国家自然科学基金(30771396) 作品数:8 被引量:179 H指数:6 相关作者: 黄丽丽 康振生 柯希望 郜佐鹏 韦洁玲 更多>> 相关机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 高等学校学科创新引智计划 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 化学工程 更多>>
拮抗淡紫灰链霉菌xjy的发酵条件优化 被引量:1 2008年 采用单因素和正交试验相结合,对笔者分离保存的生防放线菌淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendu-lae)xjy菌株的液体发酵培养基和培养条件进行了优化。单因子试验结果表明,碳源葡萄糖、麸皮和空白处理三者之间无显著差异;氮源为豆粕、鱼粉和黄豆粉时发酵效价明显高于空白处理和其他氮源;添加0.04%的磷酸氢二钾和0.01%的硫酸亚铁可促进发酵液活性物质的产生。正交试验得出较适合于工业生产的摇瓶培养基配方为:麸皮2%、豆粕1%、氯化钠1.5%、碳酸钙0.6%、硫酸铵1%、磷酸氢二钾0.04%、硫酸亚铁0.001%。优化后的发酵液效价提高了36%。较为适宜的发酵非营养条件为:最适温度为20-35℃、摇床转速为150 r/min、初始pH值为5.5-8.0、装料量为50 mL/250 mL。这些结果为该菌株今后的应用、抗生素的分离提纯和产业化提供了依据。 丁雪 黄丽丽 康振生 姜云关键词:发酵条件优化 正交试验 防治苹果树腐烂病杀菌剂的室内筛选 被引量:31 2009年 The inhibitory effects of 10 fungicides on apple tree valsa canker were compared on dishes and twigs.The results showed that conidia germination and mycelial growth were inhibited by all fungicedes tested.The EC50 value of Difenoconazole was 6.1×10-3 μg·mL-1,the lowest among tested fungicide in inhi-biting conidia germination.Tebuconazole and Imazalil also showed obvious inhibition effect.Thiophanate-methyl was the least efficient with the EC50 value 2.6×101 μg·mL-1.Difenoconazole also showed the highest activity for inhibiting mycelial growth with EC50 value of2.3×10-2 μg·mL-1.Tebuconazole was better than other fungicide.Thiophanate-methyl and Propineb were the least efficient with quite high EC50 value.Furthermore,the size of the lesion after inoculation on excised twigs also revealed that Difenoconazole was most efficient because it showed the smallest lesion of 394 mm2 compared with other tested fungicides.So Difenoconazole and Tebuconazole could be used to control apple tree valsa canker in field to subsititute forbided fungicides such as asomate. 王磊 郜佐鹏 黄丽丽 韦洁玲 臧睿 康振生关键词:苹果树腐烂病 杀菌剂 栽培面积 无性阶段 苹果生产 汉中市4县核盘菌对油菜致病力的比较研究 菌[Sclerotinia sclerotioum(Lib.) de Bary]是一种世界性分布的死体寄生物,由其引起的油菜菌核病是我国油菜上的主要病害.该病在南方油菜产区发病尤为严重,严重影响了油菜的产量.为了明确这种... 聂峰杰 王洁 黄丽丽 康振生ITS序列结合培养特征鉴定梨树腐烂病菌 被引量:35 2007年 对采自中国4个省份的9个梨树腐烂病菌分离株和7个苹果树腐烂病菌分离株的ITS序列进行了测定和分析,并结合GenBank的有性型Valsa ceratosperma、V.ambiens和V.mali的ITS序列构建了系统发育树。结果表明梨和苹果树的各分离株在ITS核苷酸序列上分化较小(p-distance=1.55%),均在V.ceratosperma聚类组,但二者又分别处于两个独立小分支。其与V.ambiens和V.mali处在不同的聚类组中,且亲缘关系较远,表明供试梨树腐烂病菌并非V.ambiens。