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国家高技术研究发展计划(2011AA10A205): 作品数：87 被引量：705H指数：13; 相关作者：李纪顺杨合同刘大群李亚宁吴毅歆更多>>; 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所河北农业大学山东省科学院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学化学工程轻工技术与工程更多>>

利用玉米秸秆培养木霉菌分生孢子的研究被引量：5: 2013年; 为了研究利用资源丰富的玉米秸秆作为发酵基质生产木霉分生孢子的可行性,本文研究了秸秆基质细度、含水量、外加营养成分及搅拌等因素对木霉分生孢子产孢量的影响。结果表明,细度适中,在40～10目之间,含水量60%～70%,利于木霉产孢,分生孢子产量可达1.27×1010cfu/g(干培养物);接种量对最终产孢量影响不大,处理间差异不明显;通过添加碳源葡萄糖,并加入少量(NH4)2SO4、CaCO3、KH2PO4和MgSO4无机盐,可显著提高木霉分生孢子的产量,分生孢子产量最高可达2.0×1010cfu/g(干培养物);但在固体培养过程中,对基质进行搅拌,不利于木霉分生孢子的形成。由此表明,利用玉米秸秆固体发酵生产木霉分生孢子可行、高效、无污染,对于木霉菌剂的生产和推广具有重要的参考价值。; 张广志李纪顺扈进冬张新建杨合同李红梅; 关键词：玉米秸秆木霉分生孢子固体发酵

产酶溶杆菌OH11双精氨酸转运系统关键基因tatC的功能分析: 2013年; 本研究采用同源重组的方法对产酶溶杆菌Lysobacter enzymogenes OH11中双精氨酸转运系统关键基因tatC进行缺失突变,通过对突变体表型及表型相关基因表达分析来研究该基因在菌株OH11中的功能,重点分析该基因与产酶溶杆菌中热稳定抗真菌因子HSAF生物合成的关系。研究结果表明,基因tatC的突变显著提高了HSAF生物合成的产量,以及HSAF生物合成的关键基因pks/nrps转录水平;改变了菌株OH11的细胞形态,使细胞从棍棒状变为椭圆状;并降低了菌株OH11生物膜的形成和滑动能力以及在营养缺陷型(10%TSB)培养基中的生长速率,但不改变其在营养丰富培养基(100%TSB)中的生长速率。此外,与野生型OH11相比,基因tatC突变株不改变其蛋白酶、纤维素酶、β1,3葡聚糖酶和几丁质酶的产生水平以及其对瓜果腐霉Pythium apanidermatum、立枯丝核菌Rhizoctonia solani和禾谷镰刀菌Fusarium graminearum的拮抗能力。; 徐菲菲钱国良汪郁兰张娟范加勤胡白石刘凤权; 关键词：功能分析

蛋白激发子PeaT1在枯草芽胞杆菌中的分泌表达及重组菌株提高小麦抗旱和促生的作用被引量：4: 2011年; PeaT1是从极细链格孢菌Alternaria tenuissima中分离的一种蛋白激发子,具有促进植物生长和诱导植物产生系统获得抗性的功能,为了实现peaT1基因在枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis中的分泌表达,增加其应用途径,从枯草芽胞杆菌基因组DNA中分别扩增获得P43启动子和nprB基因的信号肽序列,并用SOE(Splicing by over lapping extension)方法与peaT1基因连接,将连接产物克隆到大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭表达载体pHY300-PLK上,构建了重组表达载体pHY43N-peaT1。将重组载体转化枯草芽胞杆菌WB800菌株,SDS-PAGE和Western blotting分析证实,在NprB信号肽的引导下,枯草芽胞杆菌成功分泌表达了PeaT1蛋白。构建的重组菌株能够显著增强幼苗抗旱性,提高小麦株高。; 王立梅杨秀芬曾洪梅邱德文郭立华刘峥; 关键词：蛋白激发子枯草芽胞杆菌分泌表达重组菌

中国马铃薯疮痂病菌快速PCR检测技术被引量：5: 2013年; 【目的】马铃薯疮痂病菌具有明显的组成多样性,通过筛选不同疮痂病菌的通用探针引物,建立针对该类病原菌的定性检测方法。【方法】以目前中国存在的不同致病种的代表菌株CPS-1(Streptomyces scabies)、CPS-2(S.galilaeus)、CPS-3(S.acidiscabies)、CPS-4(S.turgidiscabies)为材料,根据NCBI GenBank中已登记的疮痂病菌特有毒素合成基因簇中的基因txtA、txtB、txtC(P450)、txtD(nos)等序列设计引物,对不同菌株的基因组扩增,选择特异性和稳定性较高的引物作为探针引物,经温度梯度筛选优化反应体系后建立成熟的检测技术。【结果】获得的通用检测引物B1/B2对所有致病菌株均表现较好的特异性,可稳定扩出目的条带,而非致病菌株均无条带。利用孢子稀释法验证建立的检测方法对菌株DNA的灵敏度为20 pg·μL-1,对孢子的检测阈值约为4.0 CFU/μL。对测试样品基因组扩增结果表明,疮痂病原链霉菌、病薯样品组织、病田土样均检测到目的条带,而非疮痂病原链霉菌、健康薯块组织、非病田土样和其它菌株均未扩出目的条带,说明该方法的特异性较好。【结论】建立了马铃薯疮痂病菌的定性检测方法,可实现对菌株、病组织和土壤样品的快速检测。; 郭凤柳张海颖于秀梅赵伟全刘大群; 关键词：马铃薯疮痂病菌 PCR检测特异性引物

