江苏省高校自然科学研究项目(11KJB550002)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：施荣华张虹都立辉刘琴鞠兴荣更多>>
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- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- His-N2蛋白体外排除抑制大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液蛋白的研究被引量：2
- 2014年
- 以植物乳杆菌KLDS1.0320候选表面黏附蛋白NP_785232 N端前两个结构域组成的融合表达蛋白为研究对象,采用体外模拟肠道环境的方法研究其对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的排除抑制作用。对猪肠黏液进行固定,加入His-N2融合表达蛋白37℃孵育1h,再加入大肠杆菌DH5α菌悬液37℃孵育1h,洗去未黏附的菌体,之后用1%Triton?X-100进行裂解,将裂解液涂布LB琼脂平板以进行菌落计数。结果表明:pH值为6.6时,相对于缓冲液阴性对照组,His-N2蛋白对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的抑制率为(50.37±3.66)%,相对于BSA蛋白对照组的抑制率为(38.33±4.55)%;pH值为7.5时,相对于缓冲液阴性对照组,His-N2蛋白对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的抑制率为(42.18±3.44)%,相对于BSA蛋白对照组的抑制率为(34.48±3.90)%。在体外模拟条件下,由植物乳杆菌KLDS1.0320的候选表面黏附蛋白NP_785232 N端前两个结构域组成的His-N2蛋白能排除抑制大肠杆菌DH5α对猪肠黏液蛋白的黏附。
- 都立辉张虹施荣华和肖营刘琴
- 关键词：植物乳杆菌
- 植物乳杆菌NP_785232蛋白N端两个特定结构域在大肠杆菌中的诱导表达
- 2014年
- 以植物乳杆菌KLDS1.0320的候选表面黏附蛋白NP_785232为研究对象,采用外源重组表达的方法大量制备其前两个结构域。应用聚合酶链式反应方法克隆NP_785232蛋白N端的前两个结构域,将克隆获得的片段连入表达载体pET30a中构建重组质粒pET30a/N2,该重组质粒转化大肠杆菌后,用终浓度为1 mmol/L的异丙基硫代半乳糖苷诱导重组菌,重组蛋白经HisTrap柱纯化后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对电泳获得的目的大小的片段进行质谱鉴定。结果表明:获得的重组蛋白与NP_785232蛋白N端的前两个结构域完全相同。通过大肠杆菌表达系统可以有效表达植物乳杆菌KLDS1.0320的候选表面黏附蛋白NP_785232 N端的前两个结构域。
- 张虹都立辉施荣华刘琴
- 关键词：植物乳杆菌聚合酶链式反应
- 肠球菌素的分离提取及其在牛乳杀菌中的应用被引量：6
- 2014年
- 从发酵奶酪制品中分离出1株耐久肠球菌(Enterococcus durans)41D,其培养过程中产生能抑制李斯特菌生长的肠球菌素。本实验通过pH值吸附法将该肠球菌素分离提纯,产率约为45.7%。并进一步研究发现,当在牛乳中添加终浓度为256 AU/mL的肠球菌素时,不同的处理方式(高温杀菌,巴氏杀菌)不影响实验期间(15 d)肠球菌素抑菌活性的发挥。该肠球菌素在牛乳中应用时能够有效抑制单增李斯特菌的生长并对牛乳有较好的保存效果。
- 都立辉施荣华张虹鞠兴荣
- 关键词：提纯
