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过氧化氢酶家族部分成员在马尔尼菲青霉的相关研究被引量：1: 2008年; 目的通过检测过氧化氢酶家族部分成员不同状态下表达差异,从而推测其与马尔尼菲青霉致病的可能相关性。方法运用RT-PCR、real-timePCR和Western-blotting检测马尔尼菲青霉过氧化氢酶家族成员cpeA/Catp在双相转化和巨噬细胞吞噬前后基因和/或蛋白表达差异。结果cpeA基因在转化为酵母相后及在被巨噬细胞吞噬后表达水平上升。Catp蛋白酵母相表达水平较菌丝相升高(4.87±0.94∶1,P<0.05)。结论cpeA基因和/或Catp蛋白在致病态酵母相以及在巨噬细胞内的氧应激环境中表达升高,推测可能有助于马尔尼菲青霉的存活和致病。; 张军民章慧孙九峰席丽艳; 关键词：马尔尼菲青霉实时定量PCR

马尔尼菲青霉菌丝相和酵母相的异柠檬酸裂解酶表达差异的研究被引量：1: 2007年; 目的比较不同培养条件下马尔尼菲青霉(Pm)菌丝相及酵母相的异柠檬酸裂解酶(ICL)基因转录水平,初步探讨乙醛酸循环在Pm致病中的意义。方法将Pm分为高糖培养的菌丝相(MH)、低糖培养的菌丝相(ML)及高糖培养的酵母相(YH)、低糖培养的酵母相(YL)4组,采用实时定量RT-PCR法比较各组ICL基因转录水平。结果MH、ML、YH、YL组ICL相对表达量分别为1.000、3.000、3.654、69.530,组间差异有统计学意义(P<0.05);温度增高和葡萄糖浓度降低两因素之间具有协同效应。结论Pm酵母相的ICL转录水平较菌丝相增高,而且低糖培养时增高更为显著,提示乙醛酸循环可能在Pm致病过程中起着重要的作用。; 李军席丽艳刘红芳张军民李希清徐晓容; 关键词：马尔尼菲青霉 RT-PCR

马尔尼菲青霉异柠檬酸裂解酶的表达与其酵母相生长的关系: 2007年; 目的通过研究马尔尼菲青霉(PM)异柠檬酸裂解酶(ICL)基因转录水平与其酵母相生长的关系,初步探讨乙醛酸循环在PM致病中的意义。方法将PM分生孢子分别接种于中性培养基以及产生不同浓度一氧化氮的酸性培养基中,37℃培养72 h,采用实时定量RT-PCR法检测各组PM的ICL基因转录水平,检测340 nm吸光度评估PM的生长情况。结果不产一氧化氮的酸性培养基中PM较中性培养基中PM的ICL转录水平高(P<0.01),含菌量多(P<0.01);产一氧化氮的酸性培养基中PM的ICL转录水平降低(P<0.01),含菌量减少(P<0.01),且随一氧化氮浓度升高,下降趋势更明显,组间差异有显著性(P<0.01);ICL转录水平与生长之间呈正相关(相关系数r=0.99,P<0.01)。结论适当的酸性环境促进PM的ICL转录,利于PM的生长;一氧化氮明显抑制ICL转录,抑制PM的生长;乙醛酸循环可能在PM致病过程中起着重要的作用。; 李军席丽艳刘红芳张军民李希清徐晓容; 关键词：马尔尼菲青霉一氧化氮 RT-PCR

树突状细胞与马尔尼菲青霉酵母体外相互作用的研究: 2008年; 本文探讨了树突状细胞(DCs)在抗马尔尼菲青霉感染免疫中的作用。用细胞因子rhGM-CSF和rhIL-4诱导人外周血单核细胞分化为树突状细胞,观察DCs的形态,并用流式细胞仪进行DCs的表型测定,ELISA方法检测培养上清液IL-12p70的浓度,混合淋巴细胞反应检测DCs刺激T淋巴细胞的增殖能力,实时荧光定量PCR检测趋化因子受体CCR7、CXCR4的mRNA的表达。倒置显微镜下可见诱导获得的DCs细胞形态不规则,表面伸展出大量树突。与马尔尼菲青霉酵母共同培养24h后DCs的胞内含有大量的酵母细胞;细胞表型CD86、CD83、HLA-DR和CD40的表达明显增高;刺激T淋巴细胞增殖的能力增强;趋化因子受体CCR7和CXCR4的mRNA表达量增加且能够产生IL-12p70但产生的量低于LPS刺激组。DCs能吞噬加热灭活的马尔尼菲青霉酵母,并趋于成熟,抗原呈递能力增加,但是产生IL-12p70的量较低,可能造成宿主抗马尔尼菲青霉酵母的细胞免疫功能的不足。; 马黎席丽艳赵文杰孙九峰鲁长明张军民李希清刘红芳; 关键词：马尔尼菲青霉树突状细胞抗原呈递细胞

