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M-sol血小板保存液中添加花生四烯乙醇胺对体外保存血小板的影响被引量：3: 2013年; 本研究探讨在M-sol(mixture of solutions)血小板保存液中添加花生四烯乙醇胺(N-arachidonoylethanolamine,ANA)对体外保存血小板的影响。利用Amicus血细胞分离机采集无偿献血志愿者的血小板,血小板保养液为M-sol,实验组加入终浓度为0.1-50μmol/L的ANA,未加入ANA的另一组作为对照,置于22±2℃振荡仪中保存。于第7 d取样,用MTT比色法分析血小板的存活率。选定最佳浓度的ANA加入血小板保存液中,分别于第1、5、7、9和11 d取样,检测血小板计数(BPC)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板磷脂酰丝氨酸(PS)膜外表达以及可溶性P-选择素(sP-selectin)含量。结果发现,加入终浓度为0.5μmol/L ANA的血小板存活率(91.23±5.44%)最高,与对照组(62.54±4.79%)相比,差异具有统计学意义(P<0.05);保存第1、5、7、9和11 d实验组与对照组BPC均有下降趋势,但两组相比差较异均无统计学意义(P均>0.05);保存期间血小板MPV和PDW有增加趋势,实验组与对照组相比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。保存到第9和11 d血小板膜外PS的表达,在实验组PS表达阳性率显著低于对照组(7.69±1.82%vs 11.21±2.03%;10.74±1.78%vs15.37±1.95%),两组相比较差异具有统计学意义(P均<0.05);保存期间可溶性P-选择素含量在两组中均有增加趋势,实验组可溶性P-选择素含量显著低于对照组(30.19±2.03 ng/mL vs 39.18±2.66 ng/mL;34.52±2.64ng/mL vs 43.23±2.58 ng/mL),两组相比差较异具有统计学意义(P均<0.05)。结论:将低浓度ANA加入血小板M-sol保存液中,在一定程度上可以减轻血小板贮存损伤。; 庄云龙张毅乔文本于媛林明竺青周娟孙桂芝赵翠云聂向民刘虹陈元锋朱传福; 关键词：血小板活化

维生素B_2光化学技术对单采血小板中白细胞和血小板源细胞因子释放的影响被引量：4: 2017年; 目的:探讨维生素B_2光化学病原体灭活技术(PRT)处理的单采血小板对白细胞和血小板源细胞因子释放的影响。方法:随机选取捐献血小板的献血员20人,各取60 ml去白细胞单采血小板,平均分成2份:一份不做处理作为对照组,另一份采用维生素B_2联合紫外光照射的光化学法处理作为实验组。在血站标准条件下保存7d,分别于1、3、5和7 d取样,分析血小板计数(PC)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV);应用ELISA方法检测白细胞源细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α和IFN-γ)和血小板源细胞因子(CCL3、CCL5、TGF-β-1和PF4)含量以及可溶性P-selectin含量;流式细胞术检测血小板膜磷脂酰丝氨酸(PS)表达水平。结果:实验组与对照组相比,PC、PDW和MPV没有统计学差异。随着血小板贮存期的延长,血小板源性细胞因子含量逐渐增加,5-7 d时达到一个新的高度平台,且实验组中血小板源性细胞因子的含量显著高于对照组(P<0.05)。在血小板贮存的3、5和7 d时,实验组中PS表达阳性率显著高于对照组(P=0.0052,P=0.010,P=0.011)。在5和7 d时,实验组中P-selectin含量显著高于对照组(P=0.0138,P=0.0036)。白细胞源性细胞因子含量在实验组和对照组中相比较差异无统计学意义。结论:经PRT处理的去白细胞血小板中,细胞因子的释放主要来源于血小板,在贮存5和7 d时,血小板源性细胞因子的积累达到一个新的平台,其原因最可能是血小板的活化和凋亡。; 刘燕盖厦张文静申华乔文本张毅张传兴叶辉李惠玲庄云龙; 关键词：血小板

