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实时荧光定量PCR分析脐血T细胞亚群中TRECs水平被引量：5: 2004年; 李扬秋杨力建陈少华韩素芳周羽竝陈青山; 关键词：脐血 T细胞亚群 TRECS 胸腺细胞

T细胞受体删除环定量检测的意义及应用现状被引量：2: 2004年; T细胞受体重排删除环 (TRECs)是T细胞受体基因重排过程中删除的DNA环 ,可作为最近从胸腺输出初始细胞的标记 ,其定量检测应用于胸腺近期输出功能的评价。近年来由于免疫重建研究的广泛开展 ,定量检测TRECs得到重视。本文拟从TRECs的产生以及定量检测在正常人和各类免疫缺陷性疾病中的应用及其意义给予综述。; 韩素芳李扬秋; 关键词：T细胞受体基因重排 TRECS 胸腺定量PCR

正常人外周血和脐血中TCRVβ亚家族sjTRECs的检测情况被引量：5: 2006年; 目的:检测TCR23个Vβ亚家族sjTRECs在正常人外周血中的存在特点,从而进一步了解正常人胸腺近期各Vβ亚家族初始T细胞的输出情况。方法:采用半巢式PCR对4例胸腺、10例脐血和10例正常人外周血分别在2×105、5×104、1×104和1×103个单个核细胞中的23个Vβ亚家族sjTRECs进行扩增。结果:在细胞数相同的情况下,各Vβ-Dβ1sjTRECs的检出率胸腺细胞最高,其次是脐血,正常人最低。当细胞数为2×105、5×104和1×104时,正常人Vβ2、Vβ4、Vβ7、Vβ11和Vβ19亚家族sjTRECs的检出率以及检出sjTRECs的亚家族数量均显著低于脐血。当细胞数为2×105和5×104时,正常人可检测到绝大多数Vβ亚家族的sjTRECs,随着细胞数的降低,部分Vβ亚家族的sjTRECs则检测不到,而少部分Vβ亚家族的sjTRECs则在1000个细胞时仍能检测到。结论:成功建立了半定量检测23个Vβ亚家族sjTRECs的检测方法;在2×105细胞中约可以检测到80%左右的Vβ亚家族初始T细胞,而在5×104细胞中约有半数的Vβ亚家族初始T细胞可检测到,提示不同Vβ亚家族初始T细胞的出现频率有所差异。; 尹青松李扬秋陈少华杨力建卢育洪张学利; 关键词：T细胞受体 T细胞受体重排删除环 VΒ亚家族

实时定量PCR分析CML患者胸腺近期输出功能被引量：11: 2004年; 目的　了解慢性粒细胞白血病 (CML)患者CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞中T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量 ,从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法　利用实时定量PCR(Taq Man)方法检测 8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 + 和CD8+ 细胞中TRECs的水平。并根据外周血中CD3阳性率计算CD3+ 细胞中TRECs水平。 9例正常人外周血作为对照。结果　CML患者中TRECs含量为 0 .1± 0 .2 2 / 10 0 0T细胞 ,明显低于正常人TRECs水平 (6 .84± 4 .71/ 10 0 0T细胞 ,P <0 .0 1)。其中 5例患者外周血单个核细胞中未能检测到TRECs ,经分选CD4 + 和CD8+ 细胞后 ,2例可以检测到低水平的TRECs。结论　本研究首先报道了CML患者TRECs水平情况。; 耿素霞李扬秋杨力建陈少华韩素芳周羽竝陈青山; 关键词：TRECS 胸腺近期输出功能慢性粒细胞白血病实时定量PCR

血液肿瘤患者细胞免疫功能状态的研究被引量：3: 2005年; 血液肿瘤患者均存在严重的免疫功能紊乱,由此而影响机体自发抗肿瘤免疫反应和各种抗肿瘤治疗效果。本文就新近有效的免疫检测手段——T细胞受体Vβ基因谱型分析和T细胞受体删除 DNA环及其检测的意义,血液肿瘤的细胞免疫功能缺陷状况和免疫缺陷的影响因素等作一综述。; 尹青松李扬秋; 关键词：血液肿瘤细胞免疫功能状态肿瘤患者抗肿瘤免疫反应细胞免疫功能缺陷免疫功能紊乱检测手段

