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国家重点基础研究发展计划(G1999011903)

作品数：15 被引量：91H指数：6
相关作者：涂长春余兴龙吴健敏陈振海任兆钧更多>>
相关机构：解放军军需大学兰州大学中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 15篇期刊文章
  • 4篇会议论文

领域

  • 16篇农业科学
  • 6篇生物学
  • 3篇医药卫生

主题

  • 14篇病毒
  • 12篇猪瘟
  • 11篇猪瘟病
  • 11篇猪瘟病毒
  • 11篇瘟病毒
  • 5篇蛋白
  • 5篇菌体
  • 5篇基因
  • 4篇疫苗
  • 4篇杆状
  • 4篇杆状病毒
  • 3篇疫苗株
  • 3篇噬菌体
  • 3篇口蹄疫
  • 3篇T4噬菌体
  • 2篇疫病
  • 2篇融合蛋白
  • 2篇融合基因
  • 2篇弱毒
  • 2篇弱毒疫苗

机构

  • 8篇解放军军需大...
  • 5篇中国兽医药品...
  • 4篇兰州大学
  • 4篇中国农业大学
  • 4篇中国农业科学...
  • 2篇军事医学科学...
  • 2篇石河子大学
  • 1篇吉林大学

作者

  • 8篇涂长春
  • 8篇余兴龙
  • 5篇吴健敏
  • 5篇王琴
  • 5篇陈振海
  • 4篇任兆钧
  • 4篇张茂林
  • 3篇范学政
  • 3篇王在时
  • 3篇宁宜宝
  • 3篇谢庆阁
  • 3篇刘在新
  • 3篇徐兴然
  • 2篇张居农
  • 2篇赵耘
  • 2篇李作生
  • 2篇夏春
  • 2篇宋立
  • 2篇冷青文
  • 2篇肖昌

