国家高技术研究发展计划(863-101-04-01-07)
- 作品数：4 被引量：28H指数：3
- 相关作者：李海英马春泉郭德栋张莹高传军更多>>
- 相关机构：黑龙江大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 甜菜M14品系花期cDNA文库的构建及特异表达基因的筛选被引量：5
- 2008年
- 构建了甜菜M14品系在花期的ZAP表达载体的cDNA文库,利用抑制消减杂交方法所获得的M14品系特异表达的2个EST片段为探针筛选cDNA文库,获得了M14品系特异表达cDNA片段Me-86和Me-84;进一步利用RACE技术获得了基因M14-86 cDNA片段的全长序列。生物信息学分析表明M14品系特异表达基因M14-86的cDNA片段与cDNA片段Me-84分别与大花马齿苋(Portulaca grandiflora)及瓶子草(Sarracenia purpurea)的26S核糖体RNA具有很高的同源性。
- 马春泉张莹崔颖王冰王玉婷刘金玲王宏建李海英
- 关键词：CDNA文库ESTRACE技术
- 利用mRNA差异显示技术分离甜菜M_(14)品系特异表达基因的cDNA片段被引量：14
- 2007年
- 二倍体栽培甜菜与白花甜菜杂交、进一步回交而获得的单体附加系M14,其染色体组成中除了含有18条栽培甜菜染色体外,还附加有一条野生白花甜菜第9号染色体,该附加染色体通过母本的传递率为96.5%;单体附加系传递率如此高的原因是因为M14中有无融合生殖基因的存在。本实验采用mRNA差异展示技术对甜菜无融合生殖品系M14和正常有性生殖的二倍体栽培甜菜A2Y花蕾减数分裂时期的基因表达进行了差异分析。采用GT15A,GT15G,GT15C3种锚定引物,共筛选了20个随机引物,通过RT-PCR检测,获得了6个阳性差异表达的cDNA片段,应用NCBI的BLASTx软件对测序结果进行同源序列、相似序列检索,为进一步克隆无融合生殖基因提供侯选cDNA片段。
- 李海英马春泉于冰高传军张绍军张莹郭德栋
- 关键词：无融合生殖
- 甜菜M14品系特异表达基因ESTs的生物信息学分析被引量：3
- 2007年
- 甜菜M14品系具有无融合生殖特性,为了获得M14品系特异表达的基因,本实验室前期利用抑制消减杂交(SSH)和mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术对M14品系和能够进行有性生殖的栽培甜菜A2Y品系进行了基因特异表达研究,获得了298条M14品系特异表达基因的ES-Ts。对这些ESTs进行生物信息学分析并进行了GO分类,筛选出5条可能与基因表达调控和细胞周期调控相关的ESTs,为进一步获得这些基因的全长序列并研究其功能奠定了基础,也为今后能在甜菜M14品系中寻找并克隆与无融合生殖相关的基因提供了可靠的保证。
- 梅其文胡伟明吴烨东李海英
- 关键词：甜菜M14品系生物信息学分析
- 甜菜无融合生殖系AFLP指纹图谱试验体系的建立被引量：8
- 2002年
- 通过利用单酶切和单接头连接体系,在T4连接酶作用下进行连接,以连接产物为模板,在选择引物和ExTaq聚合酶作用下进行PCR特异扩增,扩增产物用琼脂糖凝胶检测分析。通过对甜菜叶片基因组DNA的分析,确立了适合于甜菜无融合生殖系的最适宜的AFLP试验体系。该方法操作简单、费用低,有利于该项技术的推广和应用。
- 齐小辉马春泉李海英王桂芝郭德栋
- 关键词：甜菜无融合生殖系AFLP指纹图谱
