国家自然科学基金(81270698)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：齐川任丽莉于秉治刘超肖建英更多>>
- 相关机构：锦州医科大学中国医科大学辽宁医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 蛋白激酶A抑制剂H-89通过Wee1B蛋白调控小鼠1-细胞期受精卵发育
- 2016年
- 目的：探讨蛋白激酶A（PKA）抑制剂H-89通过调控小鼠蛋白激酶WeelB蛋白S15位点磷酸化状态影响小鼠1-细胞期受精卵的发育。方法：超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵，经H-89预处理后显微注射WeelB-mRNAs，相差显微镜观察受精卵的形态变化、计数卵裂率；放射自显影测定M期促进因子（MPF）活性；免疫印迹检测WeelB蛋白表达、CDC2-pTyr15和WeelB-pSer15磷酸化及WeelB-pSerl5非磷酸化状态。结果：H-89持续存在时，在受精卵G1和S期检测到WeelB-Ser15的磷酸化条带，在G2期和M期检测到WeelB-Serl5的非磷酸化条带；小鼠受精卵有丝分裂进程加快，但过表达WeelB-WT和过表达突变体weelBSl5A／D均能延缓受精卵有丝分裂进程，逆转由H-89引起的促进分裂作用。结论：H-89抑制PKA活性，从而抑制WeelB蛋白S15位点的磷酸化状态，但过表达WeelB-S15A／D有效逆转H-89加速的G2／M期转换，使受精卵的分裂延迟。提示weelB蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点。
- 张苧兮刘超任丽莉刘乙蒙齐川于秉治肖建英
- 关键词：蛋白激酶A受精卵小鼠
- 双丁酰环腺苷酸通过蛋白激酶Wee1B调控小鼠1-细胞期受精卵的发育研究被引量：1
- 2017年
- 目的 探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)激活剂双丁酰环腺苷酸(dual dibutyryl cyclic AMP,dbc AMP)调控蛋白激酶Wee1B蛋白对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,为进一步研究母源性因子Wee1B在早期胚胎发育过程中的作用提供理论基础。方法将2 mmol/L dbc AMP作用于小鼠1-细胞期受精卵1 h,并显微注射Wee1Bm RNAs,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、Wee1B-WT/KD注射组、Wee1B-S15A/D注射组,继续在M16培养基中培养。相差显微镜下观察小鼠受精卵的形态变化和卵裂情况,放射自显影测定各期细胞有丝分裂促进因子(MPF)活性,Western blotting方法检测Wee1B蛋白的表达、CDC2-p Tyr15和Wee1B-p Ser15的磷酸化水平。结果小鼠受精卵在有dbc AMP存在时,G_1、S、G_2和M各细胞周期均检测到磷酸化的Wee1B表达,非磷酸化条带在G_2期和M期才能检测到;各组受精卵卵裂出现时间延迟,卵裂率显著降低;h CG注射后35 h内,MPF活性一直处于低水平,CDC2-p Tyr15磷酸化状态和MPF活性变化趋势相一致。结论dbc AMP激活PKA后,PKA磷酸化Wee1B蛋白的S15位点,Wee1B活性增加,阻滞受精卵分裂,本研究提示Wee1B蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点,可以更好地认识早期胚胎发育的分子事件。
- 任丽莉刘超刘乙蒙张苧兮肖建英
- 关键词：蛋白激酶A小鼠受精卵
- The ectopic expression and clinical significance of ABT1 in gastric carcinoma
- As a novel TATA-binding protein-binding protein,activator of basal transcription 1(ABTl)promotes RNA polymeras...
- Liu ChaoZhang XiumeiRen LiliLiu YimengMu TianchiFuShuaiJin yuXiao Jianying
- 关键词：PROGNOSISIMMUNOHISTOCHEMISTRY
- 文献传递
