国家自然科学基金(39870384)
- 作品数：13 被引量：25H指数：3
- 相关作者：孙黎光刘萍于卉影聂海祺李新鸣更多>>
- 相关机构：中国医科大学辽宁省血液中心暨沈阳中心血站沈阳军区总医院更多>>
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- 塞来希布对胃癌细胞增殖抑制作用
- 2008年
- 目的观察塞来希布对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进胃癌BGC-823细胞的增殖抑制影响,探讨塞来希布抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法不同浓度组的塞来希布作用于经25 ng/ml bFGF作用后的胃癌BGC-823细胞,用蛋白印迹(western blot)分析法检测环氧化酶-2(COX-2)、核转录因子-κB(NF-κB)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达变化。结果25 ng/ml bFGF通过PKB信号转导通路能增强胃癌BGC-823细胞中COX-2、NF-κB、VEGF蛋白的表达,对胃癌BGC-823细胞有促增殖作用,呈时间依赖性(P<0.01)。不同浓度组的塞来希布对经25 ng/ml bFGF作用的胃癌BGC-823细胞中COX-2、NF-κB、VEGF蛋白的表达均有抑制作用(P<0.01)。结论塞来希布对bFGF促进BGC-823胃癌细胞的增殖有一定的抑制作用。
- 聂海祺罗姚佳文涛孙黎光李剑平
- 关键词：BGC-823细胞碱性成纤维细胞生长因子增殖
- ERK1/2介导的bFGF对肝癌细胞系Bel-7402细胞增殖和凋亡的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:观察Ras-Raf-ERK1/2途径介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对肝癌细胞系Bel-7402细胞增殖和凋亡的影响,探讨bFGF及其信号转导途径与肝癌发生发展的关系。方法:以bFGF和PD98059处理Bel-7402细胞,流式细胞术检测细胞周期与凋亡情况;MTT法检测细胞增殖情况;Western blot检测细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)的活化。结果:bFGF处理,诱导细胞进入S期[S期细胞比例(27.49±0.72)%→(42.45±1.06)%];细胞增殖比明显增加,且与bFGF水平成剂量依赖关系,bFGF浓度为25 ng/ml时细胞增殖比最高为129%;使无血清饥饿诱导的凋亡细胞比例下降[(28.89±3.13)%(→1.70±2.10)%];时、量效依赖性地诱导ERK1/2活性增高。ERK激活性蛋白激酶(MEK1)抑制剂PD98059可抑制bFGF的这些作用。结论:bFGF通过Ras-Raf-ERK1/2途径介导,加速肝癌Bel-7402细胞的细胞周期进程,促进细胞增殖,抵抗无血清饥饿诱导的凋亡。在肝癌发生发展过程中,bFGF信号传递发挥了重要的作用。
- 刘萍孙黎光侯伟健于卉影
- 关键词：肝癌细胞外信号调节蛋白激酶增殖凋亡
- 酿酒酵母S期检查点通路上web2基因与rad53基因的位置关系
- 2006年
- 为探讨酿酒酵母(S.cerevisiae)S期检查点通路上,web2(wantsE1Abadly2,web2)基因与rad53基因的上下游位置及相互作用关系,利用羟基脲(hydroxyurea,HU)分别阻断web2突变株和野生株细胞的DNA合成.采用pHA-rad53质粒救助实验测定质粒源性Rad53蛋白是否能救助web2突变株对羟基脲的敏感性;Western印迹及免疫共沉淀反应检测Rad53蛋白表达及磷酸化.结果显示,pHA-rad53质粒可以救助web2突变株的存活;Western印迹检测到web2突变株内质粒源性Rad53蛋白表达增强而且至少Rad53部分蛋白为磷酸化蛋白.说明在HU作用下,过表达并磷酸化的质粒源性Rad53蛋白可以救助web2突变株的S期检查点功能缺陷,在酿酒酵母S期检查点通路上web2基因位于rad53基因上游,可能直接参与将检查点信号传递至Rad53蛋白.
