国家自然科学基金(39970859)
- 作品数：2 被引量：91H指数：1
- 相关作者：王小红贾文祥丁宛琼杨春张再容更多>>
- 相关机构：军事医学科学院四川省疾病预防控制中心四川大学更多>>
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- HCV体外复制细胞模型的建立
- 2006年
- 目的建立HCV体外复制细胞模型。方法用含有生长HCV基因的p90/HCVFL-longpU质粒,转化Sure细胞,36℃摇菌18h,提取质粒,以线性化DNA为模板,用T7RNA体外转录系统作体外转录,转录产物RNA作RT-PCR、普通琼脂糖凝胶电泳鉴定。采用lipofectin包裹HCVRNA转染生长良好的HepG2细胞。转染48h后收集细胞,TRIzol提取RNA,分别用正链及负链引物作RT-PCR,确定转染细胞中有无HCV的复制中间体及病毒核酸。作免疫组化确定有无病毒NS3、NS5抗原。结果体外可获得高浓度全长HCV-RNA,但转染未获成功。结论全长HCV-RNA转染细胞模型的建立尚需进一步研究。
- 丁宛琼杨春贾文祥王升启张再容
- 关键词：肝炎病毒丙型转染细胞模型
- 荧光定量PCR技术研究进展被引量：91
- 2001年
- 基于荧光能量传递技术的荧光定量PCR技术可实时监测PCR反应 ,准确敏感地测定模板浓度及检测基因变异等 ,它的出现 ,极大地克服了原有PCR技术存在的不足如交叉污染等问题 ,并改善了PCR技术的应用如可广泛应用于临床观测患者病情发展及预后 ,判断药物疗效等。本文概述了目前几种荧光定量PCR技术即Taqman、Amplisensor、分子信标、Lightcycler及复合探针法的原理及特点。便于更好地理解及应用这项技术。
- 王小红
- 关键词：荧光定量聚合酶链反应分子信标基因诊断
