国家自然科学基金(81071308)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 长波紫外线照射对培养人表皮黑素细胞与真皮成纤维细胞抗氧化活性影响
- 2013年
- 目的对比观察了长波紫外线(UVA)照射对培养人表皮黑素细胞与真皮成纤维细胞过氧化氢酶(CAT)蛋白表达以及DNA氧化产物8-羟基-脱氧鸟苷(8-oxo-dG)生成的影响,旨在认识除生成黑素以外黑素细胞具有的抗氧化机制。方法建立人成纤维细胞及人黑素细胞原代和传代培养。培养细胞给予不同剂量(0,3,5,25 J/cm2)UVA照射,孵育3 h后,用间接免疫荧光的方法检测CAT和8-oxo-dG的水平。结果 3 J/cm2UVA照射后,成纤维细胞CAT蛋白表达与假照射组对比明显增加(P<0.001),8-oxo-dG荧光强度差别无统计学意义(P=0.918);黑素细胞中CAT蛋白表达与假照射组对比明显减少(P<0.001),8-oxo-dG荧光强度显著增加(P=0.002)。结论表皮黑素细胞对氧化应激存在固有的敏感性,且暴露UVA介导的氧化应激后黑素细胞缺乏适应性上调CAT表达,这些机制可能关系到白癜风皮损黑素细胞氧化损伤的发生。
- 汪蓉瑛史赢贾海燕雷铁池
- 关键词：黑素细胞成纤维细胞UVADNA氧化损伤
- 白癜风皮损组织中黑素细胞谱系特异性标记基因检测被引量：1
- 2013年
- 目的针尖皮肤切削术结合逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测白癜风皮损组织中黑素细胞谱系特异性标记基因的表达,旨在预测治疗后白癜风皮损出现毛囊复色的可能性。方法选取6例就诊于武汉大学人民医院皮肤科静止期白癜风患者和4例健康志愿者,用针尖皮肤切削术对受试者白斑的中心、近边缘和周边"正常皮肤"处活检,抽提组织总RNA,用RT-PCR技术测定标本中多巴色素异构酶(Dct),酪氨酸酶(Tyr)和管家基因β-肌动蛋白(ACTB)mRNA的表达。结果 (1)用针尖皮肤切削术获取不同大小(3 mg和7 mg)的组织标本并与负压吸疱法采集的表皮片进行比较,结果显示针头切削术获取7 mg组织,经研磨异硫氰酸胍-苯酚(Trizol)法抽提总RNA,能在正常皮肤组织中检测到3种基因表达。同时对10例针尖皮肤切削术后的局部伤口愈合进行了追踪随访,1个月后10例均正常愈合,未见瘢痕形成。(2)白癜风皮损黑素细胞谱系特异性标记基因检测:皮损中心区检测出3种模式,即Dct+Tyr-ACTB+,Dct-Tyr-ACTB+和Dct+Tyr+ACTB+。对1例检测结果"Dct+Tyr-ACTB+"的患者施以308 nm准分子光照射2次,皮损即出现毛囊复色。结论针尖皮肤切削术结合RT-PCR技术检测白癜风皮损组织中黑素细胞谱系标记基因表达,是一种有价值的预测白癜风皮损可能出现毛囊复色的微创准确方法。
- 徐万纹史赢王雄范智峰雷铁池
- 关键词：白癜风基因诊断
