国家自然科学基金(39970932)
- 作品数：10 被引量：124H指数：5
- 相关作者：陈晓理王伯瑶张正闫兆平冯新富更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院四川大学贵州省人民医院更多>>
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- 头孢他定与FALL-39用于脓毒血症的疗效被引量：1
- 2006年
- 目的观察FALL-39和头孢他定（CFZ）治疗脓毒血症的疗效。方法从pGEX-1λT-FALL-39转染的E.coli JM109中提纯FALL-39，检测FALL-39对绿脓杆菌（PAG）的杀菌活性。采用更生霉素（AMD）增强BALB／c小鼠对PAG感染的敏感性，建立脓毒血症模型，观察FALL-39和CFZ治疗脓毒血症的疗效。结果FALL-39分子量约5kDa，纯化量约600-650μg，对PAG的最低抑菌浓度（MIC）、最低有效浓度（MEC）、最低杀菌浓度（MBC）分别为25、100、50μg／ml。盐水组、脓毒血症组、CFZ治疗组、FALL-39治疗组和CFZ＋FALL-39治疗组小鼠死亡率分别为0％、75％、62．5％、37．5％和12．5％。结论FALL-39治疗脓毒血症比CFZ更为有效，两者联用效果则更佳。
- 冯新富石承先陈晓理李俊华王伯瑶
- 关键词：头孢他定FALL-39脓毒血症
- 小鼠小肠抗生素肽的初步分离被引量：1
- 2010年
- 目的初步分离小鼠小肠抗生素肽。方法将12只健康ICR小鼠剖腹切取从屈氏韧带到回盲部的小肠,以10%乙酸溶液冲洗肠腔收集灌洗液,并以30%乙酸溶液制备小肠组织匀浆,反复离心,聚乙二醇浓缩后透析,冰冻干燥,进行AU-PAGE、Tricine-SDS-PAGE、考马斯亮蓝R-250染色或银染显示多肽条带,然后进行凝胶成像分析和杀菌试验。结果小鼠小肠组织匀浆和灌洗液中均含有可杀灭细菌、真菌的抗生素多肽,其中组织匀浆中所含的此类多肽较多;小鼠小肠抗生素肽的杀菌作用具有剂量依赖关系,且对不同细菌、真菌的杀灭作用也不同;小鼠小肠抗生素肽的分子量主要集中于3.0kD～14.3kD和29.0kD。结论小鼠小肠含有多种抗生素肽,具有广谱的杀灭微生物的作用。
- 闫兆平陈晓理张正黄宁王伯瑶
- 关键词：肠道屏障小鼠
- 大黄与小鼠小肠抗生素肽表达变化的相关性研究被引量：8
- 2011年
- 目的通过观察大黄对正常小鼠小肠抗生素肽(antimicrobial peptide,AP)的作用,研究大黄与小肠AP之间的相关性。方法将30只健康ICR小鼠随机分为实验组和对照组,每组15只,分别给予10%大黄煎剂及等量的生理盐水灌胃。24h后处死小鼠,剖腹切取从屈氏韧带到回盲部的小肠。以10%乙酸溶液冲洗肠腔收集灌洗液,并以30%乙酸溶液制备小肠组织匀浆。称取等量的乙酸溶解物分别进行12·5%酸性尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(AU-PAGE)、Tricine-十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-16·5% SDS-PAGE),考马斯亮蓝R-250或氨银染色显示多肽条带,然后进行凝胶成像分析和电泳凝胶琼脂糖弥散法杀菌实验(gel overlay assay)。比较两组标本的杀菌活性、小肠AP表达的变化,测定小肠AP的分子量。结果大黄灌胃后,小鼠小肠匀浆的AP含量变化不明显,但是AP分子量不同;而小肠灌洗液中AP含量增加明显,分子量介于14·3～18·4kDa;但是其杀菌能力与对照组比较差异无统计学意义(P>0·05)。结论大黄可增加小肠部分AP表达,这可能是大黄保护、增强肠道屏障的作用机制之一。