传媒

  • 6篇中国兽医学报
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇中国寄生虫学...
  • 1篇上海农业学报
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇中国兽医科技
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇病毒学报
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇中国畜牧兽医...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 2篇2006
  • 3篇2005
  • 8篇2004
  • 4篇2003
  • 1篇2002
  • 1篇2001
共 15 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
口蹄疫病毒P12X3C3D多基因编码蛋白在昆虫细胞中的表达与检测被引量：6
2006年
利用杆状病毒表达系统构建了包含有口蹄疫病毒(FMDV)P12X3C3D多基因片段的重组杆状病毒。将该病毒感染Sf9细胞后,利用SDS-PAGE及夹心ELISA方法检测目的蛋白的表达。结果表明,重组杆状病毒能够表达FMDV目的蛋白,该表达产物能被FMDV阳性血清识别,具有一定的反应原性。
冷青文郭慧琛刘在新谢庆阁张居农
关键词：口蹄疫病毒杆状病毒表达系统真核表达
绿色荧光蛋白基因与猪瘟兔化弱毒疫苗株E2基因在杆状病毒中的融合表达被引量：8
2005年
为了研究猪瘟病毒E 2糖蛋白的立体结构及生物学特性,将增强型荧光蛋白基因(EGFP)和猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)E 2基因经PCR扩增后克隆至pB lueB acH is2A质粒,与杆状病毒DNA共转染后经PCR鉴定获得了含有EGFP和HCLV E 2融合基因(GFPTE 2)的重组杆状病毒rBACTE 2-339,并将其感染sf9细胞后在荧光显微镜下观察到了亮绿色荧光,说明融合基因已初步表达。
范学政王琴陈振海王在时赵耘宁宜宝
关键词：猪瘟病毒E2基因杆状病毒
T4噬菌体表面展示技术的研究进展被引量：8
2004年
吴健敏涂长春任兆钧
关键词：丝状噬菌体噬菌体表面展示技术噬菌体展示融合蛋白空间构象
猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽与T4噬菌体SOC蛋白的融合表达被引量：5
2003年
利用 DNA重组技术将猪瘟病毒 (clascical swine fever virus,CSFV) E2蛋白主要抗原编码区基因 (m E2 )与 T4噬菌体 SOC基因融合 ,插入 T4噬菌体表达质粒 ,构建成 T4噬菌体 SOC位点表达 m E2的表达载体 p1Sm E2。将其转化至 BL2 1 (DE3 )菌 ,取经 IPTG诱导后表达的目的蛋白 SDC- m E2进行 SOS- PAGE、薄层凝胶扫描分析、Western blot及 EL ISA等方法检测。结果表明 ,表达的 SOC- m E2蛋白相对分子质量约 2 5 70 0 ,表达量占菌体总蛋白量的 36 .7%,并具有与 CSFV特异性抗体反应的活性。
吴健敏任兆钧余兴龙马钢李吉平涂长春张念祖
关键词：T4噬菌体
原核表达的猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽的复性和纯化被引量：21
2003年
对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒 (CSFV) E2蛋白抗原表位区段 (m E2 )进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离 ,然后进行变性溶解和复性 ,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后 ,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物的 SDS- PAGE分析结果表明 ,其纯度达 97%。酶联免疫试验测定的结果显示 ,与复性前变性蛋白相比 ,纯化蛋白与 CSFV特异的单抗和多克隆阳性血清的反应活性提高了 2～ 16倍。
刘伯华余兴龙张茂林肖昌徐兴然吴健敏李作生涂长春
关键词：原核表达猪瘟病毒包涵体复性纯化
猪瘟病毒E2蛋白重组T4噬菌体的构建及免疫学特性被引量：6
2004年
利用重组 PCR技术将猪瘟病毒 (CSFV) E2基因与 T4噬菌体 SOC基因 C端融合 ,构建了大小为 12 33bp的SOC/ E2融合基因 ,将其插入携带 T4溶菌酶基因 (e)和 denv基因的 T4重组载体 (p RH) ,构建了重组载体 p RSE2 ,通过重组载体与缺失突变型 T4噬菌体基因发生同源重组 ,将 SOC/ E2融合基因整合入 T4噬菌体的基因组中。经EL ISA、Western blot等免疫学检测证实 ,T4噬菌体表达的 E2融合蛋白具有 CSFV免疫学活性 ,动物试验证实 T4 .SOC.
吴健敏任兆钧余兴龙张念祖涂长春
关键词：猪瘟病毒T4噬菌体免疫学特性
猪瘟兔化弱毒疫苗株E0蛋白在杆状病毒表达系统中的表达
猪瘟是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,对养猪业危害严重。CSFV的致病性呈现多样性,具有高、中、低毒力毒株和无致病性毒株。加强CSFV重要功能蛋白...
陈振海王琴宁宜宝范学政夏春
文献传递
口蹄疫多基因杆状病毒转移载体的构建
2004年
采用分步 PCR扩增连接的方法将口蹄疫病毒结构蛋白基因 P1 ,非结构蛋白基因 2 A、2 B、3 C蛋白酶和 3 D聚合酶按正确的读码框依次连接克隆入 p GEM-T载体。然后 ,将切取的目的基因亚克隆入杆状病毒转移载体 p Mel Bac B。构建成功的重组 p Mel Bac B/P1 2 X3 C3 D转移载体经测序鉴定 ,含有完整的目的基因表达盒 ,转移载体可与杆状病毒骨架载体进行昆虫 sf9细胞内同源重组 。
云涛冷青文郭慧琛刘在新张居农谢庆阁
关键词：口蹄疫基因工程疫苗
猪囊尾蚴RNA聚合酶亚基基因的筛选及结构初探被引量：2
2004年
的　从构建的剪切引导序列 (SL)cDNA文库中筛选猪囊尾蚴相关基因。　方法　提取猪囊尾蚴总RNA ,利用SL特异序列和带有噬菌体M13M4的olig(dT)为引物 ,反转录成cDNA ,构建猪囊尾蚴SLcDNA文库。随机筛选并通过酶切、PCR鉴定阳性克隆 ,分析其同源性。　结果　鉴定出一 3 3 2bp的插入片段 ,含有 2 0 4bp的开放阅读框(ORF)和 3′端 2 0bp的polyA尾巴 ,经核苷酸和氨基酸序列分析 ,所克隆的基因的氨基酸序列与其他真核生物如人、秀丽隐杆线虫、果蝇及拟南芥等的RNA聚合酶亚基基因同源性均高达 71.6%以上。　结论　筛选鉴定的基因推测为猪囊尾蚴RNA聚合酶亚基基因 ,而且在不同物种间很保守。
骆学农郑亚东窦永喜侯俊琳景志忠才学鹏
关键词：囊尾蚴RNA聚合酶亚基基因噬菌体基因文库
利用随机肽库鉴定猪瘟病毒E2蛋白抗原表位
噬菌体展示技术(phage display technique PDT)由Smith(1985)首先提出,即以噬菌体衣壳蛋白PⅢ或PⅧ为载体,插入一段编码外源短肽的随机基因片段,从而构成一个长度固定、序列随机的短肽集合体...
肖昌余兴龙张茂林徐兴然涂长春张玉静
文献传递
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