国家自然科学基金(81273533)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 网脊衣酸上调p21^(CIP1)蛋白诱导前列腺癌细胞周期阻滞的作用分析
- 2013年
- 目的探讨天然化合物网脊衣酸(RB)对前列腺癌LNCaP细胞的周期阻滞作用及分子机制。方法细胞经RB处理后,流式细胞术检测细胞周期的变化;溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法检测细胞增殖情况;Western blotting检测p53、p21CIP1(p21)及细胞周期相关蛋白的表达;实时定量PCR检测p21的mRNA水平的变化;荧光素酶报告基因检测RB对p21启动子活性的影响;转染p53突变体质粒检测p53对p21表达的影响;基因敲除p21检测其对细胞周期的作用。结果 RB可使LNCaP细胞阻滞于G0/G1期,抑制周期相关的Cyclin D、Cyclin E、Cdk 4和p-Rb表达。同时,RB可时间依赖性地诱导LNCaP细胞中野生型p53表达、促进其入核,同时上调p21的mRNA和蛋白水平。阻断p53的活性后,可抑制RB介导的p21表达及其启动子活性。而敲除p21基因,可降低RB所介导的G0/G1期阻滞,同时G2/M期细胞数量增加。结论 RB通过激活p53,在转录水平上调靶基因p21的表达,导致前列腺癌LNCaP细胞阻滞于G0/G1期,从而抑制细胞的增殖。
- 高逢彬司曼飞刘永青牛蕾蕾苑辉卿
- 关键词：G1期阻滞P21蛋白前列腺癌细胞
