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北京市自然科学基金(7002033)

作品数:3 被引量:3H指数:1
相关作者:刘雪林宋宏彬唐晓敏李申龙胡小华更多>>
相关机构:军事医学科学院更多>>
发文基金:北京市自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇抗体
  • 2篇人源
  • 2篇噬菌体
  • 2篇噬菌体抗体
  • 2篇菌体
  • 2篇肝炎
  • 1篇人源抗HBS...
  • 1篇人源抗体
  • 1篇轻链
  • 1篇抗HBS
  • 1篇抗体亲和力
  • 1篇基因
  • 1篇基因工程抗体
  • 1篇基因序列
  • 1篇基因序列分析
  • 1篇工程抗体
  • 1篇复性
  • 1篇E.COLI
  • 1篇FAB
  • 1篇FAB段

机构

  • 3篇军事医学科学...

作者

  • 3篇宋宏彬
  • 3篇刘雪林
  • 2篇李申龙
  • 2篇唐晓敏
  • 1篇马巍娜
  • 1篇胡小华
  • 1篇贾雷立
  • 1篇张传福

传媒

  • 2篇解放军医学杂...
  • 1篇免疫学杂志

年份

  • 1篇2008
  • 1篇2007
  • 1篇2006
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
人源抗HBs基因工程抗体在E.coli中的高效表达与折叠研究被引量:1
2007年
目的高效表达是基因工程抗体走向临床的关键问题之一。本试验旨在研究人源抗HBs基因工程抗体在E.coli中的高效表达与折叠。方法本实验将抗HBsAg抗体的轻链(L)和重链Fd段基因,分别克隆于pET20b质粒中并分别转化到大肠肝菌BL21(DE3),IPTG诱导后,SDS-PAGE分析发现在Mr27000(L)和Mr25000(Fd)处有外源蛋白表达,表达蛋白含量分别为53%和48%。L链和Fd包涵体蛋白经盐酸胍变性后,等量混合于折叠液中。结果L和Fd可复性形成了Mr约50000的蛋白,ELISA结果表明,复性蛋白具有与HBsAg结合的能力。结论抗HBsAg抗体Fab段在大肠杆菌中的表达与复性的成功,表明包涵体表达基因工程抗体在技术是可行的。
刘雪林宋宏彬唐晓敏李申龙胡小华
关键词:FAB段复性
人源抗HBsAg噬菌体抗体的筛选、鉴定及基因序列分析
2008年
目的筛选与鉴定人源抗乙肝表面抗原(HBsAg)噬菌体抗体,并对其进行基因序列分析。方法利用噬菌体表面递呈技术,从人的外周淋巴细胞中分离和扩增抗体基因,构建抗体组合文库,经亲和淘洗从该文库中筛选人源抗HBsAg噬菌体抗体,通过ELISA及竞争抑制实验鉴定其活性和特异性,并分析获得的抗HBsAg人源抗体重链和轻链基因序列。结果从第3轮淘洗洗脱下来的噬菌体感染细菌长出的菌落中挑出30个,进行ELISA检测,取A490值最高(1.47±0.08)的一株进行竞争抑制试验,结果A490为0.35±0.10,抑制率为76%,所筛出的噬菌体抗体为HBsAg的特异性抗体,酶切分析显示其包含重链和轻链基因,序列分析表明重链可变区(VH)属人免疫球蛋白VHⅠ亚群,轻链可变区(VL)属于VκⅠ和VκⅢ亚群。结论从所构建的抗体库中,筛选出能特异结合HBsAg的抗HBsAg噬菌体抗体,说明通过噬菌体抗体库筛选人源抗HBsAg噬菌体抗体在技术上是可行的,这为抗HBsAg基因工程抗体的应用以及设计针对乙型肝炎的新型靶向治疗策略奠定了基础。
刘雪林贾雷立马巍娜张传福宋宏彬
关键词:噬菌体抗体人源抗体
轻链替换文库对抗HBs基因工程Fab抗体亲和力的影响被引量:2
2006年
目的测定轻链替换文库对基因工程Fab抗体的亲和力的影响。方法将PCR扩增的人抗体轻链基因插入已克隆有人源抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体重链Fd基因的噬菌粒中,构建成轻链替换文库,经亲和淘洗,从该文库中筛选与重链Fd基因相匹配的轻链基因。结果链替换的噬菌体抗体(phab)的ELISA光吸收值(A)从0.43±0.09提高到最高为1.24±0.10。序列分析ELISA光吸收值(A)最高的5株phab的轻链基因,3株κ链的碱基序列基本一致,属ⅤκⅢ亚群,2株λ链的基因序列相同,属ⅤλⅠ亚群。结论所筛选出来的phab具有抗HBsAg的特异性。
刘雪林唐晓敏李申龙宋宏彬
关键词:噬菌体抗体抗体亲和力
共1页<1>
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