国家自然科学基金(31071679)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 相关作者：杨之帆邱芳胡旺平汪晓雪刘晓黎更多>>
- 相关机构：湖北大学湖北科技学院武汉科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 褐飞虱若虫中肠凋亡细胞的检测被引量：2
- 2011年
- 为揭示褐飞虱Niloparvata lugens Stl若虫在发育过程中中肠的凋亡细胞,使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP-生物素断端标记法(TUNEL)进行中肠组织切片检测,结果表明,1～5龄若虫中肠分别存在2%～5%的凋亡细胞。利用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸(DAPI)染色法检测表明,存在Ⅰ,Ⅱa和Ⅱb期凋亡的细胞核,其特征包括染色体浓缩、边缘化及细胞核碎裂。透射电子显微镜检测结果表明,早期凋亡的细胞呈现染色质浓缩、边缘化特征,晚期凋亡的细胞出现细胞核碎裂、形成凋亡小体及细胞质空泡化等。本研究揭示了在正常发育过程中褐飞虱若虫中肠有少量的细胞发生了凋亡。通过人工干预的方式调控中肠细胞的凋亡进程有可能使之成为防治该水稻害虫的新靶标。
- 汪晓雪刘晓黎杨之帆
- 关键词：褐飞虱中肠细胞凋亡
- 褐飞虱乙酰胆碱酯酶启动子的克隆及表观遗传分析
- 2020年
- 褐飞虱Nilaparvata lugens是水稻的重要害虫之一.本研究旨在扩增褐飞虱乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)基因的启动子,并从表观遗传学的角度探讨DNA甲基化与褐飞虱生物型进化间的关系.采用染色体步移(genome walking)方法扩增AChE启动子,根据所得启动子序列设计甲基化特异性PCR(MS-PCR)引物和重亚硫酸盐测序法BSP引物,分析褐飞虱生物型Ⅰ和生物型Ⅱ中AChE启动子的甲基化程度,然后利用荧光定量PCR技术检测AChE的表达水平差异.结果表明,扩增得到褐飞虱AChE上游侧翼DNA序列长度为1919 bp,启动子元件分析显示,AChE启动子区域中有若干与MYB、WRKY、ARE等抗性相关转录因子的结合位点(元件),表明该启动子可能与逆境胁迫相关.基于甲基化水平的限制酶酶切位点分析发现,AChE启动子区域含有多个5mCG甲基化位点,表明该区域DNA甲基化主要发生在胞嘧啶的C-5位.MS-PCR分析表明,生物型Ⅰ褐飞虱AChE启动子区域的甲基化程度高于生物型Ⅱ;BSP结果显示生物型Ⅰ启动子区域总体平均甲基化频率(24.09%)高于生物型Ⅱ(7.27%);实时定量PCR结果显示,AChE在生物型Ⅱ中的表达量高于生物型Ⅰ.本研究克隆得到AChE启动子序列,并证实褐飞虱生物型间AChE的表达存在差异,且启动子区域高甲基化水平可能是导致AChE低表达的原因之一.
- 方君杨潇朱利航陈俊杨之帆
- 关键词：褐飞虱DNA甲基化生物型
- 精氨酸加压素对大鼠背根神经节神经元GABA激活电流的增强作用（英文）被引量：2
- 2014年
- 越来越多的研究表明,精氨酸加压素（arginine vasopressin,AVP）在痛觉调制中具有镇痛作用。已报道的研究专注于AVP镇痛的中枢作用机制,而本研究旨在研究AVP镇痛的的外周作用机制。应用全细胞膜片钳技术,在急性分离的大鼠背根神经节（DRG）神经元上,观察AVP对GABA激活电流（IGABA）的增强作用以及AVP对GABAA受体功能的影响。结果显示,AVP（1×10-10~1×10-5 mol/L）预处理后,IGABA增大,GABA剂量效应曲线上移,IGABA的最大值较之对照增加约49.1%;而EC50值几乎不变,表示此种加强为非竞争性的,而且AVP对GABA电流的作用可能是电压非依赖性的。AVP对IGABA的加强作用几乎完全被V1a受体的拮抗剂SR49059（3×10-6 mol/L）阻断。二次钳压技术胞内透析非水解GDP类似物GDP-β-S（5×10-4 mol/L）或PKC抑制剂GF109203X（2×10-6 mol/L）也可以阻断AVP对IGABA的加强作用。以上结果提示,AVP经由G蛋白耦联受体以及PKC信号通路上调DRG神经元GABAA受体的功能,可能是其诱导镇痛作用的基础。
- 邱芳胡旺平杨之帆
- 关键词：精氨酸加压素背根神经节膜片钳技术
