您的位置： 专家智库 > >

广州市医药卫生科技项目(20121A021002)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：刘紫娟雷秀霞王维周小棉梁广铁更多>>
相关机构：广州市第一人民医院更多>>
发文基金：中西医结合科研计划课题广州市医药卫生科技项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇正交
  • 1篇正交试验
  • 1篇毛细管
  • 1篇酶链反应
  • 1篇聚合酶
  • 1篇聚合酶链反应
  • 1篇合酶
  • 1篇DNA提取

机构

  • 1篇广州市第一人...

作者

  • 1篇刘大渔
  • 1篇梁广铁
  • 1篇周小棉
  • 1篇王维
  • 1篇雷秀霞
  • 1篇刘紫娟

传媒

  • 1篇中华生物医学...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
全选 清除 导出
排序方式：
正交试验优化实现毛细管中的快速高效DNA提取
2012年
目的利用正交试验优化毛细管DNA提取的实验条件，并对优化后的毛细管DNA提取法进行考察。方法结合液滴与磁珠控制方法，在聚四氟乙烯毛细管中依次完成进样、DNA结合、洗涤以及洗脱等过程，建立毛细管DNA提取法。对照方法采用传统煮沸裂解法。采用正交试验考察血液乙型肝炎病毒（HBVDNA）提取的实验条件，包括结合时间、洗脱时间与洗脱温度等对DNA提取效果的影响。考察毛细管DNA提取法的DNA提取效果与重现性，分析提取的DNA定量（Ct值）与原始样品浓度的相关性。比较毛细管DNA提取法与对照方法提取DNA定量结果及耗时。结果正交试验提示毛细管DNA提取法的最佳实验条件为磁珠DNA结合时间5min，洗脱温度60℃，洗脱时间1min。荧光定量PCR显示，毛细管DNA提取法DNA提取效果较好，回收DNA定量具有良好的重现性，提取的DNA定量与原始样品浓度呈正相关（r=0．9999，P〈0．01）。配对t检验显示，毛细管DNA提取法的回收DNA定量显著高于对照方法（t=-4．263，P〈0．001）。采用优化的实验条件，整个毛细管DNA提取操作在23min内完成，而对照方法耗时45min以上。结论利用正交试验实现了毛细管DNA提取实验参数的优化，建立了一种快速、高效的DNA提取方法。
雷秀霞梁广铁王维刘紫娟刘大渔周小棉
关键词：聚合酶链反应正交试验毛细管DNA提取
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0