福建省自然科学基金(C0510014)
- 作品数：3 被引量：7H指数：3
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- 白细胞介素-1β对人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的观察白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases3,MMP-3)表达的影响。方法采用组织块培养法对人眼小梁细胞(human trabecular cells,HTCs)进行体外原代及传代培养,取传3代小梁细胞分别加入含有IL-1β终浓度为0ng/ml(对照组)、5、10、25、50ng/ml的无血清培养液,24h后采用RT-PCR法及ELISA法检测MMP-3量的变化。结果RT-PCR法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50ng/ml实验组MMP-3/GAPDH的相对灰度比值分别为0.3437±0.0764、0.8588±0.0443、1.0079±0.0347、1.3466±0.0309,均高于对照组的相对灰度比值0.1037±0.0494,且各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);ELISA法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50ng/ml实验组的MMP-33浓度值分别为(2.0325±0.2456)ng/ml、(2.4607±0.350)ng/ml、(2.8532±0.1392)ng/ml、(3.5858±0.1141)ng/ml,均高于对照组的浓度值(1.2437±0.3910)ng/ml,且各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-1β在一定范围内促进MMP-3的表达,并且呈现一定的剂量依赖性,推测IL-1β可以通过促进MMP-3的表达来减少小梁网组织细胞外基质(ECM)的堆积,使房水引流通畅,降低眼内压。
- 李超吴瑜瑜
- 关键词：人眼小梁细胞白细胞介素
- 肿瘤坏死因子-α对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3和基层金属蛋白酶-9表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α,(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP-3、MMP-9)表达的影响。方法对人眼小梁细胞(human trabecular cells,HTCS)进行体外原代培养及传代培养。取传3代的小梁细胞分别施加含TNF-α终浓度为0(对照组)、1mg/ml、10mg/ml、25ng/ml的无血清培养液,48h后采用免疫细胞化学法观察小梁细胞MMP-3、MMP-9的染色变化。对结果进行计算机图像分析并进行统计学检验。结果利用免疫细胞化学法检测1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组小梁细胞MMP-3的平均灰度值分别为138.63±8.15、138.73±7.02、129.25±10.47,均低于对照组平均灰度值143.53±6.01,且各实验组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05);实验组小梁细胞MMP-9的平均灰度值分别为137.60±11.53、125.20±17.29、119.88±12.47,均低于对照组平均灰度值145.30±7.05,且各实验组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。结论TNF-α在一定范围内促进小梁细胞MMP-3及MMP-9的表达,增加了小梁网异常堆积的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的降解,使房水流出增加,眼压降低。
- 濮清岚吴瑜瑜林玲何艳
- 关键词：人眼小梁细胞肿瘤坏死因子基质金属蛋白酶
- NF-κB活性对TNF-α调节小梁细胞表达MMP-3和MMP-9的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是否参与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)调节人眼小梁细胞(human trabecular cells,HTCs)表达基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的过程。方法采用RT-PCR法和酶谱分析法(zymography)检测体外培养的人眼小梁细胞经0ng/ml(对照组)、1ng/ml、10ng/ml、25ng/mlTNF-α处理24h后,细胞表达MMP-3、MMP-9的量;运用NF-κB的特异抑制剂二硫氨基甲酸吡啶(pyrroli-dine dithocarba-mate,PDTC)抑制NF-κB的活化,观察TNF-α对体外培养的HTCsMMP-3,MMP-9表达影响的改变。结果运用RT-PCR法和酶谱分析法研究均发现经浓度为1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的TNF-α处理的细胞在mRNA和上清液中活性蛋白水平均能增加MMP-3、MMP-9的表达,各组mRNA/β-actin吸光度比值和条带酶解量与对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。提前30min加入PDTC,MMP-3、MMP-9的表达量分别较未加入PDTC组表达量明显减少,差异有显著性(P<0.05)。结论TNF-α可上调MMP-3及MMP-9的表达,PDTC能够下调TNF-α对小梁细胞MMP-3及MMP-9的表达,因此推测NF-κB可能参与MMP-3和MMP-9转录的启动。
- 吴瑜瑜濮清岚李超郭茂生
- 关键词：小梁细胞核因子-ΚB
