国家自然科学基金(30470479)
- 作品数：5 被引量：56H指数：2
- 相关作者：孙皎丁婷婷张媛媛徐东菁更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海生物材料研究测试中心更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
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- 纳米羟基磷灰石颗粒能够影响大鼠腹腔单核巨噬细胞的凋亡吗？
- 2009年
- 背景:由于尺寸效应,纳米颗粒可以结合细胞内大分子从而引起细胞坏死或凋亡。针对纳米颗粒的生物安全性,目前缺乏对颗粒致细胞凋亡的机制分析。目的:从细胞及分子水平,探讨纳米羟基磷灰石颗粒对大鼠腹腔单核巨噬细胞凋亡的影响。设计、时间及地点:材料-细胞学体外观察,于2007-01/2008-12在上海生物材料研究测试中心完成。材料:2级SD雄性大鼠购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,纳米颗粒由中科院硅酸盐所提供。方法:无菌条件下吸取大鼠腹腔液,贴壁法体外分离培养单核巨噬细胞,调整细胞浓度为2×109L-1。在300W/40kHz超声条件下制备含20,100,200mg/L纳米羟基磷灰石颗粒的悬浮液,分别诱导单核巨噬细胞24h,并设立正常对照组。主要观察指标:应用透射电镜观察细胞超微结构表征;AnnexinV-EGFP/PI双染检测细胞凋亡率;WesternBlot法检测凋亡调控相关基因P53的表达变化。结果:正常对照组单核巨噬细胞伪足完整、核膜正常、核质均匀;20,100,200mg/L纳米羟基磷灰石诱导24h后,单核巨噬细胞具有典型的凋亡形态学特征。与正常对照组比较,20,100mg/L纳米羟基磷灰石诱导后细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),且100mg/L诱导组升高幅度明显大于20mg/L组(P<0.05)。正常对照组单核巨噬细胞中几乎不表达P53蛋白;经不同质量浓度的纳米羟基磷灰石诱导后,单核巨噬细胞P53蛋白的表达均明显增高,且蛋白的表达与纳米颗粒的质量浓度呈正相关。结论:纳米羟基磷灰石颗粒能够通过蛋白磷酸化上调P53蛋白的表达,从而启动下游相关基因,最终导致细胞凋亡。
- 丁婷婷孙皎
- 关键词：纳米羟基磷灰石凋亡P53
- 纳米羟基磷灰石颗粒对巨噬细胞DNA的损伤被引量：2
- 2008年
- 目的:纳米颗粒由于其特殊的尺寸效应,会对细胞内处于纳米尺寸级的RNA、DNA和蛋白质等生物大分子直接产生不良影响,使生物体受到损害。因此,从分子水平上探讨纳米羟基磷灰石颗粒对细胞DNA损伤的相关基因或蛋白的影响具有重要的科学意义。方法:实验于2005-12/2006-12在上海生物材料研究测试中心完成。①实验材料:纳米羟基磷灰石颗粒由中科院上海硅酸盐所提供,粒径大小为30～80nm。300W/40kHz的超声条件下,用含体积分数为0.1小牛血清的RPMI-1640振荡纳米颗粒,制备成终浓度为1g/L的悬浮液,4℃保存1周。②实验方法:选用RT-PCR的技术,通过原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,在分子水平上检测纳米羟基磷灰石颗粒对DNA损伤通路中P53、P21、gadd45以及HSP70这些关键蛋白转录水平的影响。结果:通过mRNA水平的检测,发现P53、P21及HSP70的表达均随着纳米羟基磷灰石颗粒浓度的增加而升高,并在100mg/L条件下P53、P21及HSP70有显著性表达(P<0.05),而当纳米羟基磷灰石颗粒达到200mg/L,只有P21的表达反而有所降低,同时各浓度的纳米羟基磷灰石颗粒对gadd45表达无明显影响(P>0.05)。结论:实验证实了100mg/L纳米羟基磷灰石颗粒可以引起DNA的明显损伤。并且当纳米羟基磷灰石颗粒浓度达到200mg/L时,受损的DNA已不易被修复。同时,P53和HSP70可成为评价纳米羟基磷灰石颗粒安全性较为灵敏的指标。
