国家自然科学基金(30100033)
- 作品数：15 被引量：53H指数：5
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- X射线全身照射对小鼠胸腺重量 细胞数及细胞凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨X射线躯体辐射对小鼠胸腺重量、细胞计数及细胞凋亡的影响。方法2．0Gy与．075GyX射线照射后0、2、4、8、16、247及48h，采用直接称重、显微镜下计数、流式细胞术分别检测小鼠胸腺的重量、细胞数及细胞凋亡情况。结果2.0GyX射线照射后小鼠胸腺重量先升高后下降，而胸腺细胞数显著下降，到48h两者均降至最低水平；而胸腺细胞凋亡显著增加，48h达到最高水平。0．075Gy照射后胸腺重量及胸腺细胞数显著升高而胸腺细胞凋亡没有明显变化。结论高剂量辐射（HDR）作用下胸腺的重量、细胞计数下降，而胸腺细胞凋亡增加，对免疫系统有明显的抑制作用。低剂量辐射（LDR）可以在一定程度上促进胸腺的重量增加、细胞数目增多，细胞凋亡减少，有免疫兴奋作用。
- 徐瑞明张占春金顺子
- 关键词：电离辐射胸腺细胞凋亡
- 低剂量电离辐射在C57BL/6J小鼠肿瘤基因-放疗方案中的作用被引量：1
- 2008年
- 为探讨低剂量电离辐射在C57BL/6J小鼠肿瘤基因-放疗方案中的作用,对荷瘤小鼠采用不同的治疗方案(单纯多次大剂量局部照射、单次大剂量局部照射加多次低剂量全身照射、pEgr-IL18-B7.1基因联合放疗),观察其对肿瘤重量、全肺表面转移结节数以及肿瘤间质微血管密度的影响。结果显示,采用单纯放疗和基因-放疗与对照组相比均能显著降低肿瘤重量、全肺表面转移结节数和肿瘤间质微血管密度;单纯放疗方案中应用单次大剂量局部照射加多次低剂量全身照射与单纯多次大剂量局部照射相比,在降低治疗剂量的同时,能达到相近似的抑瘤效果。在基因-放疗方案中,基因导入联合单次大剂量局部照射后加多次低剂量全身照射的治疗效果明显优于联合应用常规多次大剂量局部照射。提示低剂量电离辐射可以通过减轻肿瘤负荷、减少肿瘤远处转移和抑制肿瘤间质血管形成,增强基因-放疗方案的抑瘤作用。
- 武宁张海玉金顺子刘树铮
- 关键词：低剂量电离辐射C57BL/6J小鼠
- 小鼠B7-2基因的克隆、测序及其重组质粒的构建被引量：4
- 2004年
- 目的 :克隆小鼠 B7- 2基因编码区的 c DNA序列 ,并构建其表达载体。方法 :利用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)法 ,以小鼠脾细胞 m RNA为模板 ,扩增获得 B7- 2基因 ,与 p MD- 1 8T连接做全自动测序 ,并利用基因重组技术构建包含 B7- 2基因的表达质粒 pc DNA3.1 - CMV- B7- 2及 pc DNA3.1 - Egr- B7- 2。结果 :经测序证实获得的 B7- 2基因与文献报道的基本一致 ,并成功地构建了表达质粒。结论 :成功克隆了 B7- 2的编码基因 ,并成功构建了表达载体 pc DNA3.1 - CMV- B7- 2及 pc DNA3.1 - Egr- B7-
- 杨建征金光辉田梅潘雪娜金顺子刘树铮
- 不同剂量X射线诱导小鼠腹腔巨噬细胞IL-18表达的量效关系被引量：1
- 2006年
- 目的:观察X射线照射对小鼠腹腔巨噬细胞IL-18表达的影响。方法:昆明种小白鼠80只,随机分为10组(每组8只),即假照组、4个单次低剂量X射线照射组(0·05、0·075、0·1和0·2Gy)和5个单次高剂量X射线照射组(0·5、1·0、2·0、4·0及6·0Gy),X线全身照射(WBI)后16h处死小鼠,取腹腔巨噬细胞,用RPMI1640培养基,在37℃、5%CO2培养箱中培养72h,留取上清液,采用ELISA法检测小鼠腹腔巨噬细胞IL-18的分泌量。结果:0·05GyX射线WBI后,IL-18的表达有所增高,检测值为(59·53±3·68)ng·L-1,与假照组(51·29±3·26)ng·L-1比较差异无显著性(P>0·05);0·075GyX射线WBI后,IL-18的表达量增高至(122·78±8·07)ng·L-1,与假照组比较差异有显著性(P<0·01);随着X射线辐射剂量增加至0·1、0·2、0·5和1·0Gy,IL-18的表达量增高至(135·32±5·27)、(149·40±16·54)、(200·42±15·42)及(347·59±17·88)ng·L-1,1·0Gy照射达到峰值,随后IL-18表达呈下降趋势;2·0、4·0及6·0GyWBI后,IL-18的表达量分别为(229·49±14·68)、(253·79±6·69)及(223·32±20·85)ng·L-1,均高于假照组(P<0·01)。结论:高、低剂量X射线照射均能诱导小鼠腹腔巨噬细胞IL-18的表达。
