国家自然科学基金(81260488)
- 作品数：18 被引量：51H指数：6
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- HPLC Fingerprinting and Spectrum-antitumor Effect Relationship for Discrimination between Mylabris phalerata Pallas and Mylabris cichorii Linnaeus
- 2018年
- 目的：基于高效液相指纹图谱和光谱－抗肿瘤作用的关系来区别两种斑蝥.方法：在本研究中,开发了一种简单有效的高效液相色谱法整合化学计量学分析与光谱－抗肿瘤作用关系的方法来区别两种斑蝥：南方大斑蝥（MP）和黄黑小斑蝥（MC）.结果：在指纹图谱分析中,我们通过PCA和OPLS一DA用相似性和模式识别分析的选择了14个特征峰来评估MP与MC的差异.来自中国10个地区样本的HPLC色谱图表明了MP和MC之间的差异,另外,发现了7个化学标志物.在光谱－抗肿瘤作用关系分析中,通过灰度相关分析和多元线性回归分析,发现了4个活性标志物能够降低IC50,可能是斑蝥中的抗肿瘤成分.化学计量分析法联合光谱－效应关系的结果表明峰2（胞嘧啶）,4（未知）和14（未知）是区分2种斑蝥的重要区分标志物.结论：这种方法可行,可信并且能有效的区分MP和MC,并能提供一种对昆虫药物的质量控制的新方法.
- Jian-Yong ZhangQi-Hong ChenXian PeiRong YanCan-Can DuanYun LiuXiao-Fei Li
- 关键词：斑蝥
- 贵州及周边地区斑蝥资源抗人肝癌HepG_2细胞的活性研究被引量：5
- 2016年
- 目的初步分析贵州及周边不同地域种斑蝥体内结合斑蝥素的含量,筛选出抗人肝癌Hep G2细胞效果显著的地域种。方法采用水提结合斑蝥素方式提取有效成分,运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析提取液内的结合斑蝥素含量,采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)考察提取液对人肝癌Hep G2细胞的体外抗肿瘤活性,应用倒置相差显微镜检测凋亡细胞的形态学变化。结果贵州省罗甸县境内南方大斑蝥与黄黑小斑蝥体内所含结合斑蝥素含量均高于其他地区同种斑蝥,分别为375、290 mg/L;不同地域种的斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌Hep G2细胞的增殖均有抑制作用,其中贵州茂丼镇境内的2种斑蝥对人肝癌Hep G2细胞的抑制效果明显优于其他地区同种斑蝥,其半数抑制浓度(IC50)分别为0.78、0.65 mg/L;形态学观察结果显示,茂丼镇南方大斑蝥体内结合斑蝥素可促进人肝癌Hep G2细胞凋亡,且凋亡细胞呈现典型的形态特征。结论不同地域不同种斑蝥体内结合斑蝥素的含量存在较大差异;茂丼镇境内2种斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌Hep G2细胞的抑制效果优于其他地域种,可进行深入研究。
- 郭侃李晓飞晏容刘云张沛刘流
- 关键词：斑蝥斑蝥素肝肿瘤气相色谱-质谱法
- 结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用被引量：5
- 2016年
- 目的研究贵州罗甸地区南方大斑蝥(Mylabris phalerata Pallas)和黄黑小斑蝥(Mylabris cichorii Linnaeus)体内的结合斑蝥素(conjugated cantharidin)对人肝癌Hep G2细胞增殖和凋亡的影响。方法采用两种斑蝥三氯甲烷提取物的水浸液获取结合斑蝥素。运用磺酰罗丹明染色法(SRB)检测结合斑蝥素对Hep G2细胞增殖的作用。利用Annexin V-FITC/PI双染法检测结合斑蝥素对Hep G2细胞凋亡的影响。应用倒置相差显微镜、透射电子显微镜观察凋亡细胞的形态学变化。结果两种结合斑蝥素对Hep G2细胞的增殖均有显著的抑制作用,呈剂量依赖性,其半数抑制浓度(IC50)分别为0.90、0.85 mg/L。流式细胞术结果显示,以0.90 mg/L的南方大斑蝥结合斑蝥素和0.85 mg/L黄黑小斑蝥结合斑蝥素作用Hep G2细胞24 h后,细胞呈典型的凋亡形态特征,凋亡率分别为(10.5±1.45)%和(12.8±1.53)%;结论两种来源斑蝥体内结合斑蝥素均可抑制肝癌Hep G2细胞的增殖并促进其凋亡。
- 刘流郭侃刘云裴显张沛李晓飞
