国家自然科学基金(31101283)
- 作品数：12 被引量：79H指数：3
- 相关作者：徐斐曹慧于劲松袁敏翟明爽更多>>
- 相关机构：上海理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程自动化与计算机技术环境科学与工程更多>>
- 基于微机电加工技术芯片的量热式生物传感器的测热性能研究
- 2014年
- 采用鸡肝酯酶作为生物敏感元件,以基于微机电加工技术制作的NCM9924微量热芯片作为换能器,建立了用于农药的残留量测定的量热式生物传感器试验系统。应用此系统进行了量热芯片灵敏度、酶促反应放热和农药抑制试验研究。结果表明:在流量为0.5mL·min-1的情况下,换能器的温度灵敏度不低于1.184mV·K-1;本系统对同一酶活水平的放热量响应具有良好的重现性。鸡肝酯酶被2mg·L-1甲胺磷农药抑制后,系统放热曲线的峰高降低了50%。
- 于劲松徐斐曹慧袁敏
- 关键词：温度灵敏度
- 响应面法优化微量热仪中葡萄糖氧化酶催化反应的条件
- 2012年
- 利用微量热仪Micro DSCⅢ,以葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖的反应放热为评价指标,在单因素和中心旋转组合试验设计结果的基础上,通过响应面法优化葡萄糖氧化酶催化反应的工艺条件。3个因素对葡萄糖氧化酶催化产热的影响依次为:酶添加量>pH值>反应温度。响应面法分析显示,葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖的最佳工艺参数为:反应温度35℃、pH4.46、酶添加量1.58mg/mL,总的反应热为39.6668J,与预测值40.1071J的相对误差为1.11%。经响应面法研究所得回归模型显著。
- 张成楠徐斐曹慧于劲松
- 关键词：微量热法葡萄糖氧化酶响应面
- C反应蛋白快速定量检测试剂盒性能评价
- 2014年
- 目的：评价以胶乳免疫比浊法原理研制的C反应蛋白快速定量检测试剂盒的方法学性能。方法测定试剂盒的检测限、精密度、线性范围、回收率、贮存稳定性，将检测200份样本的结果与国外试剂盒比较。结果检测限为0．72 mg/L，精密度：高、低浓度水平的样本批内变异系数分别为3．09％、6．75％，批间变异系数分别为6．47％、6．84％；线性范围为1～215 mg/L，线性相关系数为0.99；平均回收率为112．5％，系统误差＜1/2TEa。贮存有效期：18个月。200份不同浓度样本测定结果与进口试剂盒比较差异无统计学意义。结论研制的C反应蛋白快速定量检测试剂盒符合临床检测要求。
- 施国民徐斐
- 关键词：性能评价
- 分离纯化提高鸡肝酯酶对农药抑制响应的研究被引量：3
- 2015年
- 本文对鸡肝酯酶粗酶液分别进行了硫酸铵分级盐析、硫酸铵分级盐析+透析和硫酸铵分级盐析+排阻色谱三种分离纯化操作,并采用四种结构不同的有机磷、氨基甲酸酯类农药,考察了不同的分离纯化操作对鸡肝酯酶对农药抑制响应的影响。发现经过这三种分离操作后,酯酶对农药抑制的响应程度显著提高,其被四种农药抑制的程度分别提高了6.49~11.30%、14.30~26.26%和10.95~39.87%,而敏感酯酶回收率分别为86.07~89.96%、66.60~73.57%和33.01~41.62%。由于分级盐析+排阻色谱的回收率过低,分级盐析+透析操作对于大规模的检测用酶制备更为实用。此外,研究还发现对这四种农药较敏感的酯酶均集中地分布在相同的分离部分,因此推测鸡肝酯酶粗酶液中对农药抑制敏感的酯酶可能是一种酶或几种溶解性质及分子量都比较接近的酶的混合。
- 于晓航朱念辛徐斐曹慧于劲松袁敏
- 关键词：鸡肝酯酶
- 重金属快速检测方法的研究进展被引量：34
- 2013年
- 重金属污染对生物和环境构成了严重的危害,因此重金属的防治工作刻不容缓,对于重金属离子的检测变得尤为重要。相较于传统的重金属检测方法,重金属快速检测法由于具有方便、快速、经济等优点而得到了迅速的发展。综合论述了酶抑制分析法、免疫分析法、微生物检测法、化学显色法等重金属快速检测方法的原理和方法,并对今后的研究方向做了简要的展望。
- 苏帅鹏徐斐曹慧翟明爽余劲松
- 关键词：重金属酶抑制法免疫分析法
