浙江省医药卫生科学研究基金(2009A019)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
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- BH3-only在奥沙利铂诱导结肠癌细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的研究BH3-only基因表达在奥沙利铂诱导人结肠癌细胞株凋亡中的作用及其机制。方法采用不同浓度（0．3、0．6、1．25、2，5、5、10和20mg／L）奥沙利铂处理人结肠癌细胞株SW480及HT29，应用MTT检测细胞生长抑制情况；流式细胞仪检测凋亡情况；荧光定量PCR检测BH3-only基Bim和PUMA表达。结果不同浓度奥沙利铂分别作用于结肠癌细胞SW480后，出现不同程度的细胞生长抑制作用，呈剂量依赖性。5mg／L和10mg／L浓度的奥沙利铂作用于SW480细胞24h后，细胞凋亡率分别为（4．87±0．55）％和（12．10±1．04）％，作用48h后分别为（11．47±0．85）％和（30．07±2．01）％，作用72h后分别为（28．99±2．12）％和（38．32±3．15）％，均显著高于相应时间点对照组细胞的凋亡率[（0．30±0．10）％、（0．40±0．10）％和（0．50±0．20）％，均P〈0．01]。同时Bim和PUMAmRNA表达水平也显著高于对照组（P〈0．05）。而同样处理的HT29细胞其生长抑制率、细胞凋亡率及Bim和PUMAmRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论奥沙利铂具有抑制结肠癌细胞株SW480生长并诱导其凋亡的作用，其机制可能与促凋亡相关基因BH3-only（Bim和PUMA）表达增强有关。
- 屠世良袁航何徐军马英玉
- 关键词：奥沙利铂结肠肿瘤细胞凋亡BIMPUMA
- PUMA和BIM表达与结直肠癌浸润转移及预后的关系被引量：6
- 2013年
- 目的研究BH3-only蛋白家族中p53上调凋亡调控因子（PUMA）和与bcl-2相互作用的细胞死亡调解因子（BIM）在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌侵袭、转移和预后关系。方法采用免疫组化染色方法（EnVision），检测PUMA和BIM蛋白在30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤及142例结直肠癌组织中的表达。分析PUMA、BIM蛋白表达与患者临床病理特征、预后及化疗耐药相关蛋白[P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）]的相关性。结果PUMA蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为82．4％，低于其在大肠腺瘤和正常大肠黏膜组织中的阳性表达率（均为96．7％）（χ^2=3．93、3．93，P〈0．05）。BIM蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为62．7％，明显低于其在大肠腺瘤组织中和正常大肠黏膜的阳性表达率（90．0％和96．7％）（χ^2=8．42、13．29，P〈0．01）。PUMA蛋白与BIM蛋白在结直肠癌组织中的表达呈正相关（r=0．747，P=0．000）。PUMA蛋白的表达与肿瘤的分化程度（χ^2=11．87）、浸润深度（χ^2=11．59）、淋巴结转移（χ^2=12．82）、TNM分期（χ^2=33．47）以及P-gp表达（χ^2=18．30）有关（P〈0．05），而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、病理组织学类型以及GST-π表达无关（P〉0．05）。BIM蛋白的表达与分化程度（χ^2=16．19）、淋巴结转移（χ^2=14．95）、TNM分期（χ^2=52．66）以及P-gp表达（χ^2=10．60）有关（P〈0．05），而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、病理组织学类型以及GST-π表达无关（P〉0．05）。PUMA、BIM阳性表达者的术后1、3、5年生存率明显高于阴性表达者（χ^2=6．10、27．60，P〈0．05）。淋巴结转移（RR=0．238）、TNM分期（RR=7．895）、PUMA（RR=1．691）和BIM蛋白的表达（RR=0．440）可作为结直肠癌独立的预后指标（P〈0．05）。结论PUMA、BIM在结直肠癌中的表
- 袁航屠世良何徐军
- 关键词：结直肠肿瘤凋亡诱导因子预后
- 大肠癌原代细胞培养方法的探索被引量：7
- 2013年
- 目的 :探讨肿块大体类型、分化程度、取材位置以及不同培养方法等因素对大肠癌原代细胞培养成功率的影响,寻求一种简便而高效的大肠癌原代细胞培养方法。方法:分别对选材不同的人大肠癌细胞进行胶原酶消化法、组织块法培养,并比较不同培养基、细胞培养方法和细胞纯化方法对大肠癌细胞原代培养结果的影响,倒置显微镜下观察原代细胞的生长情况,免疫细胞化学法检测细胞表面标记物的表达情况。结果:肿块增生型肿瘤标本污染较少,肿瘤中心部位取材的肿瘤细胞活性好(2例培养出满意细胞均为肿块增生型中央深部取材获得)。低分化级别肿瘤短期生长可表现出明显活力,细胞数多于中分化,但长期生长结果未发现细胞数明显增多。2例培养出肿瘤细胞并顺利传代,1例分化为Broder II级,1例分化为III级。采用RPMI 1640培养基,培养瓶瓶底用鼠尾胶原包被,加入适量生长激素,用组织块培养法进行原代培养,胰酶消化法纯化细胞,简便且效果好。免疫细胞化学检测培养的细胞来源于上皮组织。结论:肿块型肿瘤的中心部位、分化较差的肿瘤细胞活性好。大肠癌细胞原代培养,用组织块培养法和胰酶消化法纯化,采用RPMI 1640培养基,培养瓶瓶底用鼠尾胶原包被并加入适量生长激素,效果较好。
- 袁航屠世良
- 关键词：结直肠肿瘤细胞培养技术
- 结直肠癌BH3-only蛋白的基础研究及其临床意义
- 2010年
- BH3-only蛋白是近年来研究比较热门的Bcl-2家族中具有凋亡启动作用的亚家族。BH3-only蛋白亚家族仅含Bcl-2家族4个同源结构域（BH1—4）中的BH3域，而BH3域被认为是细胞凋亡起始的必需因子。
- 屠世良袁航
- 关键词：蛋白结直肠癌BCL-2家族细胞凋亡亚家族结构域