花生四烯乙醇胺对血小板凋亡的抑制作用及其机制探讨: 2014年; 目的探讨血站标准存储条件下花生四烯乙醇胺（ANA）对血小板凋亡的抑制作用及相关机制.方法取志愿者血小板,分别单独加入0.5 μmol/L ANA或联合加入0.5 μmol/L ANA和l μmol/L大麻素1型受体抑制剂利莫那班（Rimonabant,SR141716）,在（22±2）℃水平振荡仪中振荡保存7d,同时设不加药物的血小板作为对照组.流式细胞术检测血小板膜磷脂酰丝氨酸（PS）表达水平;Western blot法检测凋亡相关蛋白表达;用细胞色素C（Cyt-C）检测试剂盒检测其从线粒体释放到胞质水平;免疫共沉淀法检测BCL-XL和Bak蛋白相互作用.结果 ANA处理组PS表达阳性率（早期细胞凋亡率）显著低于对照组[（8.29±1.44）％对（14.24±2.47）％];ANA处理组Cyt-C从线粒体释放到胞质的百分比显著低于对照组[（3.29±1.44）％对（15.24±3.40）％];ANA处理组血小板凋亡相关蛋白磷酸化（p）-Akt和p-Bad表达水平均高于对照组[（71.33±10.26）％对（35.00±6.00）％; （39.00±9.64）％对（10.33±1.53）％,P值均＜ 0.05];ANA处理组BCL-XL和Bak蛋白的结合量显著高于对照组（约为对照组的2.6倍）;ANA处理组活化的caspase-9和caspase-3水平均显著低于对照组[（9.63±1.47）％对（23.24±2.47）％;（6.30±1.40）％对（13.20±2.50）％].ANA＋ SR141716组各项检测指标与对照组结果相似,两组相比差异无统计学意义.结论ANA通过影响凋亡蛋白的表达水平,抑制Cyt-C释放到胞质使血小板免于凋亡而起到保护作用.; 庄云龙乔文本张毅于媛房云海徐群张心声张文静; 关键词：血小板凋亡抑制蛋白质类凋亡调节蛋白质类

花生四烯乙醇胺对体外保存血小板影响的初步研究被引量：5: 2013年; 目的探讨花生四烯乙醇胺（ANA）对体外（22±2）℃水平振荡保存血小板（PLT）的影响。方法选择2011年11月7日至2011年11月25日，于山东省血液中心自愿捐献PLT的20例献血者作为研究对象。采用Amicus血细胞分离机采集研究对象的PLT，PLT产品摇匀后置于PLT专用保存袋内。在PLT样品中分别加人终浓度为0．1，0．5，1，5，10和50μmol／L的ANA，相应的对照组中不添加ANA。将PLT样品置于（22±2）℃水平振荡的振荡仪保存。于保存的第7天取样，用噻唑蓝比色法分析PI，T的存活率，筛选最佳的ANA浓度。分别于PLT保存袋中取PLT样品50mL，平均分成2份，其中一份加入最佳浓度的ANA溶液作为实验组（n=20），另一份不加ANA溶液作为对照组（n=20）。两组分别于保存的第1，3，5，7，9和11天取样，分析PLT计数、平均PLT体积（MPV）、PLT分布宽度（PDW）、PLT磷脂酰丝氨酸（Ps）膜外表达以及可溶性P-选择素含量。结果加入终浓度为0．5μmol／L的ANA使PLT存活率最高，约为对照组的1．7倍，两组相比差异具有统计学意义（t=14．32，P〈0．05）。于（22±2）℃保存的第1，3，5，7，9和11天，实验组和对照组的PI。T计数均呈下降趋势，至保存的第11天时实验组PLT计数显著高于对照组，两组比较，差异有统计学意义（P〈O．05）。保存期间实验组和对照组的MPV和PDW均呈增加趋势，至保存的第11天时，实验组MPV和PDW均显著低于对照组[（8．1±0．6）fL比（8．9±0．5）fL；（16．4±0．5）％比（17．0±0．7）％]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。保存的第7，9和11天时，实验组PS表达阳性率显著低于对照组[（8．29±1．44）％比14．24±2．47％；（13．1±1．81）％比（25．85±2．04）％；（21．18±1．78％）比（40．6±1．95）％]，两组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。保存第7，9和11天时，实验组可�; 刘金玲庄云龙杨伦张毅乔文本徐群赵翠云周娟于媛林明孙桂芝陈元锋朱传福; 关键词：血小板血液保存