- 李新鸣孙黎光刘萍白抚生付玥宣忠信
- 关键词：WEB2基因酿酒酵母
- bFGF促进肝癌Bel-7402细胞增殖的信号转导机制被引量：4
- 2006年
- 目的:分析肝癌细胞系Bel-7402中Ras-Raf-ERK1/2途径介导的bFGF对细胞周期素E(cyclinE)表达及细胞增殖的影响,以探讨肝癌细胞增殖的信号转导机制。方法:bFGF处理后用流式细胞术检测细胞增殖情况;Western印迹检测ERK1/2激酶的活化;RT-RCR方法检测cyclinE的基因表达。结果:FCM结果表明bFGF诱导细胞进入S期(27.49%±0.72%→42.45%±1.06%);bFGF时、量效依赖性地诱导Bel-7402细胞ERK1/2活性增高和cy-clinEmRNA表达。25ng/mlbFGF作用Bel-7402细胞10minERK1/2活性达高峰为对照组的3.84倍,作用8h后cyclinEmRNA表达达高峰为对照组的5.15倍;MEK1抑制剂PD98059可抑制bFGF的这些作用。结论:Ras-Raf-ERK1/2途径介导bFGF对cyclinEmRNA表达的诱导进而促进Bel-7402细胞的细胞周期进程,在肝癌增殖过程中bFGF信号转导发挥了重要的作用。
- 刘萍孙黎光唐玉海李新鸣
- 关键词：肝癌碱性成纤维细胞生长因子细胞周期素E信号转导
- PKB介导的bFGF对肝癌细胞周期素A表达的影响
- 2003年
- 目的:探讨bFGF是否通过PI3K/PKB途径调节周期素A的表达。方法:32P掺入法检测PKB酶活性,RT-PCR、Westernblot检测不同处理组Bel-7402细胞的cyclinA表达,流式细胞术分析细胞周期。结果:25ng/mlbFGF刺激细胞10min,就可使胞液和膜性PKB酶活性达高峰。cyclinAmRNA表达水平在8h达高峰,比对照升高了6.1倍。cyclinA蛋白表达在12h达高峰,比对照升高了1.8倍。wortmannin预处理后,PKB活性、cyclinAmRNA表达及cyclinA蛋白表达在各时间点均明显降低(P<0.05)。流式细胞术分析显示,bFGF处理组与对照组相比G1期细胞减少,S期细胞增多(P<0.01),wortmannin能抑制此促增殖作用(P<0.01)。结论:PI3K/PKB途径可介导bFGF对Bel-7402细胞的促增殖作用,通过调节cyclinA的转录活性促进其表达而促进细胞增殖。
- 于卉影彭博孙黎光张颐刘宁王晓鹏
- 关键词：蛋白激酶B碱性成纤维细胞生长因子肝癌细胞逆转录聚合酶链反应
- 蛋白激酶B抗细胞凋亡的信号转导机制被引量：1
- 2005年
- 蛋白激酶B是抗细胞凋亡的重要调节子。蛋白激酶B的抗细胞凋亡机制主要涉及:磷酸化FoxO降低其与凋亡有关的转录活性;使凋亡抑制剂存活蛋白(survivin)的表达增加;使NFκB活化并转位入核,启动抗凋亡基因的转录;使胱天蛋白酶8(caspase8)抑制剂FLIP(FADD likeICEinhibitoryprotein)的表达增加;磷酸化MDM2使其转位入核进而抑制p53的促凋亡作用;使糖原合成酶激酶3失活;磷酸化Bad使其与Bcl2或Bcl XL解离而抗细胞凋亡;直接磷酸化胱天蛋白酶9使其激活下游胱天蛋白酶的能力降低。
- 刘萍孙黎光
- 关键词：蛋白激酶B细胞凋亡信号转导
- 细胞外信号调节蛋白激酶在人胃癌细胞Fas介导的凋亡信号通路中的作用被引量：3
- 2005年
- 目的 分析在胃癌细胞系SGC 790 1中,细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在Fas介导的信号通路中的表达及其作用,探讨该信号通路与胃癌发生和发展的关系。方法 利用同位素标记法和特异性识别磷酸化ERK抗体进行Western印迹杂交,检测Fas抗体孵育不同时间点胃癌细胞ERK的活性;利用流式细胞术检测胃癌细胞在各处理因素作用下细胞凋亡情况。结果 经抗Fas抗体处理后,胃癌细胞中ERK活性升高,在30min时达高峰;在MEK1抑制剂PD980 5 9作用下,ERK活性明显下降。抑制剂预处理组sub G1 细胞占30 .5 %±2 .6 %,单纯抗Fas抗体处理组sub G1 细胞占3.1 %±0 .2 %,对照组为3.0 %±0 .1 %。结论 在胃癌细胞中,抗Fas抗体可介导ERK活性的升高,导致细胞对Fas介导的凋亡信号脱敏;MEK1抑制剂可使胃癌细胞对Fas介导的凋亡信号敏感;胃癌细胞通过Fas介导的ERK的活化,逃逸免疫监视,持续生长。
