广东省科技计划工业攻关项目(2007B030501005)
- 作品数：8 被引量：87H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 磷酰胺氮芥对大鼠卵巢功能损伤的体外实验被引量：2
- 2010年
- 目的研究磷酰胺氮芥(glyciphosphoramide,PM)引起体外培养大鼠卵巢结构和内分泌功能损伤的适宜剂量。方法实验分为4组,每组12个卵巢,来源于出生8周的Wistar大鼠。实验1、2、3组培养基中加入浓度分别为10、20、50μg/mL的PM,培养48h后均隔天全量更换不含PM的培养基。正常对照组培养基中不含PM。在PM加入前及加入后2d(48h)、6d时更换的培养基中用放射免疫法测定其雌二醇(E2)浓度。在加入PM6d时取出大鼠卵巢,称湿重,HE染色,显微镜下观察各期卵泡形态并计数总卵泡数量。结果加入PM后2d及6d的3个实验组的E2浓度均低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且3个实验组间两两比较差异也均有统计学意义。加入PM6d,3个实验组分别与正常对照组比较,卵泡总数差异均有统计学意义;3个实验组间两两比较,卵泡总数差异均有统计学意义。结论PM浓度为10μg/mL时已能引起体外培养大鼠卵巢结构及功能的损伤。
- 肖苑玲何援利王雪峰马颖付霞霏
- 关键词：体外培养卵巢损伤雌二醇
- 化疗同步应用丙氨瑞林对化疗所致卵巢功能损伤的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究注射环磷酰胺(CTX)大鼠同时应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对注射CTX大鼠的卵巢功能的影响。方法40只大鼠分为4组:正常对照组(10只),GnRHa组(10只),CTX组(10只),CTX+GnRHa组(10只)分别接受生理盐水、CTX、GnRHa和CTX+GnRHa注射。采用放射免疫分析法测定各组大鼠血清卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)浓度的变化。在停药时及停药后两周,每组各处死5只大鼠。观察卵巢重量、卵泡数量及卵泡直径的变化。结果停药后两周,联合治疗组大鼠的血清雌二醇和FSH浓度分别为(43.39±4.40)pg/ml与(3.48±0.16)mIU/ml;与正常对照组比较,差异无显著性(P>0.05);而CTX组大鼠血清雌二醇和FSH浓度分别为(26.97±5.58)pg/ml与(3.92±0.35)mIU/ml,与其余3组分别比较,差异均有显著性(P<0.05)。在停药时和停药后两周处死大鼠的卵巢中,CTX组卵泡总数最少,各组间比较,差异均有显著性(P<0.05)。结论注射CTX同时应用GnRHa能够减少CTX对大鼠的卵巢功能的损伤。
- 井甜甜何援利
- 关键词：促性腺激素释放激素激动剂环磷酰胺卵巢
- 雌激素对化疗损伤性卵巢早衰保护作用的实验研究被引量：18
- 2009年
- 目的观察雌激素对环磷酰胺(CTX)所致大鼠卵巢功能损伤的保护作用。方法选用具有正常性周期的2～3月龄雌性Wister大鼠60只,随机分成正常对照组、CTX组、E2组、CTX+E2组,分别给予生理盐水、CTX腹腔注射、戊酸雌二醇灌胃和CTX与戊酸雌二醇联合给药。用药后观察并比较各组大鼠一般状态、体质量、卵巢和子宫湿重。采用放免法测定不同时期各组大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)水平。卵巢组织病理切片HE染色观察卵巢组织结构的变化。结果CTX组大鼠与CTX+E2组比较,血清FSH浓度明显升高,E2水平明显降低(P<0.05)。CTX组大鼠卵巢和子宫湿重明显低于CTX+E2组(P<0.05)。光镜下CTX组大鼠卵巢卵泡总数较CTX+E2组显著减少(P<0.05);CTX组大鼠卵巢组织纤维化、坏死程度也较CTX+E2组明显。结论雌激素能改善CTX对卵巢功能的损伤,对CTX所致卵巢功能损伤有一定的保护作用。
- 韩丽萍何援利
- 关键词：雌激素卵巢早衰环磷酰胺卵泡刺激素雌二醇
- 抗生长分化因子-9抗体对化疗所致大鼠卵巢损伤的保护作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨抗生长分化因子-9抗体(Anti-GDF-9)对化疗所致体外培养大鼠卵巢损伤的保护作用。方法实验分3组,每组32个卵巢:(1)正常对照组不加磷酰胺氮芥(PM);(2)PM组加入10μg/mL的PM;(3)抗体组在加入PM前24 h加入Anti-GDF-9(5μg/mL)。加入PM前,加入后2、4、6 d每组分别取出8个卵巢,测雌二醇(E2)浓度,计数卵泡总数。结果加入PM2、4、6 d抗体组E2浓度、卵泡总数均高(多)于PM组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Anti-GDF-9能减轻PM所致大鼠卵巢的损伤,有保护作用。
- 肖苑玲何援利邓历萍付霞霏
- 关键词：化疗卵巢损伤
