湖南省医药卫生科研计划课题(B2007140)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 鼻咽癌细胞系中LTF基因的表达及遗传学与表观遗传学改变被引量：4
- 2010年
- 目的 检测鼻咽癌（NPC）细胞系中LTF基因的表达水平,并分析遗传学和表观遗传学改变与其表达的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）,检测NPC细胞系HNE1、HNE2、HNE3、CNE1、CNE2、5-8F、6-10B和15例慢性鼻咽炎组织中LTF mRNA表达水平,同时通过Western blot法分析6-10B细胞中LTF蛋白水平.运用微卫星分析技术、聚合酶链式反应-单链构象多态（PCR-SSCP）方法和甲基化特异性PCR（MSP）以及亚硫酸盐克隆测序方法,分别检测LTF的杂合性丢失、突变和启动子区甲基化情况.结果 在15例慢性鼻咽炎组织中,LTF基因稳定表达.在NPC细胞系中,除6-10B细胞有LTF基因弱表达外,其余均表达缺失,显著低于慢性鼻咽炎组织中的表达（Z=-3.738,P=0.000）,且6-10B细胞中无LTF蛋白的表达.杂合性丢失分析显示,NPC细胞系中不存在LTF微卫星位点的缺失.突变检测显示,LTF在NPC细胞系中的突变率为14.3%（1/7）,且突变存在于HNE1细胞系中,即启动子序列-305至-50 bp发生了缺失突变（-218delT）.甲基化分析显示,LTF基因在慢性鼻咽炎组织中无甲基化,而在所有NPC细胞系中均有甲基化.用5-杂氮-2-脱氧包苷处理5-8F和6-10B细胞后,LTF mRNA表达上调.结论 LTF基因在NPC细胞系中表达失活,其分子机制与启动子高甲基化和缺失突变有关.
- 易红梅李艳春钟仁华
- 关键词：鼻咽肿瘤细胞系遗传学表观遗传学