假单胞菌产生的抗生素被引量：14: 2015年; 假单胞菌属Pseudomonas群体庞大,广泛分布于土壤、水体和动植物中,并产生大量的次生代谢产物以适应环境的变化。抗生素为假单胞菌在自然生态条件下的生存提供了重要的竞争手段,同时也是生防假单胞菌防治植物病害的主要机制之一。本文介绍假单胞菌产生的抗生素种类、作用机制、不同浓度下抗生素的生物学功能,以及假单胞菌抗生素在医学和农业病害防治中的应用。; 张力群张俊威; 关键词：假单胞菌抗生素生物农药信号

木霉菌LTR-2可湿性粉剂对6种蔬菜灰霉病的田间防治效果被引量：3: 2014年; 在田间用木霉菌LTR-2可湿性粉剂1 500 g/hm2喷雾,防治番茄、茄子、五彩椒、辣椒、扁豆和黄瓜6种蔬菜叶部灰霉病的效果分别为77.96％、64.45％、71.43％、70.24％、72.71％、75.41％,对照药剂40％嘧霉胺悬浮剂480g/hm2的防治效果为71％～81％.木霉菌可湿性粉剂的施药时期应掌握在发病初期,以后每隔7d用1次药,连续用药2～3次.使用剂量1 500 g/hm2,可有效地防治蔬菜灰霉病的发生.; 戴宝扈进冬李纪顺杨合同; 关键词：木霉菌灰霉病可湿性粉剂药效

寡糖生物防治应用及机理研究进展被引量：18: 2015年; 植物诱导防御是当前国际生物防治学的热点内容,研究发现寡糖类物质是一类有效的诱导子,对于植物具有免疫调节作用,可以增强植物应对病虫害的能力。利用其进行植物病虫害防治是植物保护的新途径。本文将对目前应用较为广泛的寡糖诱导子来源和实际应用情况,以及寡糖诱抗机理研究中寡糖识别机制的研究进展进行综述。; 王文霞赵小明杜昱光尹恒; 关键词：寡糖生物防治植物病害植物免疫受体

苏云金芽孢杆菌BtR05普鲁兰酶基因pul在重组大肠杆菌中的自诱导表达: 2015年; 以苏云金芽孢杆菌BtR05基因组DNA为模板,PCR扩增得到其普鲁兰酶基因pul,构建了表达载体p ET(K)-Trx-pul,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中。用IPTG和自诱导表达系统分别对该酶基因进行诱导表达。Tricine-SDSPAGE结果表明,普鲁兰酶基因pul可通过自诱导获得大量表达。; 李桂龙扈进冬李纪顺侯运华; 关键词：苏云金芽孢杆菌普鲁兰酶

群体感应调控因子ComA对枯草芽胞杆菌NCD-2抑菌物质产生和生物膜形成的影响被引量：4: 2016年; 为明确群体感应系统在枯草芽胞杆菌NCD-2菌株抑菌活性和生物膜形成中的作用,通过同源重组技术对群体感应系统中的comA基因进行定位缺失突变,分别比较了NCD-2菌株和comA基因突变子在胞外酶合成、抑菌活性、脂肽抗生素(丰产素)产生以及生物膜形成上的差异,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR技术比较了二者生物膜基质编码基因epsA和tasA的表达情况。结果表明,通过同源重组技术获得了comA基因突变子MA-4,同菌株NCD-2相比,其在胞外蛋白酶和纤维素酶的合成能力、对番茄灰霉菌Botrytis cinerea的抑菌活性、丰产素的合成量和生物膜的形成能力上均明显下降;生物膜基质编码基因tasA的表达量下降了70%,而epsA的表达量变化不明显。表明ComA是NCD-2菌株脂肽抗生素和生物膜形成中的重要调控因子。; 王培培郭庆港李社增鹿秀云张晓云马平; 关键词：枯草芽胞杆菌生物膜

限制性内切酶介导的粉红粘帚霉67-1转化体系构建被引量：2: 2013年; 本文将含有潮霉素抗性基因(hph)的质粒pAN7-1通过限制性内切酶介导法转入植病生防真菌粉红粘帚霉Clonostachys rosea 67-1中,并由此建立该生防真菌的遗传转化体系。研究结果表明,PEG介质含量、限制性内切酶种类和浓度、质粒形态和反应时间对转化效率具有显著的影响。当质粒经线性化后加入40%PEG3350和20 U HindⅢ,室温下转化10 min时,转化效率可达到30～40 CFU.μg 1质粒DNA。PDA平板上连续培养3代,再转接到潮霉素抗性平板中,获得遗传稳定的转化子。PCR检测、Southern杂交和Real-time PCR检测等证明hph基因已整合到基因组中,且多为单拷贝插入。对随机挑取的50个转化子生长性状的测定结果表明,20%的转化子在PDA培养基中生长较快,12%的转化子产孢水平较高;另有16%～20%的转化子生长缓慢、产孢量减少;还有4%的转化子生长微弱,且无明显产孢现象。上述方法可以成功用于在粉红粘帚霉中引入外源基因,为今后生防粘帚霉高效工程菌株的构建提供了依据。; 许梦秋姜杰孙漫红谢响明李世东; 关键词：原生质体转化潮霉素抗性

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