国际科技合作与交流专项项目(2006DFA33530)
- 作品数:20 被引量:88H指数:6
- 相关作者:官志忠王永林黄勇齐晓岚王爱民更多>>
- 相关机构:贵阳医学院贵州医科大学更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 灯盏细辛活性部位对神经细胞α3尼古丁受体蛋白水平的影响被引量:1
- 2010年
- 目的研究灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物不同活性部位对神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中尼古丁乙酰胆碱能受体(Nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)蛋白水平的影响及其对抗β-淀粉样蛋白(Aβ)细胞毒性的作用机制,以探讨其在阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease,AD)治疗中的作用。方法选用一定浓度的灯盏细辛不同部位及Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,用比色法测定培养细胞MTT还原率,蛋白质印迹法测定尼古丁受体α3亚单位蛋白水平。结果灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物不同部位中,经凝胶柱分离的第一区段、该区段经反相硅胶柱分离的低极性部位及乙酸乙酯萃取后再以正丁醇获得的萃取物,经凝胶柱分离的第四区段经反相硅胶柱分离出的低极性部位能上调SH-SY5Y细胞中α3nAChR蛋白水平;同时能减弱Aβ25-35的细胞毒性作用。结论灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物分离部位可能是中药灯盏细辛的重要的活性部位,在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用。
- 闫秀明邓婕齐晓岚黄勇王永林官志忠
- 关键词:灯盏细辛神经母细胞瘤细胞Β-淀粉样蛋白
- 灯盏细辛提取物对痴呆大鼠学习记忆能力和胆碱酯酶活性的影响被引量:6
- 2010年
- 目的探讨灯盏细辛提取物对痴呆大鼠学习记忆能力及胆碱酯酶活性的影响。方法 Wistar大鼠42只,随机分为5组;用双侧脑室注射β淀粉样蛋白联合腹腔注射D-半乳糖方法建立痴呆大鼠模型。采用Morris水迷宫方法检测大鼠学习记忆能力、比色法检测乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BuChE)活性。结果与正常组和假手术组相比,模型组大鼠在定向航行和空间探索中逃避潜伏期时间和穿越平台时间延长,穿越平台次数减少(P<0.05);脑组织中AChE和BuChE活性升高,血浆中AChE和BuChE活性降低(P<0.05),经过灯盏细辛治疗后痴呆大鼠学习记忆能力有所提高,胆碱酯酶活性趋向于正常(P<0.05)。结论灯盏细辛能够提高痴呆大鼠学习记忆能力,促进胆碱酯酶活性趋向于正常。
- 郭莉莉官志忠
- 关键词:灯盏细辛痴呆学习记忆能力胆碱酯酶
- 灯盏细辛活性部位对神经细胞α7尼古丁受体表达的影响被引量:1
- 2010年
- 目的:研究灯盏细辛活性部位对SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体(nAChR)亚单位在蛋白质水平的表达以及对抗β-淀粉样蛋白的毒性作用。方法:灯盏细辛经乙醇提取、乙酸乙酯及正丁醇萃取、再以反相硅胶柱分离等方式得到极性部位,选取一定浓度的灯盏细辛提取物处理神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)后,用Western blotting方法测定α7 nAChR蛋白水平的变化;再将能明显上调α7 nAChR蛋白水平的灯盏细辛提取物预处理SH-SY5Y细胞后,加入Aβ25-35处理,用比色法测定MTT还原率,观察灯盏细辛活性部位对细胞毒性的影响。结果:灯盏细辛醇提乙酸乙酯及正丁醇部位、以及该部位经反相硅胶柱分离的低极性部位均能显著上调α7 nAChR蛋白水平,并减弱β-淀粉样蛋白引起的细胞损伤。结论:灯盏细辛活性部位具有一定的神经保护作用,其机制之一可能与上调α7 nAChR有关。
- 邓婕闫秀明齐晓岚单可人黄勇王永林官志忠
- 关键词:灯盏细辛Β-淀粉样蛋白
- UPLC-PDA法同时测定灯盏细辛中飞蓬苷、绿原酸和野黄芩苷的含量被引量:4
- 2010年
- 目的:建立同时测定灯盏细辛中飞蓬苷、绿原酸和野黄芩苷含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA),BEHC18色谱柱(2.1mm×150mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱(0min,2%A;3min,5%A;4min,13%A;6min,15%A;7min,18%A;9min,19%A;9.1min,80%A;10min,80%A;),流速为0.35mL/min,柱温40℃,检测波长:260nm(检测飞蓬苷),326nm(检测绿原酸)和335nm(检测野黄芩苷)。结果:飞蓬苷、绿原酸和野黄芩苷浓度分别在28.32~453.12μg/mL(r=0.9999),12.50~200μg/mL(r=0.9996),25.08~401.20μg/mL(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为101.43%(RSD=1.72%),97.49%(RSD=1.61%),99.38%(RSD=2.04%)。结论:本方法快速、准确,重复性好,可较全面地评价灯盏细辛药材的质量。
- 郑林王永林王爱民乔希官志忠兰燕宇
- 关键词:灯盏细辛绿原酸野黄芩苷
- β淀粉样肽及冈田酸对大鼠脑内突触素和发动蛋白Ⅰ表达的影响被引量:1
- 2010年