花生四烯乙醇胺对血小板相关凋亡蛋白的影响: 2014年; 目的在血站标准存储血小板条件下,探讨花生四烯乙醇胺(N-Arachidonoylethanolamine,ANA)对血小板细胞相关凋亡的影响。方法利用Amicus血细胞分离机从无偿献血志愿者采集血小板,向其中一组加入终浓度为0.5μmol/L的ANA为ANA组,未加入ANA的另一组作为对照组,置于(22±2)℃水平振荡的振荡仪保存7 d。采用流式细胞仪检测血小板磷脂酰丝氨酸(PS)膜外表达;ELISA检测可溶性P-选择素的释放,Western blot检测血小板caspase-3和caspase-9的表达以及免疫共沉淀分析BCL-XL和Bak蛋白相互作用。结果 ANA组PS表达阳性率显著低于对照组[(8.29±1.44)%vs.(14.24±2.47)%,P<0.05];ANA组可溶性P-选择素含量显著低于对照组[(75.08±6.35)ng/ml vs.(90.37±8.91)ng/ml,P<0.05];ANA组BCL-XL和Bak蛋白的结合量显著高于对照组,约为对照组的2.6倍(P<0.05);ANA组caspase-9活性形式的量占总量(包括caspase-9酶原形式和活性形式)的百分比显著低于对照组[(9.63±1.47)%vs.(23.24±2.47)%];ANA组caspase-3活性形式的量占总量(包括caspase-3酶原形式和活性形式)的百分比显著低于对照组[(6.3±1.4)%vs.(13.2±2.5)%],两组相比差异均具有统计学意义。结论 ANA促进BCL-XL和Bak蛋白的结合,抑制了caspase-3和caspase-9的活化,在一定程度上抑制血小板凋亡。; 张红卫金孟民史军赵炳旺王雪刘燕梁刚刘虹庄云龙; 关键词：凋亡调节蛋白质类血小板

维生素B_2联合紫外光照射光化学法对血小板源性细胞因子释放的影响: 2016年; 目的探讨病原体灭活技术(PRT)是否对血小板源性细胞因子的释放产生影响。方法随机选取捐献血小板的献血者20人,取单采血小板标本60 m L/人(份),全部平均分成2份(组),实验组:20份采用维生素B2(终浓度为50μmol/L)联合紫外光照射(波长265-370 nm,剂量6.2 J/m L)光化学法照射8.5 min;对照组:20份不做处理。2组标本均放置于(22±2)℃水平振荡条件下保存7 d,分别于1、3、5和7 d取样6 m L,检测其血小板计数(Plt)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)以及血小板源性细胞因子(CCL3、CCL5、TGF-β-1和PF4)含量。结果在保存的7 d过程中,与对照组相比,实验组中Plt略微降低,MPV和PDW略微升高(P>0.05)。实验组与对照组比较,在7 d时,CCL3含量(pg/m L)为11.90±0.4 vs 10.97±0.51(P<0.05),CCL5含量(ng/m L)为190.10±15.03 vs 150.02±20.0(P<0.05);在5和7 d时,TGF-β-1含量(ng/m L)分别为22.18±2.36 vs 21.15±1.43、37.21±3.01 vs 34.11±2.03(P<0.05),PF4含量(mg/L)分别为7.87±1.05 vs 5.75±0.91、9.01±1.11 vs 6.13±1.07(P<0.05)。结论随着血小板贮存时间的延长,血小板源性细胞因子的积累逐渐增加;在血小板保存末期,VB2-PRT处理明显增加血小板源性细胞因子的积累。; 庄云龙刘燕张文静张毅叶辉张传兴秦敬民; 关键词：血小板源性维生素B2 紫外光照射单采血小板

花生四烯乙醇胺对血小板线粒体细胞色素C的释放和细胞凋亡的影响被引量：1: 2014年; 目的探讨花生四烯乙醇胺(ANA)对血小板线粒体细胞色素C(Cyt-C)的释放和细胞凋亡的影响。方法将从无偿献血者中采集的血小板,分为实验组(n=20):加入终浓度为0.5μmol/L的ANA;对照组(n=20):未加ANA;2组均置于(22±2)℃水平振荡的振荡仪保存7 d。Western blot检测血小板线粒体Cyt-C的释放和caspase-3的表达、流式细胞仪检测血小板磷脂酰丝氨酸(PS)膜外表达,ELISA方法检测caspase-3的活性。结果实验组与对照组比较,PS表达阳性率:(8.29±1.44)%vs(14.24±2.47)%(P<0.05);caspase-3活性形式表达量:(0.063±0.014)%vs(0.132±0.025)%(P<0.05);caspase-3活性:0.096±0.04 vs 0.208±0.03(P<0.05);Cyt-C从线粒体释放到胞浆的数量比值:(3.18±1.32)%vs(15.13±3.40)%(P<0.05)。结论 ANA降低血板PS的膜外表达、减少线粒体Cyt-C的释放以及降低caspase-3活性,延缓了血小板凋亡。提示ANA可能通过抑制线粒体介导的途径抑制血小板凋亡。; 庄云龙李蓬刘燕张毅乔文本于媛房云海徐群朱传福张文静; 关键词：血小板线粒体细胞凋亡细胞色素C CASPASE-3

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山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2011SW044)

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