- 骨髓间充质干细胞抑制磷酰胺氮芥诱导的卵巢颗粒细胞凋亡被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对磷酰胺氮芥(Phosphoramide Mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞凋亡的影响及可能机制。方法:培养雌性Wistar大鼠卵巢颗粒细胞,加入PM诱导凋亡后,与MSCs共培养(MSCs:颗粒细胞分别为1:1,1:5和1:10),Hochest33342、PI双染和DNA-ladder检测凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果:PM可引起颗粒细胞凋亡。与MSCs共培养后,电泳图无明显的梯状带形,凋亡细胞比例下降,细胞存活率上升,差异有统计学意义。Western blot显示,与MSCs共培养后,颗粒细胞Bcl-2表达水平增高,Bax表达水平无变化。结论:MSCs对PM诱导的卵巢颗粒细胞凋亡有抑制作用,其作用机制可能与上调Bcl-2在颗粒细胞中的表达密切相关,为进一步的体内实验及临床应用提供了实验依据。
- 付霞霏何援利
- 关键词：间充质干细胞卵巢颗粒细胞细胞凋亡
- 骨髓间充质干细胞移植修复化疗所致卵巢损伤的实验研究被引量：14
- 2010年
- 目的：探讨大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对化疗所致卵巢损伤的影响。方法：采用腹腔注射环磷酰胺（CTX）建立化疗所致大鼠卵巢损伤模型，并随机分为模型组、实验对照组及移植组。同龄正常大鼠作为空白对照组。移植组在建模结束后每侧卵巢注射绿色荧光标记约1×10^6个MSCs。于移植后1、15、30、45天及60天，留取各组血标本，并于后4个时间点分批处死大鼠，留取卵巢标本。荧光显微镜下观察绿色荧光及其分布情况。阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期的变化；以化学发光法检测雌二醇（E2）浓度，放射免疫法检测卵泡刺激素（FSH）浓度；计数各级卵泡数。结果：移植MSCs后15天，移植组卵巢组织内可见到明亮的绿色荧光，持续至移植后2月。绿色荧光分布在卵巢间质组织。移植组30％（6／20）的大鼠在移植后15～30天内恢复正常的动情周期，在移植后30～60天内又有4只大鼠恢复正常的动情周期。移植后15、30、45天和60天时，移植组E2浓度高于实验对照组相应时间点E2浓度，而FSH浓度则低于实验对照组相应时间点FSH浓度，差异有显著性。移植45、60天时，移植组各级卵泡数目均高于模型组和实验对照组，低于空白对照组。结论：骨髓间充质干细胞可以在环磷酰胺损伤的大鼠卵巢组织中存活、迁移，但其分化为卵泡组分的可能性小。骨髓间充质干细胞移植可修复环磷酰胺损伤的卵巢组织，部分改善卵巢内分泌功能。
- 付霞霏何援利王雪峰刘木彪彭冬先
- 关键词：卵巢损伤环磷酰胺疾病模型WISTAR
- 化疗所致卵巢早衰动物模型的建立被引量：46
- 2008年
- 目的探索建立化疗所致卵巢早衰动物模型的方法。方法以Wistar雌性大鼠为研究对象,以5种不同剂量和方案腹腔注射环磷酰胺,观察大鼠一般情况、动情周期、性激素(雌二醇和卵泡刺激素)水平、卵巢重量及形态学、各级卵泡数的变化。结果环磷酰胺可引起大鼠体重明显下降,动情周期紊乱,低雌激素血症,高促性腺激素血症,卵巢重量明显减轻,卵巢间质增生明显,窦前及窦状卵泡数减少,与对照组相比均有明显差异。结论采用腹腔注射环磷酰胺负荷剂量50mg/kg后以8mg/(kg.d)的维持剂量连续注射14d的方案建模,大鼠卵巢功能明显衰退,卵巢组织学及内分泌改变与临床卵巢早衰患者相似。该方法简便易行、成模时间短、成功率高、死亡率低,是建立化疗所致卵巢早衰动物模型的一种较好的方法。
- 付霞霏何援利
- 关键词：卵巢早衰化学治疗动物模型
- 骨髓间充质干细胞对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用被引量：2
- 2009年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法分离培养雌性Wistar大鼠卵巢颗粒细胞,加入磷酰胺氮芥(30μmol/L)至培养的颗粒细胞中,再与MSCs以不同比例共培养72h。实验分为4组:①颗粒细胞单独培养组(对照组);②共培养组1,MSCs∶颗粒细胞=1∶1;③共培养组2,MSCs∶颗粒细胞=1∶5;④共培养组3,MSCs∶颗粒细胞=1∶10。采用AnnexinⅤ检测凋亡率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化,ELISA法检测MSCs培养基中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的浓度。结果对照组化疗药物引起的卵巢颗粒细胞凋亡率为35.04%±5.75%,而共培养组1、2、3的凋亡率分别为12.80%±2.42%,13.94%±3.86%,22.31%±5.67%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。蛋白质免疫印迹显示与MSCs共培养后,颗粒细胞Bcl-2表达水平明显增高(P<0.05),Bax表达水平无明显变化(P>0.05)。MSCs能分泌VEGF、HGF和IGF-1。结论MSCs对体外化疗药物诱导的卵巢颗粒细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是其分泌的细胞因子通过旁分泌途径发挥作用,以及Bcl-2在颗粒细胞中表达上调有关。
- 付霞霏何援利
- 关键词：间质干细胞粒层细胞药物疗法细胞凋亡