- 闫兆平陈晓理张正黄兴兰黄宁王伯瑶
- 关键词：肠道屏障
- 大黄对小鼠肠道免疫分泌物的影响被引量：17
- 2005年
- 目的:观察大黄治疗组和正常组小鼠肠道免疫分泌物的变化;探讨大黄对肠道黏膜屏障保护作用的机制。方法:实验用BALB/c小鼠。分成生理盐水灌胃组和10%大黄煎剂灌胃组。24h后处死动物,灌洗肠道,收集灌洗液,分别测定IgA、总蛋白、补体C3、高密度脂蛋白(HDL)、Ⅱ型磷脂酶A2(PLA2)活力和溶菌酶的含量;同时切取并收集各小鼠小肠组织40mg,运用RT-PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳成像检测隐窝素-1基因和隐窝素-4基因扩增片段含量。结果:2组小肠灌洗液中IgA,总蛋白,补体C3,溶菌酶含量以及Ⅱ型PLA2活力有统计学差别(P<0.05)。2组小肠灌洗液中HDL含量无统计学差别(P>0.05)。2组小肠组织匀浆中隐窝素-1(Cr1)基因扩增片段含量与隐窝素-4(Cr4)基因扩增片段含量无统计学差别(P>0.05)。结论:大黄能促进肠黏膜上皮分泌多种免疫相关物质,对于减轻创伤、烧伤、休克等严重应激反应时的肠黏膜损伤,防止肠道菌群移位和全身炎症反应综合征的发生具有重要的理论和临床意义。
- 胥楠陈晓理芦灵军次仁桑珠
- 关键词：肠道免疫功能肠道黏膜屏障
- 大黄与肠道屏障被引量：47
- 2001年
- 阎兆平陈晓理张正
- 关键词：肠道蠕动中药
- LL-37抗菌肽提纯及其治疗革兰阴性细菌感染的研究
- 2006年
- 目的:提纯抗菌肽LL-37并探讨其治疗小鼠革兰阴性(G-)细菌感染的疗效。方法:用蛋白质纯化技术从pGEX-1λT-LL-37重组质粒转染的大肠杆菌JM109中提纯LL-37肽,检测LL-37对G-细菌(铜绿假单胞菌)的杀菌活性。随机将BALB/C小鼠分配入盐水组(n=8)、内毒素组(n=8)、LL-37结合内毒素组(n=8),以观察LL-37结合内毒素的能力;随机将BALB/C小鼠分配入盐水组(n=8)、G-细菌感染组(n=8)、LL-37治疗组(n=8),以观察LL-37治疗BALB/C小鼠G-细菌感染的疗效。结果:融合蛋白和LL-37分子质量分别为30ku和5ku;LL-37对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小有效浓度(MEC)、最小杀菌浓度(MBC)分别为25、100、50mg/L;内毒素组、LL-37结合内毒素组48h死亡率为100%、12.5%;G-细菌感染组、LL-37治疗组48h死亡率为75%、37.5%。结论:LL-37具备杀菌、抗内毒素毒性能力,可用于治疗革兰阴性细菌感染。
- 冯新富李俊华陈晓理石承先王伯瑶
- 关键词：革兰阴性菌大肠杆菌微生物敏感性试验
- LL-37抗菌肽重组及其治疗实验性内毒素血症的研究被引量：3
- 2005年
- 目的重组抗菌肽LL-37并探讨其治疗内毒素血症的疗效。方法提取人肺腺上皮SPC-A-1细胞总RNA,RT-PCR扩增出LL-37肽cDNA,构建pGEX-1λT-LL-37重组质粒并转染大肠杆菌JM 109,培养转染细菌并诱导表达融合蛋白,裂解细菌,亲和层析出融合蛋白,裂解融合蛋白生成LL-37肽,高压液相色谱法提纯LL-37;建立BALB/C小鼠内毒素血症模型并观察LL-37的疗效。结果重组肽核苷序列5′-端比天然序列多4个密码子,N-端多4个氨基酸残基。小、大剂量LL-37治疗组(Ⅰ组、Ⅱ组)及内毒素血症组(Ⅲ组)6h存活率分别为62.5%、87.5%、0;Ⅰ、Ⅱ组平均存活时间和最长存活时间均长于Ⅲ组;Ⅰ、Ⅱ组24h后小鼠存活率有差异,量效关系明显。结论重组抗菌肽LL-37可用于内毒素血症的治疗。
