山东省自然科学基金(ZR2009CM018)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：郝晶史琨李毅邴鲁军张帅更多>>
- 相关机构：山东大学泰安市中心医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂多糖所致小鼠睾丸支持细胞GDNF表达减少对精原干细胞的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨脂多糖(LPS)处理后的小鼠睾丸支持细胞(SCs)中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化及该变化对精原干细胞(SSCs)的影响。方法取5～6周龄昆明小白鼠睾丸组织,分离纯化并培养SCs,将其分为4组:正常对照组(Con组),添加LPS处理1 d组(1 d组)、2 d组(2 d组)和3 d组(3d组),收集4组培养液作为条件培养液,采用RT-PCR和Western blot检测各组SCs GDNF表达的变化;取5～7 d龄昆明小乳鼠睾丸组织,筛选SSCs后分为4组:Con组、Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,分别用前面的4组培养液培养96 h。通过免疫荧光染色和RT-PCR检测细胞中PLZF、oct4、PCNA和c-kit、sohlh2的表达变化,并通过RT-PCR检测SSCs中Gfrα1、c-ret和Bcl6b、Etv5的表达变化。结果 RT-PCR与Western blot结果显示,SCs GDNF表达按Con、1 d、2 d、3 d组的顺序降低;RT-PCR和免疫荧光染色结果显示,SSCs PLZF、oct4和PCNA的表达按Con、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组顺序降低,而c-kit和sohlh2的表达按Con组、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组顺序升高;SSCs中Gfrα1、c-ret、Bcl6b与Etv5的表达Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组均低于Con组。结论 LPS处理导致小鼠SCs GDNF表达减少,该变化可使SSCs分化加速而其自我更新受到抑制,其机制可能与Bcl6b和Etv5的表达下调有关。
- 史琨张晓丽张海玉纪淑芳郝晶
- 关键词：脂多糖睾丸支持细胞胶质细胞源性神经营养因子精原干细胞
- Wnt/β-catenin信号通路在成人睾丸支持细胞增殖中的作用及其机制被引量：5
- 2012年
- 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在成人睾丸支持细胞增殖中的作用及其作用机制。方法取成人睾丸组织采用两步酶法消化,分离纯化支持细胞,后行传代培养,并经波形蛋白免疫荧光染色鉴定其纯度。将支持细胞分为3组:正常对照组(Con组)、添加Gsk-3β特异性抑制剂SB216763组(SB组)和添加氯化锂组(LiCl组)。通过BrdU标记和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期;采用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR和Western blot-ting检测细胞中β-catenin和c-myc的表达状况;采用RNA干扰技术,下调支持细胞中c-myc基因表达。结果BrdU标记和流式细胞仪检测结果显示,SB和LiCl组支持细胞增殖明显高于Con组;加入SB216763和LiCl可明显促进细胞β-catenin和c-myc入核,c-myc mRNA和蛋白水平明显高于Con组;转染c-myc siRNA后,可明显降低SB216763引起的支持细胞增殖。结论激活Wnt/β-catenin信号通路可促进成人睾丸支持细胞的增殖,其作用机制可能是通过上调c-myc基因表达来实现的。
- 李毅张帅殷钢史琨邴鲁军郝晶
- 关键词：成人睾丸支持细胞Β-CATENINC-MYC
