辽宁省自然科学基金(002039)
- 作品数：5 被引量：22H指数：2
- 相关作者：郭政东王海波张海鹏王昊李智更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院沈阳医学院附属中心医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 毒蕈碱样乙酰胆碱受体及其信号转导被引量：16
- 2002年
- 毒蕈碱样乙酰胆碱受体 (MAChRs)是G蛋白偶联受体 (GPCRs)超家族中的一员 ,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白 (G proteins)是一类具有GTP酶活性的蛋白质 ,由α、β、γ三个亚基构成。其中α亚基结合GDP或GTP ,分别代表G蛋白的非活化和活化状态。M受体与Gi/Go或Gq/ 11间的作用机制仍在探讨中 ,但基本过程与Gs介导的信号转导模式相似。激动剂持续作用后 。
- 王昊郭政东李智
- 关键词：M受体GTP结合蛋白信号转导
- M受体-G蛋白信号转导途径研究进展被引量：7
- 2008年
- 毒蕈碱乙酰胆碱受体(mAChR)是G蛋白偶联受体超家族中的一员,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白(G protein)是一类具有GTP酶活性的蛋白质,由α、β和γ三个亚基构成。mAChR可以与G蛋白偶联,引起GTP与α亚基结合,导致Gα与Gβγ分离。近年来发现,不但Gα-GTP可以调节效应分子,Gβγ也可以调节许多效应分子如腺苷酸环化酶、磷脂酶C、K+通道、Ca2+通道、MAPK和受体激酶等,介导一系列的生物学效应,在信号转导过程中发挥重要的作用。
- 孙科郭政东
- 关键词：毒蕈碱GTP结合蛋白信号转导效应分子
- m_5 AChR-G_(11)融合蛋白筛选m_5受体配体的研究
- 2005年
- 目的:以m5AChR-G11融合蛋白为工具,筛选m5受体亚型特异性配体,并且探讨m5AChR-G11融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法:采用杆状病毒Sf 9细胞表达系统,制备m5AChR-G11融合蛋白;通过[3H]QNB放射配体结合实验和[35S]GTPγS替代结合实验,检测m5AChR-G11融合蛋白的功能。结果:m5AChR-G11融合蛋白的表达水平为(60.39±1.95)pmol.mg-1蛋白。不同配体存在时使融合蛋白中G11与GDP的亲和力发生变化,ace-tylcholine,M cN-A-343,AF-102B,R-(+)-hyoscyam ine,trop icam ide,alcuron ium和atrop ine存在时以及无配体时,GDP的IC50值分别是134.90,46.77,38.02,10.00,13.80,18.62,5.89,23.40μmol/L。结论:杆状病毒Sf 9细胞表达系统表达的m5AChR-G11融合蛋白具备m受体配体结合特性和两组分间的偶联功能。乙酰胆碱是m5受体的完全激动剂,M cN-A-343和AF-102B是部分激动剂,R-(+)-hyoscyam ine,trop icam ide,alcuron ium和阿托品是拮抗剂。
- 王海波秦兴军郭政东杨君兰
- 关键词：G蛋白偶联受体拮抗剂
- m_4AChR-Gilα融合蛋白的建立、表达及几种配体对其机能的影响
- 2004年
- 目的通过Baculovirus Sf9细胞系统制备并表达m4AChR Gilα融合蛋白 ,检测几种配体对融合蛋白质中m4AChR与Gilα间相互作用 ,并以该融合蛋白质为工具 ,筛选m4AChR的特异性配体。方法两步聚合酶链反应建立m4AChR Gilα融合cDNAs,并在Sf9细胞内表达。通过 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS替代结合实验研究几种配体乙酰胆碱、卡巴胆碱、AF 10 2B、prifinium、AF DX116和阿托品对m4AChR Gilα融合蛋白的作用。结果m4AChR Gilα融合蛋白表达水平为 (4 7.0 4± 1.5 8)pmol/g蛋白 ,不同配体使融合蛋白质中Gilα与二磷酸鸟苷的亲和力发生变化。结论杆状病毒表达的m4AChR Gilα融合蛋白具备m受体配体结合特性和组分间的偶联功能。配体通过改变融合蛋白质中Gilα与二磷酸鸟苷的亲和力 ,活化该融合蛋白质。
- 王海波郭政东张海鹏赵立斌郭政礼
- 关键词：G-蛋白配体
- m_1AChR-G_(11)和m_4AChR-G_(16)融合蛋白的建立、表达及几种配体的作用
- 2003年
- 目的 :通过Baculovirus-Sf9cells系统制备m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白 ,检测几种配体对m1AChR与G11及m4AChR与G16间相互作用的影响 ,并以m1AChR -G11和m4AChR -G16融合蛋白为工具 ,筛选m1和m4受体的特异性配体。方法 :两步PCR建立m1AChR -G11和m4AChR -G16融合DNA ,并在Sf9细胞内表达。通过 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS结合实验检测m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白的药理学特性 ;通过 [3 5S]GTPγS替代结合实验研究几种配体包括acetylcholine(ACh) ,pilocarpine(Pilo)。 4 -hydroxy - 2 -butynyl- 1-trimethylam monium -m -chloro -carbanilatechloride (McN -A - 343) ,tetrandrine ,pirenzepine (PZ) ,alcuronium ,atropine ,R - (+) -hyoscyamine和gallamine对m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白作用的方式 ,并以这两种融合蛋白为模型筛选m1和m4受体的特异性配体。结果 :m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白表达水平分别为 (45 4±2 6 )nmol/gprotein和 (47 0± 1 6 )nmol/gprotein。不同配体使融合蛋白m1AChR -G11和m4AChR -G16中G11和G16与GDP的亲和力发生变化。结论 :杆状病毒 -Sf9细胞系统表达的m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白具备m受体配体结?
- 王海波郭政东张海鹏王娟温华李新鸣
- 关键词：毒蕈碱信号转导配体G蛋白
