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国家自然科学基金(31160301)

作品数：6 被引量：45H指数：3
相关作者：黄东亮廖青李杨瑞秦翠鲜李双喜更多>>
相关机构：广西农业科学院中国农业科学院甘蔗研究中心更多>>
发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西农业科学院基本科研业务专项项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 4篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 5篇甘蔗
  • 4篇蔗糖
  • 4篇蔗糖磷酸合成...
  • 4篇磷酸合成酶
  • 3篇克隆
  • 3篇家族
  • 2篇基因
  • 1篇遗传转化体系
  • 1篇愈伤
  • 1篇愈伤组织
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇蔗糖积累
  • 1篇植物
  • 1篇糖积累
  • 1篇农杆菌
  • 1篇农杆菌介导
  • 1篇转化体
  • 1篇克隆及原核表...
  • 1篇基因克隆

机构

  • 6篇广西农业科学...
  • 5篇中国农业科学...

作者

  • 6篇李杨瑞
  • 6篇廖青
  • 6篇黄东亮
  • 5篇秦翠鲜
  • 4篇汪淼
  • 4篇李双喜
  • 4篇陈忠良
  • 4篇桂意云
  • 2篇方锋学
  • 1篇林丽
  • 1篇周建辉

传媒

  • 3篇南方农业学报
  • 2篇中国生物工程...
  • 1篇生物技术通报

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2014
  • 2篇2013
  • 2篇2012
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
甘蔗B家族蔗糖磷酸合成酶基因SofSPSB的克隆及原核表达被引量：9
2013年
【目的】克隆甘蔗B家族SofSPSB基因并进行原核表达,为进一步研究甘蔗SPS酶学特性及SPS活性调控机制奠定基础。【方法】在进化分析的基础上,通过同源克隆获得甘蔗SofSPSB基因部分序列,再结合RACE技术获得全长cDNA序列。扩增SofSPSB基因ORF并连到原核表达载体pETBlue-2上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中表达。【结果】通过比对B家族中进化关系很近的玉米(Zea mays)ZmSPS1和水稻(Oryza sativa)OsSPS1基因序列,并在保守区设计一对引物扩增获得甘蔗B家族SPS基因(SofSPSB)2330bp序列。结合5'-RACE和3'-RACE技术获得3481 bp SofSPSB基因全长cDNA序列,该序列包含一个3225bp的开放阅读框(ORF);起始密码子(ATG)位于转录起始位点后56bp处,终止密码子(TGA)后有一段201bp的非编码序列,并带有真核生物典型的polyA尾巴;编码1074个氨基酸,SofSPSB与Zm-SPS1、OsSPS1的核苷酸序列同源性分别为94.7%和81.3%,氨基酸序列同源性分别为96.0%和83.9%;其理论分子量Mw=118.96kDa,等电点pI=6.30。经原核表达后纯化获得带6×His标签的融合蛋白。【结论】克隆获得甘蔗B家族Sof-SPSB基因全长cDNA序列,成功构建了SofSPSB基因原核表达载体,使其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。
黄东亮秦翠鲜陈忠良桂意云李双喜汪淼廖青李杨瑞
关键词：甘蔗蔗糖磷酸合成酶克隆原核表达
植物蔗糖磷酸合成酶研究进展被引量：34
2012年
蔗糖磷酸合成酶(Sucrose Phosphate Synthase,以下简称SPS)是植物体内控制蔗糖合成的关键酶。植物体内蔗糖的积累与SPS活性正相关,SPS还参与植物的生长和产量形成,并在植物的抗逆过程中起重要作用。高等植物中至少存在A、B、C三个家族的SPS,而禾本科植物至少存在A、B、C、DIII和DIV五个家族的SPS。不同植物体内不同家族的SPS基因的表达特性不同,它们所发挥的功能也存在差异。SPS的活性在基因表达调控和SPS蛋白磷酸化共价修饰作用两个层面受到植物生长发育、光照、代谢产物、外源物质如激素和糖类等多种因素的复杂调控。转基因研究表明,转SPS基因是提高作物产量和品质、增强作物抗逆性的有效途径,值得深入研究。全面总结了国内外在植物蔗糖磷酸合成酶方面的研究进展,并提出问题与研究展望,期望为进一步研究并利用植物SPS基因改良作物品种提供参考。