培养性状和生物学特点的研究结果还发现,梨树腐烂病菌各分离株无论在菌落颜色、产孢特点、还是37℃高温的生长情况都和苹果腐烂病菌有一定差别。前者菌落始在PDA终为乳白色,而后者菌落初为白色后期变褐色;在20%ABA上,前者形成的产孢体较大而数量较少,在37℃高温下能正常生长,后者则形成的产孢体较小而数量较多,在37℃高温下不能正常生长。并未发现二者在子实体上有稳定明显的差异。因而表明梨树腐烂病菌应为V.ceratosperma,但可用培养性状和生物学特点进行区分其和苹果树腐烂病菌。 王旭丽 康振生 黄丽丽 杨鹏关键词:RDNA-ITS PEG介导的苹果腐烂病菌原生质体转化 被引量:34 2011年 【目的】建立PEG介导的苹果腐烂病菌原生质体遗传转化体系。【方法】本文利用带有hph基因的质粒,以苹果腐烂病菌(Valsa mali var.mali)03-8为受体菌株,通过PEG融合法对其原生体进行转化。【结果】于YEPD内培养48 h的菌丝,在酶解液浓度为50 mg/mL Driselase+10 mg/mL Lysing Enzymes情况下,按10 mL酶液/0.5 g湿菌体比例,酶解2 h时可以释放出4×107个/mL原生质体,其转化效率为44个/μg DNA。对转化子的PCR检测和Southern杂交分析表明,hph基因已经整合进苹果树腐烂病菌的基因组中。转化子在PDA培养基中继代5次后,87.5%的转化子仍能正常生长,表明外源基因hph能在苹果树腐烂病菌中稳定遗传。【结论】该转化体系的建立为苹果树腐烂病菌致病相关基因的深入研究奠定了基础。 高静 李艳波 柯希望 康振生 黄丽丽关键词:原生质体 转化子 稳定性 陕西省苹果树腐烂病菌基因多态性的ISSR分析 被引量:9 2012年 为了从分子水平上揭示苹果树腐烂病菌的群体遗传多样性,采用正交设计对ISSR-PCR体系进行了4因素3水平的筛选,并从47条ISSR引物中筛选出11条多态性较好的引物。对供试的87个分离株进行扩增的结果显示,11条引物在129个位点扩增出稳定的条带,其中多态性位点119个,多态性位点率为92.25%。POPGENE分析显示,病菌种群的遗传多样性和基因多态性丰富,群体间的遗传分化系数(Gst)为0.109,群体内为0.891,群体内多样性大于群体间多样性。两个地理种群间的居群每代迁移数(Nm)为2.046,两者之间存在广泛的基因交流。在遗传相似系数为0.88时,可将21个自然种群划分为9个不同的类群,表明陕西省苹果树腐烂病菌的各个自然种群之间的遗传亲缘关系与其地理来源之间无明显的相关性。 臧睿 黄丽丽 李正力 高小宁 康振生关键词:苹果树腐烂病 正交设计 应用SRAP技术研究陕西省苹果树腐烂病菌Valsa mali遗传多样性 苹果树腐烂病(valsa canker of apple)由黑腐皮壳属Valsa spp.引起,是苹果树上的毁灭性病害。在我国分布广、危害重,每年都会造成严重的产量和经济损失,已成为制约我国苹果产业持续发展的主要因素之一... 李正力 黄丽丽 臧睿 高小宁 康振生关键词:SRAP 文献传递 陕西杨凌地区苹果树腐烂病菌(Valsa mali)基因多态性的SRAP分析 被引量:3 2011年 利用SRAP标记对陕西省杨凌地区36株苹果树腐烂病菌(Valsa mali)基因多态性进行分析。从150对SRAP引物中筛选得到8对多态性高、稳定性好的引物组合对供试菌株进行扩增,共得到多态性条带56条,占总带数的75.68%,36株菌株的相似系数为0.339 6-0.962 2。其中,菌株167和165ZJG之间相似系数最大,亲缘关系最近。菌株SXYL24与SXYL135之间的相似系数最小。UPGMA聚类分析显示,在相似系数为0.846处36株供试菌株被划分为4个类群,与菌株采集来源及致病力不存在相关性。 李正力 黄丽丽 康振生 臧睿关键词:苹果树腐烂病菌 DNA多态性 相关序列扩增多态性 致病力 七株植物内生放线菌对苹果树腐烂病的防治作用 被引量:37 2009年 通过分生孢子萌发试验、菌丝抑制试验、接种离体枝条试验及田间病斑涂抹药剂防治试验,研究了7株植物内生放线菌对苹果树腐烂病的防治效果。结果表明,7株植物内生放线菌无菌发酵滤液对病原菌分生孢子萌发及菌丝生长均有明显的抑制作用,2倍稀释液对孢子萌发抑制率均达85%以上,20倍稀释液对菌丝生长抑制率均达80%以上。显微观察发现,Hhs.015(BAR1-5)菌株无菌发酵滤液可导致病菌芽管、菌丝畸形。在人工接种条件下,无菌发酵滤液原液对离体枝条病斑扩展具有明显的抑制作用,其中AR1-14、Hhs.015(BAR1-5)和TGYXCSA-7处理5天后防治效果分别达83.2%、69.7%和85.6%。田间刮除病斑后涂抹放线菌发酵原液也可明显抑制病斑复发,防效均达80%以上。 郜佐鹏 柯希望 韦洁玲 陈银潮 康振生 黄丽丽关键词:植物内生放线菌 孢子萌发率 苹果树腐烂病菌 苹果树腐烂病菌不同分离株致病性差异初步研究 苹果树腐烂病在我国各苹果产区均普遍发生,为害严重甚至毁园。为了经济有效地控制该病害,深入了解其致病力的分化情况是非常必要的。因此,本课题组在全国各苹果产区采集分离腐烂病菌菌株200多株,经形态和分子特征鉴定,发现有3个不... 韦洁玲 黄丽丽 郜佐鹏 柯希望 康振生关键词:苹果树腐烂病菌 致病力分化 文献传递