马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及TNF-α分泌的影响被引量：13: 2008年; 目的研究马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及促炎因子TNF-α分泌的影响。方法马尔尼菲青霉酵母相菌液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养24h,采用流式细胞技术检测巨噬细胞TLR-2、TLR-4及Dectin-1的平均荧光强度;共聚焦显微镜观察荧光染色的受体;ELISA法测定培养液上清中TNF-α的浓度;Real time PCR检测不同时间段TNF-α的mRNA表达。结果马尔尼菲青霉可使巨噬细胞TLR-2、TLR-4、Dectin-1的平均荧光强度均增高,并激活巨噬细胞产生TNF-α。结论马尔尼菲青霉上调了巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达,巨噬细胞的激活与TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达上调相关。; 赵文杰席丽艳马黎张军民李希清鲁长明李飞曾翰翔; 关键词：马尔尼菲青霉巨噬细胞

巨噬细胞内马尔尼菲青霉异柠檬酸裂解酶的表达被引量：4: 2007年; 目的比较巨噬细胞内马尔尼菲青霉(Pm)的异柠檬酸裂解酶(ICL1)基因转录及蛋白表达水平,初步探讨乙醛酸循环在Pm致病中的意义。方法将Pm分生孢子与Raw264.7细胞共培养16份,随机分为4组:处理组(T)采用脂多糖及小鼠γ干扰素处理,处理抑制组(TI)在处理组的基础上加入一氧化氮合酶抑制剂(LNMMA),对照组(C)加入同体积的培养基,对照抑制组(CI)在对照组基础上加入LNMMA;采用实时RT-PCR法比较各组细胞内Pm的ICL1基因转录水平;采用酶催化反应检测ICL1蛋白表达及活性;采用菌落计数比较各组细胞内Pm的数量;采用化学法检测一氧化氮含量。结果C组、CI组、T组、TI组的ICL1相对转录水平分别为1.00、1.42、33.09、74.88,蛋白表达及活性分别为0.06、0.07、0.18、0.93,组间差异有统计学意义(P<0.05);处理组一氧化氮含量较其他组增高(P<0.01),菌落计数减少(P<0.01)。结论ICL1对Pm在功能抑制的巨噬细胞内的生长起着重要的作用,正常巨噬细胞产生的活性氮成分能抑制ICL1基因转录及蛋白表达,从而抑制巨噬细胞内Pm的生长。; 李军席丽艳刘红芳张军民李希清徐晓容; 关键词：马尔尼菲青霉一氧化氮反转录聚合酶链式反应

艾滋病合并马尔尼菲青霉病11例临床分析被引量：22: 2006年; 目的探讨11例艾滋病合并马尔尼菲青霉病患者的临床特征。方法对2002-2004年来我院住院和门诊就诊的11例艾滋病合并马尔尼菲青霉病患者的一般资料、临床表现、体征、实验室检查进行分析。结果11例患者中男9例,女2例,临床症状除非特征性的表现如发热、消瘦、贫血、肝脾淋巴结肿大外,8例合并有皮疹；3例有消化道症状,其中2例腹痛,1例腹泻、排红色湖状便：1例吞咽困难,进食梗阻感；5例有呼吸系统症状；1例关节痛；2例合并口腔念珠菌感染、4例骨髓、1例痰、1例血涂片、8例皮疹刮片或分泌物涂片、2例淋巴结和皮肤病理活检切片中可见成堆的PAS染色阳性的圆形或腊肠形分隔孢子。11株分离株经形态学、培养皆证实为马尔尼菲青霉,其中4株分离株经DNA分析证实为马尔尼菲青霉。结论艾滋病患者机会性感染中马尔尼菲青霉病的临床表现多样。; 李希清席丽艳鲁长明李军张军民; 关键词：获得性免疫缺陷综合征马尔尼菲青霉病

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国家自然科学基金(30470103)

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