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国家自然科学基金(30672474)

作品数：9 被引量：5H指数：1
相关作者：孙建方刘毅陈浩宋亚丽曾学思更多>>
相关机构：中国医学科学院北京协和医学院山东省立医院黑龙江省医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金江苏省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生

主题

  • 6篇黑素
  • 6篇黑素瘤
  • 5篇细胞
  • 5篇黑色素
  • 5篇黑色素瘤
  • 3篇肿瘤
  • 3篇恶性
  • 3篇恶性黑素瘤
  • 2篇蛋白
  • 2篇遗传学
  • 2篇皮肤
  • 2篇基因
  • 2篇表观
  • 2篇表观遗传
  • 2篇表观遗传学
  • 1篇蛋白质
  • 1篇短发卡RNA
  • 1篇移植瘤
  • 1篇移植瘤模型
  • 1篇胰岛素样

机构

  • 7篇中国医学科学...
  • 2篇山东省立医院
  • 1篇黑龙江省医院
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇大庆龙南医院
  • 1篇深圳市慢性病...

作者

  • 7篇孙建方
  • 5篇陈浩
  • 5篇刘毅
  • 3篇曾学思
  • 3篇宋亚丽
  • 2篇薛燕宁
  • 2篇李小静
  • 2篇程芳
  • 2篇李阿梅
  • 2篇关杨
  • 2篇张磊
  • 1篇陈佳
  • 1篇姜祎群
  • 1篇徐秀莲
  • 1篇顾黎雄
  • 1篇赵亮
  • 1篇周武庆
  • 1篇杨晶
  • 1篇方方
  • 1篇王焱

传媒

  • 6篇中华皮肤科杂...
  • 1篇中国麻风皮肤...
  • 1篇Cellul...
  • 1篇国际皮肤性病...

