国家高技术研究发展计划(2001AA213041)
- 作品数：16 被引量：123H指数：8
- 相关作者：刘秀梵孙蕾张体银王玫童光志更多>>
- 相关机构：扬州大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所新疆农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技部农业科技成果转化资金江苏省教育厅产业化项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 禽流感病毒神经氨酸酶的结构及其生物学功能被引量：18
- 2005年
- 高致病性禽流感是由禽流感病毒(AIV)引起的一种急性传染病。AIV呈球形,有囊膜。其表面主要有2种糖蛋白,即血凝素和神经氨酸酶。其中神经氨酸酶具有重要功能,其对病毒的释放及病毒在感染细胞周围的扩散能力有很大影响。此外,神经氨酸酶对其周围的血凝素切割能力也有很大影响,从而在一定程度上可以导致病毒致病性的不同。神经氨酸酶是AIV中另一种重要抗原,抗神经氨酸酶的抗体可为机体遭受流感病毒攻击提供一定的保护力。因此,神经氨酸酶对AIV的生物学特性具有重要意义。
- 王全英乔传玲申之义
- 关键词：禽流感病毒神经氨酸酶
- 抗传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗
- 1925年传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)首次发生于美国洛岛,是鸡的一种病毒性呼吸道传染病,该病可引起鸡死亡和产蛋下降,目前在多数国家仍有流行,对养禽业造成了严重的危害。...
- 王云峰智海东王玫仇华吉周艳君田志军童光志
- 共表达H5和H9亚型禽流行性感冒病毒血凝素基因的重组禽痘病毒及其免疫效力被引量：8
- 2005年
- 为了构建更为安全有效能同时抵抗高致病性H5亚型和低致病性H9亚型禽流行性感冒(禽流感)病毒的基因工程疫苗,将H5和H9亚型禽流感病毒分离株的血凝素(HA)基因,分别由鸡痘病毒早晚期启动子PS和PE/L调控其转录,定向插入鸡痘病毒转移载体p11S中,获得H5A和H9A基因分别处于PS及PE/L启动子转录调控下的重组转移载体p11SH5H9。以FuGeneTM6转染法将p11SH5H9转染至已感染鸡痘病毒282E4疫苗株(wt-FPV)的鸡胚成纤维细胞(CEF)中。p11SH5H9与wt-FPV基因组DNA之间的同源重组产生了重组鸡痘病毒rFPV-11SH5H9。通过在含X-gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化rFPV-11SH5H9。以间接免疫荧光法试验证实,纯化的rFPV-11SH5H9感染的CEF能同时表达H5A和H9A。初步的动物试验表明,用105PFU的rF-PV-11SH5H9免疫无特定病原体(SPF)鸡,免疫后血凝抑制(HI)抗体监测阳性率均为100%(8/8);该重组病毒能显著抑制H9亚型AIV滴鼻、点眼后7日龄SPF鸡从气管和泄殖腔排毒,同时也能抵抗H5亚型AIV肌肉注射后对7日龄SPF鸡致死性攻击,保护率均为100%,显示出一定的应用前景。
- 陈素娟石火英孙蕾刘秀梵
- 关键词：H5亚型禽流感病毒H9亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒血凝素
- 表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的筛选被引量：3
- 2006年
- 将转移载体P11SF和PN11SF分别与282E4株鸡痘病毒(282E4strain fowlpox virus,282E4FPV)和大空斑株鸡痘病毒(large plaque strain fowlpox virus.LP FPV)共转染鸡胚成纤维细胞,通过蓝斑筛选,得到4株重组鸡痘病毒rFPV282E4-SFA、rFPVLP-SFA、rFPV282E4-SFB和rFPVLP-SFB,通过PCR和间接免疫荧光鉴定均为阳性,另外将各重组病毒分别传20代,测其遗传稳定性,结果显示均具有良好的稳定性。对SPF鸡进行免疫效力试验,攻毒后均100%保护,而对于商品鸡,保护率分别为64%、60%、52%和88%。
- 张体银孙蕾梁萍刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒免疫效力
- 鸡痘病毒复制非必需区的选择对重组鸡痘病毒免疫效力的影响被引量：10
- 2005年
- 母源抗体的干扰是重组鸡痘病毒(FPV)活载体疫苗至今未能得到大规模推广应用的主要原因,而选择适当的FPV复制非必需区可能是解决这一问题的方法之一。根据已发表的美国致病株FPV的基因组设计两对引物,用PCR方法扩增FPV假定复制非必需区的两个侧翼区FPV1和FPV2 ,利用此假定复制非必需区构建FPV表达载体pP12LS及表达ZJ1株新城疫病毒(NDV)F基因的转移载体pP12LSF。pP12LSF与2 82E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞(CEF) ,经数轮蓝斑筛选得到纯化的重组病毒rFPV_FSC。重组FPV在CEF上连续传2 0代仍具有良好的遗传稳定性。对重组FPV进行免疫效力试验,在SPF鸡上,重组病毒rFPV_FSC和与之仅有复制非必需区差异的rFPV_FSB均能抵抗NDV强毒的攻击,提供10 0 %的保护。但在有母源抗体的商品鸡上,rFPV_FSC与rFPV_FSB的免疫效力却有显著差异,保护率分别为10 0 %和6 1 5 4 % ,rFPV_FSC的免疫效力与NDV常规油苗相当。试验结果表明,母源抗体对重组FPV的免疫效力有一定的影响。
- 孙蕾刘武杰陈素娟石火英刘秀梵吴艳涛张体银
- 关键词：鸡痘病毒免疫效力
- 表达传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因和新城疫病毒F基因重组禽痘病毒构建及其免疫效力初步研究
- 随着集约化养殖发展,呼吸系统疾病的预防越来越重要,其中传染性喉气管炎（ILT）和新城疫危害严重,而且现有的疫苗有一定的不足,导致疾病防制非常困难。因此,对于疫病的防制寄希望于新型疫苗。禽痘病毒表达系统是表达禽类病原基因的...