- 关键词：肝癌HEPG2细胞增殖凋亡
- 黑黄小斑蝥中挥发性化学成分的SPME-GC-MS分析被引量：1
- 2015年
- 采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(SPME-GC-MS)分析黑黄小斑蝥(Mylabris cichorii Linnaeus)挥发性成分的方法。SPME的萃取头为100μm PDMS,样品用量为0.4 g,平衡及吸附温度为80℃,平衡时间为30 min,吸附时间为15 min,解吸时间为2 min。从斑蝥样品中分离得到21个色谱峰,鉴定出11个化合物,其中共有峰为斑蝥素、环己甲醇、十三烷、环己醇和1,13-十四碳二烯,但产地间成分和含量差异较大。该法可用于斑蝥挥发性成分的快速分析,为评价斑蝥质量提供参考。
- 裴显娄方明张建永刘云刘流晏容李晓飞
- 关键词：挥发性成分
- 芫菁体内斑蝥素和结合斑蝥素抗肿瘤活性的比较研究被引量：12
- 2013年
- 目的比较提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素的体外抗肿瘤活性。方法将提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素作用于人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404;采用WST-1比色法进行体外细胞抑制实验,测定斑蝥素和结合斑蝥素对上述三种肿瘤细胞的生长抑制率。结果斑蝥素对HT-29结肠癌细胞的抑制作用不稳定,对PLC/PRF/5和BEL-7404肝癌细胞的抑制作用随用药浓度的增加而增强,但在高浓度作用下仍表现出较低抑制率。结合斑蝥素对HT-29、PLC/PRF/5、BEL-7404三株肿瘤细胞均表现出明显的抑制效果,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度分别为:28.51,86.77,21.27μmol/L。结论芫菁体内结合斑蝥素对人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404的抑制作用远好于斑蝥素,提示结合斑蝥素的抗癌效果极可能好于斑蝥素。
- 李晓飞娄方明晏容侯晓晖张恒刘云
- 关键词：斑蝥素抗肿瘤半数抑制浓度
- 斑蝥素酸镁与斑蝥酸钠对喉癌Hep-2细胞抑制活性比较的初步研究被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨自主研发产物--斑蝥素酸镁对人喉癌上皮细胞的增殖抑制活性是否好于临床抗癌药物斑蝥酸钠。方法:采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)、细胞集落形成实验分别考察斑蝥素酸镁和斑蝥酸钠对人喉癌上皮细胞Hep-2的影响。结果:与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁作用喉癌Hep-2细胞的效果更加显著。其IC50仅为2.19μmol·L-1,远低于斑蝥酸钠的IC50(15.75μmol·L-1)。细胞集落形成实验显示,与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁明显阻止细胞集落的形成,最低有效浓度为1.75μmol·L-1,远低于斑蝥酸钠的最低有效浓度(3.50μmol·L-1)。结论:与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁对喉癌Hep-2细胞具有更加显著的抑制效果,可进行更加深入的研究。
- 卜雯雯朱欣婷刘云晏容郭侃张云辉李晓飞
- 关键词：斑蝥酸钠集落形成
- 不同产地与品种斑蝥中化学成分的GC-MS分析被引量：3
- 2012年
- 运用气相色谱-质谱联用技术分析了7种不同产地和品种的斑蝥(Mylabris)所含化学组分,共鉴定出12种组分,其中4种成分均在所有斑蝥中检出。结果表明,不同产地与品种斑蝥的化学成分组成既有共性,又有自身的独特性。
- 李晓飞晏容刘云侯晓晖娄方明
- 关键词：化学成分气相色谱-质谱联用
- 南方大斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响
- 2016年