- 共价偶联法在玻片表面固定适配体的研究被引量：1
- 2015年
- 以玻片为载体,采用共价偶联法对适配体进行了固定,考察了硅烷化试剂浓度、硅烷化反应温度和时间、适配体与玻片反应时间和温度、适配体浓度和长度对适配体固定率的影响,确定了适配体固定于玻片的最佳条件为:将浓度为1.59×10-5 mol·L-1的16个碱基的适配体涂抹在经4×10-3 mol·L-1硅烷化试剂45℃下处理30min的玻片表面上,在45℃下固定化反应120min,适配体固定率达62.05%。在此基础上初步探讨了固定有特异性适配体的玻片对水溶液中Hg2+的吸附,吸附汞的效率达49.84%。此方法操作简便、成本低廉,且能有效固定未经修饰的适配体,为利用适配体对水中重金属进行富集和去除的研究提供了参考。
- 武建超袁敏徐斐曹慧于劲松
- 关键词：玻片适配体重金属去除
- 抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的固定化及稳定性研究
- 2014年
- 采用双水相法纯化抗克伦特罗单克隆抗体(CLMcAb),并以其与酶标二抗的亲和力为指标,对CLMcAb的固定化工艺进行研究。在此基础上,通过耐冲刷实验及原子力显微镜(AFM)来表征固定化CLMcAb的稳定性。结果表明:当固定时间90min,CLMcAb稀释倍数2000倍,料液比0.65mL/颗,固定温度4℃时,固定化CLMcAb所表现出的活力最高,即OD值为1.43。纯化介质聚乙二醇(PEG)可通过在载体表面形成均匀紧密的网条结构,并降低其表面粗糙度(Ra)来提高固定化CLMcAb的稳定性。
- 王莉莉曹慧徐斐晏绍庆
- 关键词：固定化纯化响应面
- 酶标甲胺磷交联反应的pH及缓冲体系优化
- 2016年
- 采用碳二亚胺法制备酶标农药(过氧化氢酶标记甲胺磷),以酶标农药对鸡肝酯酶的抑制率和抑制后酶标农药-酯酶复合物中标记酶酶活为指标,对制备酶标甲胺磷交联反应的pH和所用缓冲液类型进行优化,并对其偶联率进行了分析。结果发现,pH增加有效促进了甲胺磷和标记酶分子之间的交联,而缓冲体系类型对此交联反应的影响相对较小。然而随之持续上升的偶联率带来的空间位阻效应也逐渐明显。随着pH增加,标记物抑制率和抑制后的标记酶活均呈现先增加后略下降的趋势,且分别在pH为6.0和5.5时达到峰值,其峰值时偶联率分别为24和22。综合考量,采用pH 6.0的2-(N-吗啉)乙磺酸一水合物(MES)缓冲液制备的酶标农药,其抑制率和标记酶活均达到较优值,分别为45.29%和47.67U,此时其偶联率约为24。
- 陆桑桑于劲松徐斐曹慧袁敏
- 关键词：交联反应PH抑制率酶活
- 酶生物传感器法和国标方法检测农药残留的抗干扰效果对比研究被引量：10
- 2016年
- 采用自主研制的酶生物传感器型农残检测仪,对比国标GB/T 5009.199-2003中的方法,就易于干扰检测结果准确性的蔬菜样品本地色、辛辣蔬菜中次生物质和加标静置时间这三个因素设计农药加标实验和加标静置实验进行对比验证。结果发现,酶生物传感器型农残仪由于配备了固定化酶作为检测元件,加上与其配套的检测流程,可有效解决有色样品中本地色、辛辣蔬菜中次生物质和加标静置时间长短干扰检测结果的问题。该检测方法测试结果重现性好、准确度高,此外对国标GB/T5009.199-2003中未涉及的部分农药(如毒死蜱、三唑磷)有较高的检测灵敏度,而这两种农药也是目前上海地区检出率很高的农药品种。作为一种有效的农药残留速测方法,酶生物传感器法能够更好地满足现场快速检测蔬菜中有机磷类农药残留的需求。
- 李萌于劲松徐斐曹慧袁敏
- 关键词：抗干扰抑制率
- 竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究
- 2012年
- 以量热式农残生物传感器为研究对象,借鉴免疫分析方法,进行竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究。结果表明,在甲胺磷浓度为0~0.004 mg.kg-1范围内,甲胺磷含量和放热量之间的线性较好,竞争性抑制酶联反应分析法测农药残留的最低检测限为0.0011 mg.kg-1,每次测定时间为20 min。
- Nguyen Van-luc于劲松徐斐华泽钊
- 关键词：鸡肝酯酶