- 冯新富黄玉兰张忠民石承先陈晓理王伯瑶
- 关键词：内毒素血症
- 实验性胰腺炎小鼠小肠隐凹素-4mRNA表达变化的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 检测实验性胰腺炎时小鼠小肠隐凹素 - 4 m RNA表达的变化 ,从分子水平上探讨胰腺炎时肠粘膜屏障受损的机制。方法 36只 ICR小鼠随机分成 6组 ,每组 6只。实验组 (A～ E组 )腹腔注射雨蛙素 ,5 0μg/(kg· h) ,共 7次 ,于首次注射后第 9、18、2 4、4 8和 72 h处死 ;对照组 (F组 )注射相应体积的生理盐水 ,于第 18h处死。取血送淀粉酶检查 ,胰腺送病理检查。用 U VI软件分析 PCR产物凝胶图像以检测各组隐凹素 - 4 m RNA的表达变化。结果 大剂量雨蛙素腹腔注射导致了 ICR小鼠急性坏死性胰腺炎 ,胰腺病理损害以首次注射后第 18h最明显。第 9h隐凹素 - 4 m RNA表达轻微下调 ,18h下调最明显 (P<0 .0 5 ) ,2 4 h后逐渐升高 ,72 h接近正常水平。结论隐凹素 - 4的获得性缺陷可能是胰腺炎时发生肠道细菌移位的重要原因之一。
- 李全生张肇达陈晓理王伯瑶周总光严律南蒋俊明
- 关键词：胰腺炎MRNA表达
- 雨蛙素腹腔注射法建立小鼠急性坏死性胰腺炎模型的实验研究被引量：17
- 2004年
- 目的 建立一种稳定的急性坏死性胰腺炎模型。方法 36只雄性ICR小鼠用查随机数字表的方法随机分为对照组 (n =6 )和实验组 (n =30 )。实验组予以雨蛙素腹腔注射 ( 5 0 μg/kg) ,每小时注射 1次 ,共 7次 ,并分别于首次注射后 9h、18h、2 4h、4 8h和 72h各处死 6只 ;对照组予以腹腔注射等量的生理盐水 ,于注射后 18h处死。比较两组动物的血淀粉酶值、胰腺重量及胰腺组织学评分分值。结果 腹腔注射雨蛙素后 9h ,小鼠血淀粉酶值升高 ,胰腺重量增加 ,18h达峰值 ,2 4h后逐渐下降。二者与胰腺病理损害程度相一致。 18h胰腺间质炎性细胞浸润和腺泡细胞坏死明显 ,胰腺组织学评分值达到最大值 (P<0 .0 5 )。结论 大剂量雨蛙素腹腔注射能诱导ICR小鼠产生急性坏死性胰腺炎。该模型制备方法简单 ,无创伤性 ,模型稳定 。
- 李全生陈晓理周总光刘续宝张肇达
- 关键词：雨蛙素腹腔注射小鼠急性坏死性胰腺炎
- 大黄对小鼠肠粘膜屏障保护作用的机理探讨被引量：33
- 2005年
- 目的 研究大黄对小鼠小肠 型磷脂酶 A2 ( 型 PL A2 )、溶菌酶分泌的影响。方法 4 0只健康 ICR小鼠随机分为实验组及对照组。分别给予大黄汤剂、生理盐水灌胃 ,每 8h一次 ,每次 0 .3ml。 2 4 h后处死小鼠 ,切取小肠。用 10 0 g/ L 乙酸溶液冲洗肠腔、收集灌洗液及制备小肠组织匀浆。分别测定灌洗液和组织匀浆中 型PL A2 活力、溶菌酶含量。结果 小肠灌洗液中的 型 PL A2 活力和溶菌酶含量实验组比对对照组明显高 (P<0 .0 1) ;小肠匀浆中的 型 PL A2 活力、溶菌酶含量实验组比对照组明显低 (P<0 .0 1)。结论 大黄能刺激小鼠小肠肠壁分泌 型 PL A2 、溶菌酶 ,使肠腔内的 型 PL A2 、溶菌酶含量增加 ,增强肠粘膜屏障。
- 李玉陈晓理张正黄兴兰闫兆平
- 关键词：溶菌酶小鼠肠粘膜屏障
