国家自然科学基金(39870577) 作品数:12 被引量:33 H指数:2 相关作者: 张红琳 杨利国 王诚 茆达干 姜勋平 更多>> 相关机构: 南京农业大学 华中农业大学 南京晓庄学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
大鼠垂体抑制素免疫组织化学定位 2008年 [目的]研究垂体本身能否分泌抑制素,探讨抑制素作用于垂体的方式。[方法]采用免疫组织化学定位技术对大鼠垂体组织进行免疫组化学分析。[结果]试验组与对照组大鼠的垂体组织上存在明显的抑制素阳性反应区,而阴性对照试验组未见阳性反应区。[结论]垂体本身能分泌抑制素,抑制素可能以旁分泌的方式作用于垂体,同时抑制素可能以旁分泌的方式与其受体结合。 张红琳 杨利国关键词:抑制素 免疫组化 垂体 猪卵泡抑制素受体的分离与纯化 2008年 通过分离纯化卵泡抑制素受体,确定其受体类型,旨在为抑制素的作用机制研究奠定基础。采集30头长白猪垂体组织制备膜蛋白,用亲和层析法从该蛋白组分中分离、纯化出抑制素受体。SDS-PAGE结果发现该受体提取物中有6种蛋白,分子质量从14 ku到130 ku不等,表明抑制素受体可能不是特异性的单一受体,而是共受体。改良的ELISA结果证实,该受体提取物特异性活性为99 U/mg,能与抑制素结合,且与剂量呈正相关(R=0.993)。 张红琳 杨利国 李斌 茆达干关键词:抑制素 亲和层析法 受体 抑制素的主要研究方法及其在动物繁殖上的应用 2007年 本文阐述了抑制素的主要研究方法及其在动物繁殖上的应用。 张红琳 赵玲玲关键词:抑制素 繁殖 猪血脑屏障内皮细胞微囊的制备与鉴定 2004年 选二花脸母猪和长白母猪各 5头 ,取大脑皮质 ,制备微血管 ,分离内皮细胞微囊 ,应用倒置显微镜和透射电镜观察微囊的完整性 ;通过测定γ-谷氨酰转肽酶、5′-核苷酸酶、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等标志酶活性 ,鉴定微囊的纯度和生物学活性。结果表明 ,用该方法分离得到的大脑皮质内皮细胞微囊的完整性较好 ,纯度较高 ,生物学活性好 。 张红琳 杨利国2 王诚关键词:血脑屏障 卵泡抑素的生物学作用及其机制的研究 被引量:5 2000年 卵泡抑素又名 FSH抑制蛋白 ( FSH-suppressing protein,FSP) ,是一种单链糖蛋白 ,有多种形式。作为 Activin的结合蛋白 ,它可以通过 Activin/ FSP系统来调节动物的生殖活动。近年来的实验表明 ,FSP可以通过其作用系统 ,在生殖系统以外的器官例如肝、肾、胰、骨骼、皮肤等器官和组织中起作用。FSP在细胞表面有肝素结合区 ,这有利于发挥其生物学作用。 FSP更可能是通过旁分泌或自分泌的方式与 Activin一起相互作用 ,参与体内各种生理活动的调节。 王诚 杨利国 王锋关键词:卵泡抑素 生物学作用 ^(125)I-抑制素在大鼠垂体和下丘脑的放射自显影研究 被引量:2 2007年 目的研究抑制素(INH)在体条件下能否通过大鼠的血脑屏障及在垂体或下丘脑的分布。方法采用颈静脉灌流和放射自显影技术,将20只 SD 大鼠分为4组,每组5只,第1~3组(实验组)颈静脉注射^(125)I-INH 50μl,第4(对照)组注射等量的生理盐水。第1,2,3组分别于注射后30,60和120 min 断头处死,取出垂体、下丘腑,以生理盐水洗涤,测量放射性计数,收放射性最大组的垂体与下丘脑组织行放射自显影分析。