- 目的:探讨β淀粉样肽(Aβ)及冈田酸(OA)对大鼠学习记忆能力及脑内突触素和发动蛋白Ⅰ的表达影响。方法:采用立体定向方法将Aβ1-42及OA分别注入SD大鼠双侧海马CA1区,2个月后水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,Western印迹及实时聚合酶链反应(real-time PCR)检测大鼠脑组织中突触素和发动蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组相比,Aβ注射组、OA注射组及Aβ+OA共同注射组均能引起大鼠学习记忆能力降低,各组脑组织中突触素、发动蛋白Ⅰ及mRNA表达均降低(P<0.01),其中以Aβ+OA共同注射组改变尤为明显。结论:Aβ和OA均可降低大鼠学习记忆能力,降低突触素和发动蛋白Ⅰ的表达,该改变可能与AD发病机制中学习记忆能力减退有关。
- 曹颖肖雁吴昌学官志忠
- 关键词:Β-淀粉样肽冈田酸突触素阿尔茨海默病
- 灯盏细辛组分对脑神经细胞损伤保护作用的谱效关系研究被引量:22
- 2010年
- 目的:研究灯盏细辛中各组分对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞的保护作用,探讨其在阿尔茨海默病(AD)治疗中的作用物质基础。方法:用柱色谱技术将灯盏细辛提取物划分为3个极性组分,并采用正交法将其配伍,以细胞MTT还原率、脂质过氧化产物(丙二醛,MDA)、神经型尼古丁受体α7蛋白表达等为活性指标,研究灯盏细辛各配伍组分对β-淀粉样肽(Aβ)损伤神经细胞的保护作用;将各配伍组分活性信息与其相应的UPLC指纹图谱化学信息进行方差分析和相关性分析研究,推测活性物质基础。结果:谱效相关性研究发现,灯盏细辛在指纹图谱中的B,C组分段具有明显活性;其中4,7-12号色谱峰与活性呈现正相关。结论:通过谱效研究,推测了灯盏细辛体外对抗Aβ神经细胞毒性的活性组分以及化学成分。为灯盏细辛深层次研究开发奠定一定的实验基础。
- 黄勇齐晓岚官志忠王永林王爱民李翠兵迟明艳
- 关键词:灯盏细辛谱效关系Β-淀粉样肽阿尔茨海默氏病
- 阿尔茨海默病患者脑组织中突触蛋白表达改变被引量:6
- 2009年
- 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种常见于老年人的中枢神经系统退行性变疾病,以进行性认知功能障碍为主要临床表现,其典型神经病理学特征是老年斑、神经原纤维缠结及神经元丢失等。近来研究显示,AD脑中突触功能并非最佳状态,许多与突触功能密切相关的蛋白表达异常。
- 曹颖Rivka Ravid官志忠
- 关键词:阿尔茨海默病患者蛋白表达异常脑组织神经原纤维缠结认知功能障碍
- 灯盏细辛活性部位对抗β-淀粉样蛋白引起的细胞凋亡被引量:2
- 2010年
- 目的:研究灯盏细辛醇提物不同活性部位对β-淀粉样蛋白(Aβ)引起的神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的拮抗作用,探讨其是否在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)治疗中有神经保护作用。方法:选用灯盏细辛醇提物不同活性部位及Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,用比色法测定MTT还原率,Annexin V-FITC试剂盒测定细胞凋亡水平。结果:安全浓度的灯盏细辛醇提物不同活性部位能对抗Aβ引起的MTT还原率降低和细胞凋亡。结论:灯盏细辛醇提物不同活性部位可对抗Aβ的神经毒性作用。
- 闫秀明邓婕齐晓岚单可人黄勇王永林官志忠
- 关键词:灯盏细辛细胞凋亡Β-淀粉样蛋白神经母细胞瘤
- 灯盏细辛对神经细胞尼古丁受体表达的影响及其神经保护作用研究被引量:6
- 2009年
- 目的研究中药灯盏细辛对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞神经型尼古丁受体表达的影响及其对抗β淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性作用机制。方法采用比色法测定细胞MTT还原率筛选药物浓度安全范围,选取一定浓度的灯盏细辛乙醇提取物醋酸乙酯部位处理SH-SY5Y细胞后,再加入Aβ1-42处理,测定MTT还原率,蛋白质印迹法(W estern b lotting)方法测定神经型尼古丁受体α3、α7蛋白表达的变化;采用改进的E llm an比色法测定细胞培养基中乙酰胆碱酯酶(Ace-tylcholinesterase,AChE)及丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BuChE)活性。结果灯盏细辛乙醇提取物醋酸乙酯部位能提高细胞α3及α7尼古丁受体亚单位蛋白质表达水平;降低细胞乙酰胆碱酯酶活性;并能对抗Aβ引起的MTT还原率降低。结论灯盏细辛乙醇提取物醋酸乙酯部位能上调尼古丁受体亚单位蛋白表达水平,降低细胞乙酰胆碱酯酶活性,且能对抗Aβ的神经毒性作用,在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用。
- 齐晓岚黄勇王永林王爱民官志忠
- 关键词:灯盏细辛SH-SY5Y细胞尼古丁受体Β-淀粉样蛋白胆碱酯酶阿尔茨海默氏病
- 贵州产灯盏细辛药材超高效液相指纹图谱研究被引量:2
- 2011年
- 目的建立灯盏细辛药材的超高效液相(UPLC)指纹图谱,为其质量控制提供快速、科学的方法。方法采用BEHC18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 ml·min-1,进样量1μl,柱温40℃,检测波长290 nm。结果在16 min内得到灯盏细辛药材的指纹图谱,对其中8个色谱峰进行了初步归属,并对贵州不同产地的12批药材样品进行了分析,其相似度达到0.97以上。结论相对于HPLC指纹图谱,UPLC指纹图谱方法具有更好的分离效率、灵敏度,并大大缩短了分析时间,适合于灯盏细辛药材的质量控制。关键词:灯盏细辛;指纹图谱;
- 郑林乔希黄勇王永林官志忠王爱民兰燕宇
- 关键词:灯盏细辛指纹图谱超高效液相色谱