- 智海东王云峰王玫孙永科王利丽张绍杰童光志
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒新城疫病毒重组鸡痘病毒
- 文献传递
- 新城疫病毒融合蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：9
- 2004年
- 用新城疫病毒(NDV)F48E8株作为包被抗原,建立了检测由鸡痘病毒载体介导表达的NDV融合蛋白(F)抗体的间接ELISA方法。通过对20份阳性血清的P/N值与ELISA抗体效价(ET)的自然对数值(lnET)的线性回归分析,获得了回归方程lnET=0.201×P/N+4.632。应用该ELISA方法对表达NDVF基因的重组鸡痘病毒免疫鸡群进行了血清抗体检测,结果表明,血清的ELISA抗体效价与相应血清中和试验的抗体效价高度相关。攻毒保护试验的结果显示,ELISA抗体效价与机体的保护力表现一定程度的相关性。
- 韦栋平徐忠林张如宽刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒间接ELISA抗体效价鸡痘病毒基因工程疫苗
- H5亚型高致病性禽流感疫苗的免疫效力被引量：21
- 2004年
- 利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因(HA)的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)和全病毒灭活疫苗免疫商品鸡,比较两种疫苗的保护效力。结果发现,利用103PFU和106PFU的rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡和含母源抗体商品鸡,HI抗体应答水平均低于灭活疫苗免疫组。利用H5亚型禽流感病毒经肌肉注射攻毒后,rFPV-HA免疫的无母源抗体商品鸡获得了完全保护(100%),高于灭活疫苗保护率(94.7%);但rFPV-HA免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率(11.4%～15.8%)低于灭活疫苗免疫组的保护水平(68.4%)。结果表明,rFPV-HA诱导HI抗体的能力低于灭活疫苗;但rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡的保护率完全达到灭活疫苗保护水平,显示出了良好的应用前景;灭活疫苗和rFPV-HA均受到母源抗体的干扰,不适于在母源抗体处于高峰期时使用。
- 贾立军刘秀梵卢建红张艳梅彭大新张如宽
- 关键词：免疫效力血凝素基因重组鸡痘病毒
- 应用间接ELISA检测鸡痘病毒抗体方法的建立被引量：5
- 2005年
- 建立了检测鸡痘病毒抗体的间接 EL ISA方法。应用该方法检测鸡痘阳性血清 ,其灵敏度为琼脂扩散试验的 4 0 0~ 80 0倍 ,而且还具有特异性强、操作简便。
- 张体银李军伟孙蕾孙学辉张如宽刘秀梵
- 关键词：间接ELISA鸡痘病毒抗体检测鸡痘
- 表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建被引量：5
- 2007年
- 从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)的质粒扩增出N基因,构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因lacZ以及用于同源重组的禽痘病毒基因组的片段。在转移载体转染亲本病毒S-FPV-017感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)之后,采用蓝色表型筛选的方法,筛选到表达N基因的重组病毒,并对其进行了6轮蚀斑纯化。PCR方法鉴定证明重组病毒的基因组中含有完整PRRSVN基因,间接免疫荧光试验证明了PRRSVN蛋白在重组病毒感染的CEF细胞中获得表达,本研究为猪繁殖与呼吸综合征非复制型疫苗的研制打下了基础。
- 智海东王云峰张晶王玫刘娣童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白重组鸡痘病毒