- 崔阳单玉兴金顺子刘一
- 关键词：X线巨噬细胞白细胞介素18
- pEgr-IL18-B7.1质粒辐射诱导表达特性及其联合辐射抗肿瘤作用被引量：6
- 2005年
- 目的:构建pEgr-IL18*B7．1双基因表达质粒,探讨不同剂量电离辐射诱导下的表达特性,研究基 因放射治疗对恶性黑色素瘤的抑瘤作用。方法:利用基因重组技术构建包含小鼠IL-18和B7．1的双基因表达质粒 pEgr-IL18-B7．1,分别利用ELISA和流式细胞仪检测不同剂量电离辐射诱导下IL-18和B7-1在体外的表达特性, 以移植肿瘤的生长为判断指标,探讨基因放射治疗对恶性黑色素瘤的抑瘤作用。结果:体外实验证实,双基因表达 质粒pEgr-IL18-B7．1在不同剂量X射线诱导下可有效表达IL-18和B7-1,与放疗联合应用可有效抑制肿瘤生 长。结论:说明多基因联合辐射治疗是有效的抗肿瘤措施之一。
- 金光辉田梅刘树铮杨建征杨英
- 关键词：白细胞介素18黑色素瘤基因疗法
- IL-24基因联合电离辐射对前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨人白细胞介素24(IL-24)基因联合X射线对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响,为IL-24基因联合电离辐射治疗肿瘤奠定实验基础。方法:检测电离辐射对PC-3细胞凋亡的影响分为假照射组及2、4、6、8、12和18GyX射线照射组;检测IL-24目的基因的表达分为对照组(0.01mol.L-1PBS)、空载体组[pcDNA3.1(+)载体]和IL-24基因组;检测IL-24基因联合电离辐射对PC-3细胞凋亡的影响分为对照组、空载体组、IL-24基因组、单纯照射组(6Gy)、空载体联合照射组以及IL-24基因联合照射组。碱裂解法提取纯化质粒DNA,用PEI转染质粒DNA至PC-3细胞中,目的基因表达的检测采用RT-PCR法。AnnexinV-FITC和PI双染后,采用流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡的变化。结果:与假照组比较,2和4GyX射线照射48h后PC-3细胞凋亡百分率无明显变化,6GyX射线照射后细胞凋亡百分率开始明显升高(P<0.01),且细胞凋亡百分率随剂量增大而增加,约是假照组的1.6～3.0倍。PC-3细胞中对照组和空载体组均未观察到IL-24基因的表达,而IL-24基因组则可见IL-24基因的表达;以上3组均有GAPDH基因的表达。IL-24基因联合照射组与对照组、空载体组、IL-24基因组、单纯照射组和空载体联合照射组比较,早期凋亡细胞数均有上升趋势,除单纯照射组外,与其他组比较差异均有显著性(P<0.05);晚期凋亡和坏死细胞数也均有上升趋势,其中与对照组、单纯照射组和空载体联合照射组比较显著升高(P<0.05或P<0.001);凋亡和坏死的总细胞数均有上升趋势,除IL-24基因组外,与其他组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:IL-24基因联合电离辐射能够有效诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡。
- 刘永哲吴丛梅倪冠英金顺子
- 关键词：白细胞介素24前列腺肿瘤PC-3细胞
- 流式细胞术在紫外线照射后细胞内活性氧检测中的应用被引量：11
- 2004年