急性早幼粒细胞白血病患者胸腺近期输出功能情况被引量：2: 2005年; 目的了解急性早幼粒细胞白血病(APL)患者T细胞受体重排删除DNA环(TRECs)的含量,从而了解患者胸腺近期输出na觙veT细胞的水平。方法利用实时定量PCR(TaqMan)方法检测9例APL患者和14例正常人外周血单个核细胞(PBMC)TRECs的水平,并根据外周血中CD3阳性率计算CD3细胞中TRECs水平。结果正常人TRECs拷贝数为(4.10±3.65)/1000PBMC和(6.36±5.28)/1000CD+3细胞,APL患者TRECs拷贝数为(0.13±0.22)/1000PBMC和(0.77±1.60)/1000CD+3细胞,与正常人相比均有显著性差异(P=0.0004,P=0.0005)。结论率先报道了APL患者胸腺近期输出na觙veT细胞功能明显降低的情况。; 陈少华李扬秋杨力建耿素霞; 关键词：TRECS 胸腺近期输出功能白血病实时定量PCR

急性髓细胞性白血病病人TCRζ链基因表达特点被引量：8: 2007年; 目的建立实时定量PCR方法检测TCRζ链表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病病人外周血TCRζ链基因表达水平。方法采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测31例急性髓细胞性白血病患者(M1型6例,M2型15例,M3型10例)和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRζ链表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式2-△△Ct计算急性髓细胞性白血病患者与正常人TCRζ链表达差异倍数。结果与正常人相比,急性髓细胞性白血病患者TCRζ链表达特点可以分为表达缺失(16%)、表达下降(26%)和表达上升(58%)三种情况。而三种不同亚型急性髓细胞性白血病之间的TCRζ链表达模式相似。结论本研究成功建立了SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR和相关定量分析TCRζ链表达水平技术,并首先报道了急性髓细胞性白血病病人TCRζ链表达水平的变化。; 陈思李扬秋陈少华杨力建吴秀丽岑东芝; 关键词：实时定量PCR 急性髓细胞性白血病

CML患者CD4^+和CD8^+ T细胞的TCR Vβ基因谱系和克隆性分析被引量：5: 2007年; 目的:了解慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)患者外周血CD4+和CD8+T细胞中TCRVβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性。方法:利用RT-PCR分别扩增19例CML-CP患者外周血单个核细胞(PBMCs)、CD4+和CD8+细胞TCRVβ亚家族基因的CDR3,阳性产物进一步经基因扫描分析其克隆性。结果:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞分别表达部分(1～21个)Vβ亚家族,均以Vβ13的表达率最高,其次为Vβ9,多数患者的一些Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖,主要出现于CD8+细胞中,分别以Vβ21(CD4+)和Vβ11(CD8+)亚家族的克隆性增殖多见。结论:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞的TCRVβ谱系均存在限制性分布,患者存在的克隆性增殖CD4+和CD8+T细胞可能与宿主抗CML抗原反应有关,它们可能在抗CML效应中起主要作用。; 耿素霞李扬秋陈少华杨力建尹青松汤冀; 关键词：VΒ亚家族基因扫描

CML中TCR Vβ2、Vβ5和Vβ17亚家族sjTRECs的检测情况: 2005年; 目的检测慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs的存在情况,从而了解相应3种Vβ亚家族naive T细胞的近期胸腺输出情况.方法利用半巢式PCR扩增9例CML患者外周血单个核细胞(PBMC)、CD4+细胞和CD8+细胞DNA的Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1sjTRECs,13例正常人外周血作为对照.结果TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs在部分正常人和1例CML患者CD4+或CD8+细胞可以检测到,而在CML患者PBMC中则未能检测到.结论在CML患者Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs检出率低,与其胸腺输出相应的TCR Vβ亚家族naive T细胞水平低下有关.; 李扬秋陈少华杨力建耿素霞尹青松; 关键词：慢性粒细胞白血病胸腺输出功能 TCR

慢性粒细胞白血病患者细胞免疫功能研究进展被引量：1: 2005年; 细胞免疫在抗恶性肿瘤中起重要作用,白血病患者细胞免疫功能明显缺陷是影响其抵抗肿瘤的一个重要因素.慢性粒细胞白血病(CML)是白血病中较常见的类型,居第三位,其免疫功能异常主要体现在T淋巴细胞数量和质量、NK细胞、红细胞以及相关的细胞因子等方面的改变,本文就此进行综述.; 耿素霞李扬秋; 关键词：慢性粒细胞白血病 NK细胞 TCR VΒ基因白细胞介素

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