国家科技部农业科技成果转化资金(02EFN213201078)
- 作品数:2 被引量:6H指数:1
- 相关作者:金乔刘秀梵卢军彭大新胡传伟更多>>
- 相关机构:扬州大学中华人民共和国农业部上海市动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 表达鸡马立克氏病病毒糖蛋白B基因重组鸡痘病毒毒种的纯净性检验及冻干疫苗的保存期测定被引量:1
- 2010年
- 为了检测高效表达鸡马立克氏病病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的纯净性,对纯化后的0代重组病毒毒种进行了细菌和支原体检验;并对中间试制的冻干疫苗在-20℃保存期进行了测定。结果表明,重组病毒毒种高度纯净,没有污染任何细菌或支原体,符合新制品制造和检验规程申报的要求;中试冻干疫苗在-20℃保存了12个月,病毒含量始终大于109PFU/mL,疫苗保存期可达12个月。
- 卢军胡传伟金乔刘武杰彭大新刘秀梵
- 关键词:鸡马立克氏病GB基因重组鸡痘病毒
- 表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生物安全性评价被引量:5
- 2007年
- 为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色;间接免疫荧光实验证明rFPV-gB/R中的gB基因始终能稳定表达;序列测定结果表明,重组病毒在细胞上连续传30代、在SPF鸡上连续传5代后,gB基因序列没有发生任何变化;以0、10、20、30代重组病毒制成冻干疫苗进行的实验室免疫效力实验表明,细胞连续传代后rFPV-gB/R仍然保持了原有的免疫原性。可见重组鸡痘病毒gB基因的结构和免疫原性都是高度稳定的。为了评价rFPV-gB/R的生物安全性,我们将rFPV-gB/R通过SPF鸡连续传5代,检测病毒在鸡体的存在部位及其消长、生长繁殖性能和毒力变化;将rFPV-gB/R免疫鸡与未免疫鸡同笼饲养,攻击FPV-102E6强毒,以检测rFPV-gB/R感染鸡的接触传染性。结果显示,rFPV-gB/R在鸡体的存在时间大约为7d,在体内仅存在于接种部位;鸡体传代后痘病毒毒力有一定程度下降,gB基因核苷酸序列未发生任何变化;同居未免疫SPF鸡在痘病毒强毒攻击后全部发痘,可见重组病毒免疫鸡没有接触传染性,能在鸡体内稳定地传代,rFPV-gB/R具有高度的生物安全性。
- 卢军胡传伟金乔彭大新刘文博高崧张如宽刘秀梵
- 关键词:鸡马立克氏病重组鸡痘病毒GB基因生物安全性