天津市自然科学基金(043606911)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：路福平杜连祥田琳王建玲史文玉更多>>
- 相关机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 分枝杆菌甾酮C_(1,2)位脱氢酶基因敲除的研究被引量：5
- 2007年
- 利用分枝杆菌对植物甾醇进行边链降解可产生4-AD(4-烯-雄甾-3,17-二酮)和ADD(1,4-二烯-雄甾-3,17-二酮),ADD由4-AD在C1,2位脱氢酶(ksdD)作用下脱氢产生,这两种物质在化学结构上高度相似,难以分离。首先扩增出部分ksdD基因,大小为631bp,并以此为基础构建打靶载体pUC19-MK。将pUC19-MK电转分枝杆菌感受态,通过同源重组敲除分枝杆菌染色体上正常的ksdD基因,使C1,2位脱氢酶失活,以达到4-AD大量积累的目的。结果通过初筛筛选出5株转化子,进行甾体转化实验,发酵144h时,1号转化子的4-AD生成率达到17.52%,比出发菌株提高了192%,而此时ADD的生成率仅为6.12%,比出发菌株降低了89.9%。
- 田琳李玉史文玉戴永鑫路福平王建玲杜连祥
- 关键词：同源重组打靶载体
- 分枝杆菌Mycobacterium sp．M1甾酮C_(1,2)位脱氢酶活性的研究
- 2005年
- 分枝杆菌Mycobacteriumsp．M1可以有效降解大豆甾醇侧链得到雄甾4-烯-3,17-二酮 (AD)和雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)。通过该菌株细胞和细胞裂解液对底物AD的转化,表明了该菌株中存在甾酮C1．2位脱氢酶。利用酶活测定中活力高的细胞裂解液可以有效地降解大豆甾醇生成ADD。
- 黄巍别松涛王超路福平
- 关键词：分枝杆菌