年份

  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 4篇2008
  • 1篇2007
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
生长抑制因子4对黑素瘤M14细胞增殖的影响被引量：1
2008年
目的构建人生长抑制因子4基因的真核表达质粒，并将其转染入黑素瘤M14细胞，观察生长抑制因子4对M14细胞增殖的影响。方法通过RT—PCR法从人正常胃黏膜组织获得目的基因片段，将其克隆入空载质粒pCDNA3．1，构建真核表达载体pCDNA3．1-ING4，采用PCR及基因测序等方法进行鉴定。将其转染入黑素瘤M14细胞，检测生长抑制因子4的表达情况及对M14细胞增殖的影响。结果PCR所得产物为约750bp的DNA片段，与预测大小相符，DNA序列测定与报道结果一致。蛋白印迹及免疫细胞化学法均显示转染外源生长抑制因子4基因的M14细胞有更高的生长抑制因子4（ING4）表达，细胞活力及生长速度明显低于转染空载质粒的M14细胞和未转染的M14细胞。结论成功构建了重组人生长抑制因子4基因表达质粒pCDNA3．1-ING4，转染的外源生长抑制因子4基因可在细胞内表达并对M14细胞的增殖起抑制作用。
蔡丽敏王艳东杨晶孙建方
关键词：黑色素瘤细胞增殖生长抑制因子4
短发卡RNA对黑素瘤B16F10细胞BAG-1基因表达的抑制作用被引量：1
2008年
目的构建针对小鼠BAG-1（Bcl-2-associated athanogene 1）基因的短发卡RNA（shRNA）真核表达质粒，探讨其对小鼠黑素瘤B16F10细胞BAG-1基因表达的抑制作用。方法以小鼠BAG-1 mRNA编码区作为RNA干扰靶点，构建shRNA真核表达质粒pRNAT—U6．1／Neo—BAG-1，应用lipofectamin^TM2000转染小鼠黑素瘤B16F10细胞，设阴性对照组（转染阴性对照质粒Neg）和空白对照组（未转染），转染后48h开始Gg18筛选。转染1个月后采用RT—PCR、蛋白质印迹检测BAG-1基因的表达。结果酶切及测序结果证实，重组质粒pRNAT—U6．1／Neo—BAG-1构建成功。质粒在B16F10细胞的转染效率为20％-30％。阴性对照组细胞BAG-1基因表达与空白对照组无差异，shRNA质粒处理组细胞BAG-1基因表达较空白对照组显著下降（P〈0．05），表达抑制率在mRNA和蛋白水平分别为77％±4％和62％±2％。结论针对小鼠BAG—1基因的shRNA真核表达质粒pRNAT—U6．I／Neo—BAG-1能高效特异地抑制小鼠黑素瘤B16F10细胞BAG-1基因的表达。
宋亚丽陈浩刘毅陈佳薛燕宁曾学思孙建方
关键词：黑色素瘤RNA小分子干扰基因BAG-1
恶性黑素瘤免疫逃逸机制与对策被引量：1
2008年
恶性黑素瘤治疗困难，免疫治疗是治疗本病的新型策略，治疗性疫苗则是其最为重要的形式。目前黑素瘤治疗性疫苗开发远未成功，究其原因与肿瘤具有多种免疫逃逸机制有关，主要包括两类：①肿瘤低免疫原性、肿瘤相关抗原及MHC Ⅰ类分子表达缺失、免疫隔离等所导致的免疫识别障碍；②抑制性树突状细胞、PD-1等抑制性配体、调节性T细胞、抑制性细胞因子等造成的免疫效应障碍。对其深入研究有利于开发更为合理有效的对策。
刘毅孙建方
关键词：黑色素瘤免疫肿瘤逃逸
Phenotypic and Functional Analysis of LCMV gp33-41-Specific CD8 T Cells Elicited by Multiple Peptide Immunization in Mice Revealed the Up-regulation of PD-1 Expression on Antigen-Specific CD8 T Cells被引量：1
2007年
The phenotype and function of antigen-specific CD8 T cells are closely associated with the efficacy of a therapeutic vaccination. Here we showed that multiple immunizations with LCMV gp33-41 peptide （KAV） in Freund＇s adjuvant could induce KAV-specific CD8 T cells with low expression of CD127 and CD62L molecules. The inhibitory receptor PD-1 was also expressed on a substantial part of KAV-specific CD8 T cells, and its expression level on KAV-specific CD8 T cells in spleen and lymph nodes was much higher when compared to those in peripheral blood. Furthermore, KAV-specific CD8 T cells could specifically kill KAV-pulsed target cells in vivo but the efficiency was low. These data suggest that prime-boost vaccination schedule with peptide in Freund＇s adjuvant can elicit antigen-specific CD8 T cells of effector-like phenotype with partial functional exhaustion, which may only provide short-term protection against the pathogen. Cellular ＆ Molecular Immunology.
Yi LiuLihui XuYiqun JiangJianfang SunXianhui He
关键词：LCMVPD-1
HINT1对人黑素瘤A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤生长及凋亡的影响
2010年