- 刘宁孙黎光于卉影张颐杨菁王晓鹏
- 关键词：细胞外信号调节蛋白激酶FAS介导信号通路人胃癌细胞ERK活性凋亡信号
- bFGF和celecoxib对胃癌BGC-823细胞株生长的影响及其机制被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨bFGF和celecoxib对人胃癌BGC～823细胞增殖及凋亡的作用及对COX-2、NF-κB、VEGF蛋白表达的影响。方法:bFGF和celecoxib作用于BGC-823人胃癌细胞后,MTT比色法测定细胞的增殖,使用流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞凋亡形态,应用Western印迹分析法检测COX-2、NF-κB和VEGF蛋白的表达。结果:25ng/ml bFGF对BGC-823细胞有促增殖作用,能增强COX-2、NF-κB、VEGF蛋白表达,呈时间依赖性(P<0.01)。不同浓度的celecoxib对BGC-823人胃癌细胞均有增殖抑制作用,并能促进细胞凋亡,使COX-2、NF-κB、VEGF蛋白表达明显减弱,呈浓度依赖性(P<0.01)。结论:bFGF对BGC-823细胞具有促进增殖和COX-2、NF-κB、VEGF蛋白表达的作用。celecoxib对BGC-823细胞具有促进凋亡和抑制COX-2、NF-κB、VEGF蛋白表达的作用。COX-2、NF-κB、VEGF之间具有相关性(r分别为0.852、0.908、0.930,P<0.01)。
- 聂海祺孙黎光叶丽平
- 关键词：CELECOXIBBFGFNF-ΚBCOX-2VEGF
- bFGF经Akt信号转导通路诱导胃癌BGC-823中COX-2和NF-κB表达研究被引量：4
- 2007年
- 目的:在胃癌BGC-823细胞中,经bFGF诱导后观察COX-2和NF-κB蛋白表达,探讨bFGF通过Akt途径抑制凋亡促进细胞增殖的信号转导机制。方法:胃癌BGC-823细胞传代培养。MTT方法检测bFGF对胃癌BGC-823细胞的促增殖的作用。Western blotting检测Akt酶的活性和不同处理BGC-823中COX-2和NF-κB的表达。结果:25ng/mlbFGF能够激活BGC-823细胞中Akt磷酸化,p-Akt在10min表达最多,进而促进COX-2和NF-κB蛋白的表达,这种表达具有时间依赖性,能够促进BGC-823细胞的增殖。Akt抑制剂wortmannin可抑制bFGF的这些作用。结论:bFGF经Akt细胞信号转导通路能够诱导BGC-823细胞中COX-2和NF-κB的表达。Akt信号转导通路、COX-2和NF-κB与BGC-823细胞的增殖密切相关。
- 聂海祺孙黎光叶丽平
- 关键词：胃癌BGC-823细胞环氧合酶2核转录因子ΚB
- 碱性成纤维细胞生长因子对卵巢癌的影响被引量：2
- 2006年
- 目的观察Ras-Raf-ERK 1/2途径介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对卵巢癌细胞系CAOV3细胞增殖和凋亡影响,探讨bFGF及其信号转导途径与卵巢癌发生发展关系。方法以bFGF和促细胞分裂剂激活性蛋白激酶1(MEK1)抑制剂PD98059处理CAOV3细胞,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白印迹(Western blot)检测细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的活性。结果bFGF处理后细胞增殖比明显增加,且与bFGF水平呈剂量依赖关系,bFGF浓度为75 ng/ml时细胞增殖比最高为140%;bFGF使无血清诱导的凋亡细胞比例下降[(33.20±5.32)%^(2.38±3.36)%];bFGF诱导ERK1/2活性增高。PD98059可抑制bFGF的这些作用。结论bFGF通过Ras-Raf-ERK 1/2途径介导,促进卵巢癌CAOV3细胞增殖,抵抗无血清诱导凋亡。在卵巢癌发生发展过程中,bFGF信号传递发挥了重要作用。
- 刘萍李新鸣孙黎光文涛侯伟健于卉影赵晓光
- 关键词：卵巢癌凋亡