黄东亮李双喜廖青秦翠鲜林丽方锋学李杨瑞
关键词：植物蔗糖磷酸合成酶基因
甘蔗DⅢ家族蔗糖磷酸合成酶基因SofSPSDⅢ克隆及其hpRNA载体构建被引量：3
2014年
【目的】克隆甘蔗DⅢ家族SofSPSDⅢ基因并构建其hpRNA表达载体,为研究该基因生物学功能奠定基础。【方法】通过同源克隆获得甘蔗SofSPSDⅢ基因部分序列,利用RACE技术获得其全长cDNA。扩增SofSPSDⅢ目的基因约500 bp序列,利用中间载体pHANNIBAL构建该片段的hpRNA结构,然后用Not Ⅰ将整个hpRNA结构切下,克隆到双元植物表达载体pART27上,构建该基因的hpRNA表达载体。【结果】通过同源克隆和RACE技术获得SofSPSDⅢ基因全长cDNA序列,该基因全长3252 bp,5′端UTR长度59 bp,3′端UTR长度292 bp,开放阅读框(ORF)长度2895 bp,带有真核生物典型的poly(A)尾巴(GenBank登录号:HQ117935)。该基因编码蛋白含有964个氨基酸,理论分子量108.03kDa,等电点pI=6.66;SofSPSDⅢ与SoSPS2、SbSPS和TaSPS9的氨基酸序列同源性分别为99.0%、98.9%和90.0%。构建获得SofSPSDⅢ基因的hpRNA载体pART-DⅢ-Ri。【结论】成功克隆甘蔗DⅢ家族SofSPSDⅢ基因并构建基hpRNA载体,可为下一步沉默该基因、进而解析该基因的生物学功能奠定基础。
汪淼李双喜桂意云秦翠鲜陈忠良廖青李杨瑞黄东亮
关键词：甘蔗蔗糖磷酸合成酶克隆发夹RNA
甘蔗各家族SPS基因表达特性分析被引量：4
2016年
【目的】通过时空表达特性分析,初步推测甘蔗各家族蔗糖磷酸合成酶（SPS）基因在甘蔗蔗糖积累途径中的功能,为研究甘蔗各家族SPS基因的生物学功能奠定基础。【方法】采用荧光定量PCR分析甘蔗4个家族SPS基因在高、中、低糖甘蔗品种未成熟叶片、成熟叶片和茎中的时空表达特性。【结果】在甘蔗伸长期、蔗糖积累前期和蔗糖积累后期,Sof SPSDⅢ基因在所有甘蔗品种的未成熟叶片、成熟叶片和茎中均高水平稳定表达,相对表达量在5.3-8.1;Sof SPSB基因在成熟叶片中几乎不表达,而以茎中表达量最高。在伸长期,Sof SPSC和Sof SPSA基因表达较强,相对表达量分别为7.3-14.2和1.5-4.4;在蔗糖积累前期,Sof SPSC基因表达稍有降低,但仍处于较高水平,相对表达量达为4.6-8.9,而Sof SPSA基因表达加强,相对表达量达3.8-6.9;在蔗糖积累后期,Sof SPSC基因在成熟叶片中的表达量比蔗糖积累前期下降4.0-7.2倍,且均比未成熟叶和茎中下降约6.0倍,而Sof SPSA基因在不同组织中的表达量比蔗糖积累前期下降1.8-5.7倍。各家族SPS基因在不同糖分甘蔗品种间的表达趋势一致。【结论】甘蔗D家族SPS基因维持甘蔗蔗糖合成的基本功能,通过调控C、A家族SPS基因的表达来调控蔗糖合成的强度,B家族SPS基因不参与甘蔗源叶中蔗糖合成而参与蔗糖的积累与利用。
桂意云汪淼秦翠鲜陈忠良廖青李杨瑞黄东亮
关键词：甘蔗蔗糖磷酸合成酶蔗糖积累
农杆菌介导甘蔗愈伤组织遗传转化体系的优化被引量：3
2013年
以甘蔗胚性愈伤组织为材料,对愈伤组织增殖、分化、幼苗生根的最适抗生素(Km)浓度进行筛选,并对影响农杆菌介导的甘蔗遗传转化因素:预培养时间、侵染时间和共培养时间等进行了研究。最后确立了甘蔗愈伤组织增殖、分化及幼苗生根三个阶段的最适抗生素(Km)浓度分别为300 mg/L,40 mg/L,20 mg/L。确定了农杆菌浸染的预培养时间、侵染时间和共培养时间分别为4d,30min,4d。PCR检测表明,61.6%的抗性植株可扩增出预期的片段,表明外源基因已经整合到甘蔗基因组中。为进一步的甘蔗基因功能验证及转基因研究提供良好的技术支撑。
秦翠鲜陈忠良桂意云汪淼周建辉廖青李杨瑞黄东亮
关键词：甘蔗农杆菌
甘蔗基因克隆研究进展
2012年
甘蔗是重要的糖料和能源作物,在我国,其糖产量占全国食糖产量的94%。甘蔗是高光合效率C4作物,其蔗糖含量是所有植物中最高的,其基因组中蕴藏着大量重要基因。因此,甘蔗基因克隆对甘蔗品种定向改良具有重要意义。从蔗糖代谢、生长发育和抗逆性三个方面全面总结甘蔗基因克隆的研究进展,并提出今后研究的建议,以期为今后甘蔗基因研究提供参考。
黄东亮李双喜廖青方锋学李杨瑞
关键词：甘蔗基因克隆
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