北京市自然科学基金(5102015)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 相关作者：孙清鹏赵福宽于涌鲲汤世坤王丽芳更多>>
- 相关机构：北京农学院山东师范大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- LeWRKY2基因的克隆及功能分析被引量：2
- 2012年
- 【目的】克隆番茄WRKY2转录因子,为研究番茄抗病反应的分子机理和分子育种奠定基础。【方法】根据克隆出的番茄LeWRKY2基因特异片段(GenBank登录号:EU755368.1),运用cDNA末端快速扩增(rapidamplification of cNDA ends,RACE)技术克隆番茄LeWRKY2 cDNA全长,并用生物信息学的方法对其进行分析。用实时荧光定量PCR方法检测番茄经JA、番茄灰霉菌(Botrytis cinerea)、放线菌酮(cycloheximide)刺激时LeWRKY2基因的表达情况。【结果】①从番茄中克隆到一条全长为1 007 bp的cDNA序列,命名为LeWRKY2基因,阅读框471 bp,编码156个氨基酸。②LeWRKY2蛋白含有1个WRKY结构域和1个C2H2型锌指结构,可能具有转录、转录调控、信号传导功能。③100μmol.L-1茉莉酸(jasmonic acid,JA)刺激番茄幼苗0—60 min时,LeWRKY2基因的相对含量与JA刺激时间成正比;而刺激60—150 min时,LeWRKY2基因的相对含量与JA刺激时间成反比;④番茄灰霉菌可以诱导LeWRKY2基因的的表达,且在4 h时表达量达到最高;⑤LeWRKY2基因的转录产物的合成不依赖于蛋白质的从头合成。【结论】LeWRKY2是一种参与番茄防御反应的早期快速反应基因。
- 孙清鹏李娜于涌鲲赵福宽万善霞潘金豹
- 关键词：番茄基因克隆茉莉酸
- 番茄中WRKY2基因的克隆
- 2011年
- WRKY转录因子在植物应对生物或非生物胁迫的反应及生长和发育中起重要作用,为研究WRKY转录因子在番茄中的功能,本研究根据课题组已经克隆的番茄WRKY转录因子片段设计引物,采用RT-PCR方法,从JA诱导的番茄幼苗中,获得了608bp的cDNA片段。序列分析表明,该序列含有WRKYGQK保守结构域,与Capsicum annuum WRKY-c序列相似性是79%,与Nicotiana tabacum NtWRKY-7序列相似性是74%,表明已经成功克隆了番茄WRKY2基因片段。
- 李娜于涌鲲赵福宽汤世坤孙清鹏于同泉路苹
- 关键词：番茄WRKY转录因子克隆
- LeWRKY1基因的克隆及分析被引量：2
- 2010年
- 采用RT-PCR和RACE技术克隆了番茄LeWRKY1 cDNA(Genbank登录号为FJ654265)全长,用生物信息学的方法对其进行分析,预测其编码的蛋白的定位和功能。同时利用Northern杂交技术分析了JA(jasmonic acid)或SA(salicylic acid)刺激时LeWRKY1在野生型番茄和番茄JA不敏感突变体jail(JASMONATE-INSENSITIVE1)及番茄JA生物合成突变体spr2(prosystemin-mediated responses2)中的表达情况。LeWRKY1 cDNA序列全长1 740 bp,阅读框1 083 bp。生物信息学分析表明LeWRKY1含有1个WRKY结构域和1个C_2H_2型锌指结构。LeWRKY1可能是一种定位于细胞核的DNA结合蛋白,并可能具有转录调控、信号传导功能。表达分析推测LeWRKY1的表达是JA依赖而非SA依赖性的,且LeWRKY1的表达不依赖于生物体内JA的从头合成。
- 于涌鲲王丽芳杜希华赵福宽孙清鹏
- 关键词：番茄茉莉酸水杨酸
- 茉莉酸等3种因素刺激番茄LeWRKY1的表达特征分析被引量：5
- 2010年
- 为了研究LeWRKY1参与植物抗逆反应的分子机理,采用实时荧光定量PCR技术研究了LeWRKY1在番茄灰霉菌(Botrytis cinerea)侵染、茉莉酸(jasmonic acid,JA)、水杨酸(salicylic acid,SA)刺激时的表达情况。结果表明:外源植物激素JA可诱导LeWRKY1的表达,而SA对其无明显诱导作用;番茄灰霉菌侵染可诱导LeWRKY1表达。LeWRKY1可能通过JA依赖而SA非依赖的信号途径参与番茄对番茄灰霉菌防御反应的应答。
- 王丽芳于涌鲲杜希华汤世坤赵福宽孙清鹏
- 关键词：番茄茉莉酸
- 番茄WRKY2基因的克隆(英文)被引量：1
- 2011年
- [目的]研究WRKY转录因子在番茄中的功能。[方法]根据已克隆的番茄WRKY转录因子片段设计引物,以100μmol/LJA处理6h后的番茄总RNA为模板,采用RT-PCR方法。[结果]从JA诱导的番茄幼苗中获得了608bp的cDNA片段,序列分析表明,该序列含有WRKYGQK保守结构域,与Capsicum annuum WRKY-c序列相似性是79%,与Nicotiana tabacum NtWRKY-7序列相似性是74%。[结论]已经成功克隆了番茄WRKY2基因片段。
- 李娜于涌鲲赵福宽汤世坤孙清鹏于同泉路苹
- 关键词：番茄WRKY转录因子克隆
- 茉莉酸等3种因素刺激番茄对LeWRKY1表达的影响分析(英文)被引量：2
- 2011年
- [目的]为了研究LeWRKY1参与植物抗逆反应的分子机理。[方法]采用实时荧光定量PCR技术研究了LeWRKY1在番茄灰霉菌(Botrytis cinerea)侵染、茉莉酸(jasmonic acid,JA)、水杨酸(salicylic acid,SA)刺激时的表达情况。[结果]外源植物激素JA可诱导LeWRKY1的表达,而SA对其无明显诱导作用;番茄灰霉菌侵染可诱导LeWRKY1表达。[结论]LeWRKY1可能通过JA依赖而SA非依赖的信号途径参与番茄对番茄灰霉菌防御反应的应答。
- 王丽芳于涌鲲杜希华汤世坤赵福宽孙清鹏
- 关键词：番茄茉莉酸