目的 探讨组氨酸三聚体核苷结合蛋白1（HINT1）对人黑素瘤A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤生长及凋亡的影响.方法 三组裸鼠随机皮下接种HINT1-A375、neo-A375及未转染的A375细胞,观察各组移植瘤的生长情况,计算成瘤率.组织病理切片观察移植瘤组织形态学改变,并应用TUNEL法检测移植瘤组织中细胞凋亡情况.结果 三组裸鼠皮下异种移植瘤成瘤率均为100%.HINT1组移植瘤生长速度慢,接种后18 d移植瘤生长速度显著低于neo组及A375细胞组（P＜0.01）.HINT1组、neo组及A375细胞组肿瘤重量分别为（0.04±0.00）g、（0.23±0.00）g、（0.29±0.03）g;肿瘤体积分别为（0.06±0.04）cm^3、（0.34±0.15）cm^3、（0.43±0.19）cm^3.HINT1组肿瘤重量及体积均显著低于neo组及A375细胞组（P值均＜0.01）.组织病理结果显示,与neo组及A375细胞组相比,HINT1组肿瘤团块较小,细胞异形小,病理性核分裂象少见,瘤团内未见大片坏死灶.HINT1组中平均凋亡细胞百分比为12.87%±1.18%,显著高于neo组（3.22%±0.49%）及A375细胞组（3.00%±0.53%）（P值均＜0.01）.结论 高表达HINT1可显著抑制A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤的生长,促进其凋亡,提示HINT1基因可能是人黑素瘤的抑癌基因之一.
关杨徐秀莲刘毅李阿梅姜祎群孙建方
BAG-1蛋白在皮肤恶性黑素瘤皮损中的表达及其与P53、Bcl-2的关系被引量：1
2008年
目的 探讨皮肤恶性黑素瘤组织及黑素瘤细胞株中BAG-1蛋白、P53、Bcl-2的表达及意义。方法 免疫组化法检测32例皮肤恶性黑素瘤、20例色素痣皮损石蜡包埋标本中BAG-1蛋白、P53和Bcl-2的表达情况，并结合患者临床资料进行分析；免疫细胞化学法检测BAG-1蛋白在黑素瘤细胞株M14和B16F10细胞的表达情况。结果BAG-1蛋白在32例皮肤恶性黑素瘤组织中25例阳性，阳性表达率为78％；色素痣组20例中阳性3例，阳性表达率为15％，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．001）。BAG-1蛋白在皮肤恶性黑素瘤组织中的表达与Clark分级呈正相关（r=0．47，P〈0．05），与P53、Bcl-2表达无显著相关性（r值分别为0．05和0．11，P〉0．05）。BAG-1蛋白在黑素瘤细胞株M14、B16F10细胞均呈阳性表达。结论 BAG-1蛋白在皮肤恶性黑素瘤组织中的表达显著升高，并与肿瘤的Clark分级呈正相关。
宋亚丽顾黎雄关杨陈浩李阿梅曾学思孙建方
关键词：黑色素瘤肿瘤抑制蛋白质P53原癌基因蛋白质C-BCL-2BAG-1蛋白
核基质结合区结合蛋白在恶性黑素瘤细胞系的表达
2011年
目的:评价核基质结合区结合蛋白与恶性黑素瘤的相关性。方法:以取材自两个健康供者的原代培养黑素细胞和乳癌细胞系MDA-MB-231作为对照,应用RT-PCR方法,检测部分与肿瘤相关的核基质结合区结合蛋白(SMAR1、Lamin B1、Nucleohn、hnRNP U、SATB1、YBX1、CUX1和Lamin 132)mRNA在恶性黑素瘤细胞系A375、M14和MV3的表达。结果:所有被检测核基质结合区结合蛋白在正常黑素细胞均未见表达;在三个恶性黑素瘤细胞系均有表达的有SMAR1、Lamin B1、Nucleolin、hnRNPU、SATB1和YBX1,以Nucleolin、hnRNP U和SATB1的表达水平与正常黑素细胞的差异较大。乳癌细胞系MDA-MB-231与黑素瘤细胞表达谱相似。结论:Nucleohn、hnRNP U和SATB1等MARBP可能参与了黑素瘤的发生与发展。
张磊程芳李小静陈浩孙建方刘毅
关键词：恶性黑素瘤表观遗传学
5-氮-2＇-脱氧胞苷对黑素瘤细胞IGFBP7表达及细胞增殖的影响
2010年
目的 探讨去甲基化药物5-氮-2＇-脱氧胞苷对体外培养黑素瘤细胞系A375和M14细胞胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）的表达及细胞增殖的影响.方法 体外培养黑素瘤A375和M14细胞,采用RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测10μmol/L 5-氮-2＇-脱氧胞苷处理前后A375和M14细胞中IGFBP7mRNA和蛋白的表达,噻唑蓝法检测不同浓度5-氮-2＇-脱氧胞苷对A375和M14细胞的生长抑制作用.结果 10μmol/L 5-氮-2＇-脱氧胞苷处理A375和M14细胞48h后,IGFBP7 mRNA和蛋白水平的表达均得到恢复.不同浓度的5-氮-2＇-脱氧胞苷分别作用24、48、72、96和120h后,呈时间（F=141.35,P〈0.01;F=549.33,P〈0.01）和剂量（F=561.12,P〈0.01;F=271.43,P〈0.01）依赖性抑制A375和M14细胞增殖.结论 DNA甲基化参与调控IGFBP7基因的表达,5-氮-2＇-脱氧胞苷具有抑制黑素瘤细胞增殖的作用.
薛燕宁陈浩周武庆宋亚丽曾学思孙建方
关键词：黑色素瘤
核基质附着区结合蛋白与皮肤鳞状细胞癌的相关性研究
2011年
目的探讨核基质附着区结合蛋白（MARBP）与皮肤鳞状细胞癌（SCC）的相关性，筛选相关性较高的MARBP。方法以取材自2例SCC患者正常皮肤组织和HaCaT细胞作为对照，应用RT—PCR方法，检测部分已知与肿瘤相关的MARBP（CUX1、LaminB1、Nucleolin、hnRNPU、SAFB2、SATB1、YBX1）mRNA在12例SCC肿瘤组织和瘤旁组织、人皮肤鳞状细胞癌细胞系Colo-16细胞、人表皮癌A431细胞的表达水平。结果所有被检测的MARBPmRNA在2例正常皮肤组织均未见明显表达，在12例SCC肿瘤组织和瘤旁组织、Colo-16、A431细胞系中均有不同程度和不同比例的表达，在HaCaT细胞系中，除SATB1外，其余MARBPmRNA均有表达。SCC肿瘤组织和瘤旁组织MARBPmRNA表达水平的比较显示CUX1、Nucleolin和YBX1差异有统计学意义；LaminB1、hnRNPU、SAFB2和SATB1差异无统计学意义。结论CUXl、Nucleolin和YBX1等MARBPrnRNA可能参与SCC的发生、发展；
张磊刘毅陈浩程芳李小静方方赵亮王焱孙建方
关键词：鳞状细胞表观遗传学
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