- 目的 :探讨流式细胞术在细胞内活性氧检测中的应用。方法 :以 2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠 (DCFH-DA )为标记探针 ,通过流式细胞术检测细胞内 2′,7′-二氢二氯荧光黄 (DCF)的荧光强度 ,间接检测细胞内活性氧的水平。结果 :不同剂量 (0 .30、 0 .4 5和 0 .6 0 k J· m- 2 )中波紫外线 (UVB)照射后 ,1h小鼠成纤维细胞内活性氧表达量明显增高 ,达峰值 ,分别为对照组的 14 6 %、 14 5 %和 14 5 % ,6 h后恢复正常水平。结论 :利用流式细胞术检测 UVB照射后细胞内产生的活性氧是一种可靠、稳定的方法。
- 刘扬金光辉刘树铮
- 关键词：流式细胞术自由基紫外线
- IL-12联合B7-1基因放射治疗对小鼠B16移植肿瘤生长的影响被引量：4
- 2006年
- 目的：探讨基因联合放疗对小鼠B16移植肿瘤的抑制作用。方法：碱裂解法提取纯化质粒DNA，微量注射法直接将质粒DNA导入体内肿瘤；建立荷瘤小鼠模型，于小鼠右后肢皮下接种5×10^5个B16黑色素瘤细胞，待肿瘤直径达0．3～0．5cm时开始治疗；肿瘤局部注射pNE-mIL-12和pcDNA—B7—1质粒3次，并给予3次X线照射，观察小鼠移植肿瘤的生长情况。结果：pNE-mIL-12重组质粒与pcDNA—B7—1质粒联合2Gy放射治疗组肿瘤生长速率最低，小鼠生存时间明显延长（P〈0．01～P〈0．001），末次照射后31d小鼠死亡率仅为22．2％，而且其中有1只小鼠肿瘤消退。结论：多基因联合放疗可有效抑制小鼠B16移植肿瘤的生长，其效果好于单基因治疗和单纯放疗。
- 杨英付士波刘树铮
- 关键词：白细胞介素12CD80肿瘤
- X射线全身照射对小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞凋亡的影响被引量：5
- 2006年
- 目的:观察不同剂量X射线全身照射对小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞凋亡的影响。方法:Annexin-V和PI双染后,采用流式细胞术检测小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞在照射后不同时间的细胞凋亡变化。结果:2 GyX射线全身照射与假照射组比较,小鼠脾细胞凋亡百分率在照射后24 h明显升高(P<0.05),腹腔巨噬细胞凋亡百分率从照射后4 h开始明显升高(P<0.05,P<0.01),持续到48 h(P<0.001);0.075 Gy X射线全身照射与假照射组比较,小鼠脾细胞凋亡百分率在照射后24 h明显降低(P<0.05),腹腔巨噬细胞凋亡百分率从照射后2 h开始至照射后16 h均有显著降低(P<0.05)。结论:较高剂量辐射促进小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞凋亡,而低剂量辐射对小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞凋亡没有促进作用,并且能降低免疫细胞凋亡。
- 武宁刘永哲徐瑞明刘扬金顺子
- 关键词：电离脾细胞
- X射线全身照射诱导小鼠脾细胞LAMP-1表达的时程变化被引量：1
- 2007年
- 目的观察X射线全身照射对小鼠脾细胞LAMP-1表达的影响。方法采用流式细胞术检测0．075和2Gy X照射后不同时间（0、2、4、8、16、24和48h）以及用Con A刺激4h后，脾细胞表面表达LAMP-1的阳性细胞数。结果脾细胞表面的LAMP-1在2Gy X射线全身照射后8、16和24h表达明显下降；0．075Gy X射线全身照射后2h显著升高，而48h又下降到低于对照的水平。0．075和2Gy X射线全身照射后再加用Con A（10μg／μl）刺激4h，LAMP-1的表达均增强；但是此时2Gy的效应比0．075Gy更明显。结论LAMP-1参与电离辐射作用下免疫信号的传导，高剂量X射线抑制它的表达，而低剂量X射线在早期对其表达有促进作用，与体内免疫细胞的活性密切相关。Con A促进免疫细胞表面LAMP-1的表达。
- 徐瑞明陈光伟武宁刘永哲刘扬金顺子刘树铮
- 关键词：X射线T细胞NK细胞流式细胞术