结果第1组垂体的放射性最高[(1008.00±5.78)Bq],而第2和3组分别为(723.00±4.95)和(491.00±4.90)Bq;1~3组的下丘脑放射性分别为(20.00±1.01),(22.00±0.95)与(19.00±0.73)Bq。第4组垂体与下丘腑的放射性分别为(16.00±1.40),(15.00±0.98)Bq。各实验组大鼠垂体的放射性与对照组差异有统计学意义(P<0.01),且在注射后30 min 放射性最大(第1组),60和120 min 后逐渐降低;而实验组与对照组大鼠的下丘脑放射性差异无统计学意义(P>0.05);放射自显影结果示,实验组大鼠的垂体组织上有明显的银颗粒,而对照组没有;实验组和对照组大鼠的下丘脑组织上均未见明显的银颗粒。结论 ^(125)I-INH 能通过大鼠血脑屏障,垂体在注射后30 min 放射性最大,在大鼠垂体上有 INH 结合位点或受体,而在其下丘脑没有。 张红琳 杨利国 周梅仙关键词:抑制素 碘放射性同位素 放射自显影术 垂体 下丘脑 用Dextran T-70和蔗糖分离猪血脑屏障微血管的效果比较 2001年 以DextranT 70和蔗糖为分离液 ,经组织匀浆、差数和密度梯度离心、玻璃柱色层过滤等步骤 ,从猪大脑组织中分离得到脑微血管内皮细胞 ,建立体外血脑屏障研究模型 ,并用显微分析技术和测定γ 谷氨酰转肽酶、 5′ 核苷酸酶、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶等标志酶活性 ,鉴定该模型的纯化程度和完整性及生物学活性。结果表明 ,用两种分离液均能分离得到完整性好、纯度和生物学活性均高的微血管内皮细胞 ,尤其是用DextranT 70制备的微血管 ,其生物学活性和纯度高于用蔗糖离心所得的微血管。这些制备物可用于研究血脑屏障的代谢、结构。 王诚 杨利国 张红琳关键词:血脑屏障 微血管 蔗糖 母猪血脑屏障转运卵泡抑制素的动力学研究 被引量:2 2004年 应用玻璃珠层析和密度梯度离心法从二花脸和长白各5头母猪大脑皮质中制备血脑屏障微囊,从微囊浓度、最适反应时间、离子通道、渗透压等角度分析影响血脑屏障转运卵泡抑制素的因素,获得最适工作条件,建立体外转运方法。应用该方法分析猪血脑屏障转运卵泡抑制素的动力学参数,发现二花脸猪和长白猪的Km值分别为0.17和0.07 pmol·L-1,Vmax值分别为1.15和2.27 pmol·min-1·mg-1(P>0.05)。 张红琳 杨利国 王诚 茆达干关键词:母猪 血脑屏障 卵泡抑制素 动力学 应用磁珠免疫亲和层析法从猪卵泡液中提纯抑制素 被引量:2 2004年 采集猪卵泡液 ,用 70 %饱和度硫酸铵溶液沉淀后 ,分别过SephadexG 2 0 0柱和SephadexG 10 0柱 ,最后用磁珠免疫亲和层析法进一步提纯 ,使抑制素纯度从 12 4 μg·mg-1升至 39 4 μg·mg-1。PAGE电泳分析证明 ,提纯物只出现一条相对分子质量为 32 0 0 0的带 ,SDS PAGE电泳分析发现有两条相对分子质量分别为 14 0 0 0~ 15 0 0 0和 170 0 0~ 180 0 0的带 ,即β、α亚基。 张红琳 杨利国 王诚关键词:卵泡液 抑制素 纯化 药物透过血脑屏障的研究进展 被引量:2 2008年 血脑屏障(BBB)是存在于脑组织和血液之间的一个屏障,能控制血脑两侧的物质转运,从而保证中枢神经组织内环境的相对稳定性.文章就药物透过血脑屏障的方式及影响因素进行阐述,旨在为治疗脑血管疾病和药物筛选奠定理论基础. 杨剑波 张红琳 赵俊丽 石国庆关键词:血脑屏障 药物 转运