博士科研启动基金(43555011)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：广东药学院中山大学附属第一医院更多>>
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- 鱼精蛋白/DNA复合物的构建与生物性能评价被引量：1
- 2010年
- 目的研究非病毒基因载体鱼精蛋白/DNA复合物的制备方法及对其细胞毒性、不同量鱼精蛋白对pDNA的结合能力、体外细胞转染率。方法不同量鱼精蛋白与DNA在室温孵育后,得到鱼精蛋白/DNA复合物;用MTT法检测鱼精蛋白对HeLa子宫颈癌细胞的毒性作用,同时与PEI进行比较;利用琼脂糖电泳实验测定不同N/P比形成复合物时对DNA的阻滞情况;用结合沉淀试验比较不同量鱼精蛋白对包裹DNA的能力的影响;在荧光显微镜下观察比较它们对BEL-7402肝癌细胞转染率的大小。结果当鱼精蛋白/DNA复合物浓度升高时,对He-La子宫颈癌细胞的毒性均为0级,而聚乙烯亚胺(PEI)浓度升高时,对细胞的毒性明显增加;鱼精蛋白与质粒DNA形成复合物时所需的N/P比为1.5∶1,较PEI/DNA复合物形成时所需的N/P比2∶1要小;鱼精蛋白包裹DNA的能力随N/P比增大而增强,并且包裹DNA的能力要比PEI/DNA复合物转变得快;鱼精蛋白/DNA复合物对BEL-7402肝癌细胞的转染率较PEI/DNA复合物低,但毒性较低。结论鱼精蛋白/DNA复合物是一种制备工艺简单、细胞毒性小、对pDNA包裹能力高、转染率相对较高,具有一定应用潜力的非病毒基因载体。
- 胡海梅黄宏靓谭倩雯杨清波邱培元
- 关键词：非病毒基因载体生物性能
- 基因载体MPEG-PLL共聚物与DNA形成复合物的体外研究被引量：1
- 2011年
- 目的研究非病毒基因载体聚乙二醇单甲醚(MPEG)-聚-L-赖氨酸(PLL)共聚物的组成在体外介导基因传递的影响。方法将含有不同量MPEG的MPEG-PLL共聚物,与DNA形成复合物。测定MPEG-PLL/DNA复合物的粒径、Zeta电位,并进行凝胶阻滞分析,观察其对Hela细胞的毒性和转染率。结果 MPEG侧链并未明显影响PLL与DNA形成复合物的能力;连接MPEG能够明显降低复合物的粒径;复合物的Zeta电位随着MPEG量的增加而降低;细胞毒性取决于MPEG的量;共聚物MPEG-PLL介导体外基因传递的能力明显优于PLL。结论经修饰后的PLL与DNA形成复合物的理化性质、毒性和转染率均有很大程度的改善。
- 胡海梅潘仕荣张璇
- 关键词：非病毒基因载体基因治疗体外