- 利用水提法从来自罗甸县茂井镇的南方大斑蝥中提取得到结合斑蝥素,作用于人肝癌HepG2细胞后,分别利用Annexin V-FITC/PI双染法检测HepG2细胞的凋亡率,RT-PCR法检测Bax、Bcl-2mRNA相对表达情况,利用Western blot法检测HepG2细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。实验结果表明罗甸县茂井镇产的南方大斑蝥体内结合斑蝥素可诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,其机制可能与上调Bax和下调Bcl-2表达有关。
- 刘流郭侃刘云晏容姜胜男李晓飞
- 关键词：肝癌HEPG2细胞凋亡BAXBCL-2
- 斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721及其裸鼠皮下移植瘤的影响被引量：10
- 2015年
- 【目的】探讨斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721及其裸鼠皮下移植瘤的影响。【方法】1、采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)检测不同浓度斑蝥素酸镁在体外对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用;2、流式细胞术检测斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721细胞周期和细胞凋亡的影响;3、Hoechst33342染色观察斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721细胞形态的影响;4、透射电镜观察斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721超微结构的变化;5、建立人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,实验组每只裸鼠瘤周注射斑蝥素酸镁6.26×10?5 mmol,对照组给予相同容积的无菌生理盐水瘤周注射,计算抑瘤率;6、原位末端标记染色(TUNEL)法检测人肝癌裸鼠皮下移植瘤组织细胞凋亡情况。【结果】1、斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721有比较明显的抑制作用,抑制率随药物浓度的增加而升高,呈剂量效应关系,其半数抑制浓度(IC50)为1.79?mol/L;2、流式细胞检测结果显示:人肝癌细胞SMMC-7721在斑蝥素酸镁的作用下,G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增加,细胞出现G2/M期阻滞;细胞凋亡率随斑蝥素酸镁浓度加大而逐渐增加;3、Hoechst33342染色镜下显示:斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721出现凋亡细胞形态特征;4、透射电镜观察:斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721出现细胞核异形、染色质聚集成团、边集,见凋亡小体;5、斑蝥素酸镁组肿瘤体积、重量显著小于生理盐水组(P﹤0.05),抑瘤率为49%;6、TUNEL法提示斑蝥素酸镁组移植瘤组织细胞凋亡率显著高于生理盐水组(χ2=92.609,P﹦0.000)。【结论】斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721在体内外均有抑制增殖作用,并可以诱导肿瘤细胞凋亡,其凋亡的发生与细胞分裂期阻滞有关。
- 晏容刘云朱欣婷易小飞刘流李晓飞
- 关键词：人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠
- 溴代去甲斑蝥素酰胺衍生物的合成和抗癌活性研究被引量：1
- 2017年
- 目的探寻一种高效的具有抗癌作用的化合物,设计合成新型去甲斑蝥素衍生物,并测试其抗肿瘤活性。方法顺丁烯二酸酐与呋喃反应得到中间体5,6-二氢去甲斑蝥素,然后进一步与液溴反应得到中间体5,6-二溴去甲斑蝥素,再分别与多种芳香胺加热回流反应,生成多个溴代去甲斑蝥素酰胺衍生物;用CCK-8法对化合物C1、C2、C3、C5、C8进行人肝癌细胞HepG_2和人胃癌细胞BGC803的抑制活性测试。结果在浓度50μmol/L作用时,5种受试化合物对人肝癌细胞HepG_2的增殖抑制率为48.20%,最低为7.10%,4种受试化合物对人胃癌细胞BGC803的抑制率最高达64.23%;而对人胃癌细胞BGC803的增殖抑制率达50.00%以上。结论溴代去甲斑蝥素酰胺衍生物具有一定的抗胃癌活性,但其抗肝癌活性相对较弱。
- 贾佳赵长阔李晓飞
- 关键词：斑蝥素二氯甲烷抗肿瘤药