- 孙皎丁婷婷
- 关键词：羟基磷灰石DNA损伤反转录-聚合酶链反应
- 纳米银作为抗菌材料的生物安全性研究进展被引量：49
- 2007年
- 简要介绍纳米银的抗菌原理和抗菌特性,对纳米银敷料、纳米银妇用抗菌剂、纳米银消毒凝胶、银系纳米材料、纳米载银抗菌粉以及粒子等含纳米银的产品的生物安全性研究进展作一综述。
- 张媛媛孙皎
- 关键词：纳米银抗菌材料生物安全性
- 羟基磷灰石纳米颗粒诱导巨噬细胞凋亡及其与HSP70相互关系的研究被引量：2
- 2007年
- 研究羟基磷灰石纳米颗粒(HAp nanoparti-cles)引起巨噬细胞凋亡,及其与热休克蛋白Hsp70的相关性。THP-1单核细胞株经PMA诱导成为巨噬细胞,分别加入0、20、100μg/ml HAp纳米颗粒,培养24h后经PI和AnexinV染色,在荧光显微镜下观察,用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,应用western blot方法检测Hsp70蛋白分子表达的改变。显微镜观察显示THP-1单核细胞株能被诱导成巨噬细胞。荧光显微镜显示20、100μg/ml HAp纳米颗粒组凋亡的阳性信号明显强于0μg/ml对照组;流式细胞仪检测结果也证实HAp纳米颗粒组比对照组凋亡率明显增高(P1<0.0001,P2<0.0001),且凋亡的程度呈浓度依赖性(P3=0.025)。Western Blot检测显示20、100μg/ml HAp纳米颗粒组较对照组Hsp70蛋白表达增加,并且随颗粒浓度增高而表达增加。
- 徐东菁张稷丁婷婷孙皎
- 关键词：羟基磷灰石凋亡
- 两种纳米陶瓷颗粒对细胞DNA损伤反应的研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨羟基磷灰石(HAP)和β-磷酸三钙(β-TCP)两种纳米陶瓷颗粒(NPs)对细胞DNA损伤应答的机制。方法选用原代大鼠腹腔巨噬细胞,运用RT-PCR的方法,在分子水平上检测HAP和β-TCP两种纳米颗粒对DNA损伤通路中P53、P21、gadd45以及HSP70这些关键蛋白转录水平的影响。结果 P53、P21及HSP70的表达均随着HAP NPs浓度的增加而升高,并在100μg/ml条件下P53、P21及HSP70有显著性表达(P<0.05),而当HAP NPs达到200μg/ml,只有P21的表达反而有所降低,同时各浓度的HAP NPs对gadd45表达无明显影响(P>0.05)。而β-TCP NPs在20μg/ml的浓度条件下能引起以上四种基因的明显表达(P<0.05),并随着浓度的升高基因表达有所下降。结论本研究发现100μg/ml HAPNPs能引起DNA的明显损伤,而β-TCP NPs在更低浓度的条件下(20μg/ml)就能引起DNA的损伤;同时HAP NPs倾向于通过阻止细胞分裂、给细胞提供足够时间的方式来修复损伤,而β-TCP NPs则是同时启用诱导核苷酸切除和阻滞细胞周期的这两种方式全面修复受损的DNA。并且当这两种纳米颗粒浓度达到200μg/ml时,受损的DNA均已不易被修复。由此说明,分子水平上通过对纳米颗粒致细胞损伤机理的探讨,能解释不同生物陶瓷材料的纳米级颗粒对DNA的损伤应答存在不同的途径。
- 孙皎丁婷婷
- 关键词：生物陶瓷MRNA
- 羟基磷灰石纳米颗粒诱导巨噬细胞凋亡及其与 HSP70相互关系的研究
- 目的研究羟基磷灰石纳米颗粒(HAp nanoparticles)引起巨噬细胞凋亡,及其与热休克蛋白(Hsp70) 的相关性。方法 THP-1单核细胞株经 PMA 诱导成为巨噬细胞,分别加入0ug/mL、20ug/mL、1...
- 徐东菁丁婷婷孙皎
- 关键词：羟基磷灰石凋亡
- 文献传递
