山东省自然科学基金(Y2008C116)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- Alzheimer病胰岛素信号传导通路的研究被引量：6
- 2012年
- 目的探讨胰岛素信号传导通路相关蛋白变化在Alzheimer病发生发展中的作用。方法 1)体外原代培养Wistar胎鼠基底前脑胆碱能神经元并鉴定,以不同终浓度的纤维化Aβ1-40分别对原代培养的神经细胞进行干预,荧光显微镜观察细胞形态学变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,提取细胞总蛋白行免疫印迹(Western Blotting)检测神经元胰岛素信号转导通路相关蛋白的表达。2)用微量注射器在痴呆模型组大鼠侧脑室注射Aβ1-42寡聚体5μl,同样的方法于盐水(NS)组大鼠注射生理盐水5μl,正常组大鼠不做任何处理。2周后通过Y-迷宫实验检测大鼠行为学改变并取海马组织进行免疫组化染色。结果 1)以2μmol/L、5μmol/L和10μmol/L三个终浓度纤维化Aβ1-40进行干预的胆碱能神经元,细胞形态学观察及MTT实验均显示神经元活性有下降趋势,且下降程度与纤维化Aβ1-40浓度呈正相关。以μ5mol/L浓度的纤维化Aβ1-40对细胞进行不同时长(24h,48h,72h)干预后,细胞形态学观察及MTT实验均显示神经元活性的下降程度与纤维化Aβ1-40的干预时长呈正相关。2)以2μmol/L、5μmol/L和10μmol/L 3个终浓度纤维化Aβ1-40进行干预的胆碱能神经元,其胰岛素信号传导通路相关蛋白中,InsR(Insulin Receptor)、IRS-1[Insulin Receptor Substrate-IRS-1、Akt/PKB(serine/threonine protein kinase B)]及Bcl-2的表达减低,减低程度与纤维化Aβ1-40干预浓度呈正相关;以5mol/L终浓度的纤维化Aβ1-40对细胞进行不同时长(24h,48h,72h)干预后,InsR、IRS-1、Akt/PKB及Bcl-2表达的减低程度与纤维化Aβ1-40干预时长呈正相关。3)AD模型组大鼠海马区神经元InsR、IRS-1和Akt/PKB比对照组表达减低(P<0.05),差异有统计学意义。结论 Aβ可引起神经元损害和学习记忆功能障碍,其主要机制可能是介导了海马神经元胰岛素信号转导通路功能异常。
- 杜怡峰闫鹏韩晓娟
- 关键词：Β淀粉样蛋白神经元胰岛素信号转导通路
- 阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元胰岛素受体、胰岛素受体底物-I和蛋白激酶B表达的变化
- 2012年
- 目的探索β-淀粉样蛋白（AB）寡聚体对大鼠海马神经元胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物-I（IRS—I）和蛋白激酶B（PKB）表达的影响，以进一步探讨阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）的发病机制。方法按照完全随机化的原则应用随机数字表将实验大鼠分为3组（每组12只），采用立体定位仪下侧脑室注射的方法给模型（AD）组大鼠注射Aβ1-42寡聚体5μl，生理盐水（NS）组大鼠注射NS5μl，正常手术组大鼠只穿刺无注射。1周后重复操作1次，再过1周用Y-迷宫对大鼠行行为学检测以验证造模是否成功，然后通过免疫组织化学染色的方法观察海马组织相关蛋白的表达。结果与两对照组相比，AD组大鼠在Y-迷宫检测中出现学习和记忆障碍，表现为学习获得次数增多和记忆获得次数减少。然而，NS组和正常组大鼠行为学表现无明显差别。此外，AD组大鼠海马区神经元InsR（0．12±0．01）、IRS—I（0．14±0．02）和PKB（0．12±0．03）的表达水平也比两个对照组低（NS组：0．40±0．02、0．39±0．06、0．38±0．03，均数差异为-0．13、-0．13、-0．17；正常手术组：0．38±O．07、0．35±0．03、0．35±0．06，均数差异为-0．15、-0．07、-0．73；均P〈0．05），表现为免疫组织化学染色平均吸光度值降低。结论Aβ。寡聚体引起的大鼠学习记忆功能障碍可能是由AB介导的海马神经元胰岛素信号转导通路发生紊乱，从而使相关蛋白表达降低所导致。
- 韩晓娟杜怡峰盛树力
- 关键词：阿尔茨海默病海马神经元受体胰岛素
