维改建重塑 ,于 8个月后与兔角膜基质相融愈合 ,2组植片愈合过程中未见有淋巴细胞浸润及新生血管生成。结论 异种 (猪 )角膜基质具有良好的生物相容性 ,是一种理想的角膜体外重建载体材料。
- 郝念吴静李姝燕徐锦堂赵松滨
- 关键词：角膜基质生物相容性生物载体异种移植
- 异种角膜基质作为生物角膜载体的免疫学研究被引量：7
- 2006年
- 目的探讨异种(猪)角膜基质组织免疫原性,以评价其作为角膜重建载体材料的可行性。方法将新鲜、脱水2种猪角膜基质植片分别植入F344大鼠角膜基质层间,术后12d、90d抽取外周血,行抗CD25·FITC和抗CD4/CD8·PE双色免疫荧光标记,流式细胞仪测定分析。结果测得新鲜组、脱水组大鼠术后12d外周血T淋巴细胞表面抗原CD4+和CD25+、CD8+和CD25+双阳性表达率(1.53%±0.47%,2.13%±0.53%与0·57%±0.20%,0.67%±0.18%)及CD4+/CD8+比值(1.43±0.28,1.69±0.18)与同基因移植组(1.78%±0.36%,1.50±0.19)、阴性对照组(2.06%±0.52%,1.44±0.32)比较无显著性差异(P>0.05)。术后90d,新鲜组、脱水组大鼠外周血T淋巴细胞表面抗原CD4+和CD25+、CD8+和CD25+双阳性表达率(1.48%±0.39%,1.50%±0.46%与0·55%±0.15%,0·58%±0·11%)及CD4+/CD8+比值(1.43±0.51,1.36±0.59)与同基因移植组(1.32%±0·75%,1.31±0.29)、阴性对照组(1.34%±0.18%,1.44±0.42)比较,也无显著性差异(P>0.05)。结论异种(猪)角膜基质免疫原性低,是一种理想的角膜体外重建载体材料。
- 吴静郝念李姝燕徐锦堂王彦平
- 关键词：角膜基质免疫原性生物载体异种移植
- 异种角膜基质材料正位植入后神经再生的研究被引量：7
- 2005年
- 目的探讨新鲜、甘油脱水异种角膜基质材料的神经再生特性。方法将新鲜、甘油脱水猪角膜基质材料分别植入到兔角膜基质层间,术后不同时期,通过神经组织银染技术观察受体角膜基质神经再生的状况。结果受体创缘的再生神经纤维分别于术后2个月和3个月长入新鲜材料和脱水材料,但形态走向异常;术后4个月,2种材料周边区神经纤维的数量明显增加,可见神经纤维束和神经纤维丛再生,部分象限中央区也可见神经纤维再生;术后5个月,再生神经纤维形态走向开始改建。结论异种角膜基质材料植入后易于神经再生,再生速度不一;甘油脱水工序对材料的远期神经再生率没有影响。
- 陈根云吴静徐锦堂赵松滨
- 关键词：神经再生角膜基质异种材料异种移植
- TGF-β_1对角膜上皮移植后CD_4^+、CD_8^+、CD_(25)^+、CD_(71)^+的影响被引量：6
- 2002年
- 目的 :角膜移植排斥反应是角膜移植失败的主要原因。方法 :为有效控制角膜移植术后排斥反应的发生 ,提高角膜移植成功率 ,我们观察了TGF β1对BALB/c小鼠角膜上皮移植术后外周血淋巴细胞亚群CD+ 4 、CD+ 8、CD+ 2 5、和CD+ 71活化的影响。研究中采用CD+ 4 、CD+ 8、CD+ 2 5、CD+ 71、免疫荧光标记及流式细胞仪检测技术 ,对BALB/c小鼠角膜上皮移植术后 12d的外周血中CD+ 4 、CD+ 8、CD+ 2 5、CD+ 71的表达进行分析。结果 :BALB/c小鼠角膜上皮移植术后 12d的外周血中CD+ 4 CD+ 2 5、CD+ 8CD+ 2 5、CD+ 4 CD+ 71、及CD+ 8CD+ 71双阳性的T淋巴细胞均有显著升高 ;术后经TGF β1治疗后 ,上述细胞的数量明显受到抑制。结论 :TGF β1可抑制特异性抗原介导的 。
- 吴静徐锦堂陈剑赵松滨
- 关键词：转化生长因子-ΒCD25^+角膜上皮移植角膜移植术排斥反应
- 层粘连蛋白和表皮生长因子对兔角膜内皮细胞周期的影响被引量：19
- 2004年
- 目的 观察层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用对兔角膜内皮细胞周期的影响。方法 体外培养角膜内皮细胞分为对照组、层粘连蛋白组、表皮生长因子 (EGF)组和联合应用组 ,倒置显微镜观察各组细胞形态及数目变化 ;计数 0、12、2 4、36h的各组细胞数目并绘制细胞生长曲线 ;流式细胞技术检测各组细胞周期。结果 倒置显微镜观察及细胞生长曲线显示 ,与对照组相比 ,层粘连蛋白组、EGF组和联合应用组细胞数目明显增多 ,其中联合应用组最为显著 ;细胞周期检测结果显示 ,层粘连蛋白组、EGF组和联合应用组G0～G1期细胞比例显著下降 (P <0 .0 5 ) ,G2～M期细胞比例显著提高 (P <0 .0 5 ) ;EGF组和联合应用组S期细胞比例显著提高 (P <0 .0 5 ) ;联合应用组与层粘连蛋白组相比 ,G0～G1期细胞比例显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用都可明显促进角膜内皮细胞分裂增生 ,且联合应用有协同作用。
- 李姝燕吴静郝念徐锦堂赵松滨
- 关键词：表皮生长因子层粘连蛋白角膜内皮细胞细胞周期细胞培养
