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国家重点基础研究发展计划(2013CB127803): 作品数：25 被引量：166H指数：7; 相关作者：马良张宇昊江涛吴春生苏敏更多>>; 相关机构：西南大学中国农业科学院农产品加工研究所中华人民共和国农业部更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>; 相关领域：轻工技术与工程农业科学理学医药卫生更多>>

磁纳材料表面可修饰性在食品污染物快速分析中的应用被引量：3: 2016年; 磁性纳米材料具有纳米材料比表面积大、尺寸小、偶联容量高、表面可修饰等特性以及独特的磁学性质,通过表面包裹、修饰无机纳米材料、有机小分子和有机高分子等降低粒子表面能获得具有可分散性或功能化的磁性纳米粒子,调节磁性纳米粒子的生物相容性和反应特性,可广泛应用于食品污染物快速分析中的样品前处理,如分离提纯、富集萃取以及检测过程中的信号放大、提高选择性及灵敏度等。基于磁性纳米材料的各种固相萃取方法以及新型传感器的研究发展迅速,文中综述了磁性纳米材料的表面可修饰性在食品安全检测方面的研究现状和应用情况,并展望了该领域发展趋势。; 苏敏马良张宇昊钟红王佳曼; 关键词：磁性纳米材料传感器

人工接种温州蜜柑后链格孢霉毒素的产生及分布规律被引量：12: 2017年; 采用超高效液相色谱-串联质谱法结合Qu ECh ERS(quick,easy,cheap,effective,rugged,safe)前处理方法,研究温州蜜柑人工接种链格孢菌(Alternaria alternate)后,病斑部位全果、非病斑部位果皮和果肉中腾毒素(tentoxin,Ten)、链格孢酚(alternariol,AOH)、交链格孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether,AME)、交链孢烯(altenuene,ALT)和细交链格孢菌酮酸(tenuazonic acid,Te A)5种链格孢霉毒素的产生和分布规律。结果表明,病斑部位全果、非病斑部位果皮和果肉中的链格孢霉毒素含量随着病斑直径的扩大,不同链格孢霉毒素的变化趋势不同。Te A、Ten、AME和AOH在所有部位中均有检出,其中Te A检出含量最高,在病斑部位的含量范围为3.05×10~3~55.88×10~3μg/kg,在非病斑部位的含量范围为65.35~40.68×10~3μg/kg;Ten、AME和AOH在病斑部位的含量范围分别为69.16~373.94、22.63~1 395.82μg/kg和8.18~689.19μg/kg;非病斑部位的含量范围分别为0~67.56、0~195.96μg/kg和0~301.91μg/kg;ALT在非病斑部位果肉中未检出,但在非病斑部位的果皮和病斑部位的全果中均有检出,含量最高达16.61μg/kg。研究表明,由于柑橘感染链格孢菌后产生的毒素会从发病部位扩散到健康部位累积,因此,在鲜食加工和风险评估中应引起关注和重视。; 蒋黎艳龚蕾盖智星刘雁雨马良赵其阳王成秋焦必宁; 关键词：温州蜜柑超高效液相色谱-串联质谱

小麦及其制品加工过程主要真菌毒素含量的变化被引量：12: 2014年; 脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮是小麦感染赤霉病后产生较多的两种真菌毒素,综述了这两种真菌毒素的产生条件、理化特性、毒理效应、形成的危害和分布范围,以及在小麦清理、研磨以及烘焙和蒸煮等加工过程中含量的变化情况,以期对小麦及其制品生产过程中毒素含量的变化情况做出进一步探究。; 李娜孙辉唐朝晖段晓亮方秀利; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇玉米赤霉烯酮

柑橘果实中主要的真菌毒素及其检测技术被引量：12: 2013年; 柑橘果实在生长、采收、贮运、销售等过程中易受到青霉菌、链格孢霉菌等病原微生物的污染,产生并积累各种真菌毒素,继而影响产品质量与安全。本文阐述了污染柑橘果实的主要真菌毒素及其污染分布,结合检测技术的研究情况,分析了柑橘属果实真菌毒素的研究方向,对柑橘果实及其产品的质量安全与产业发展具有重要意义。; 胡媛媛马良张宇昊; 关键词：柑橘真菌毒素

大丽轮枝菌分泌蛋白提取方法比较被引量：3: 2014年; 【目的】采用超滤法(UF)、三氯乙酸沉淀法(TCA)、离子交换富集法(IEX)分别从大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)高致病性菌株VdG1培养上清液中提取分泌蛋白,对提取样品进行质谱鉴定。寻找适合大丽轮枝菌分泌蛋白的提取方法,为大丽轮枝菌分泌蛋白组深入研究奠定基础。挖掘大丽轮枝菌分泌蛋白中潜在的致病相关蛋白,为其深入功能验证及致病机理研究提供平台。【方法】3种方法提取大丽轮枝菌VdG1分泌蛋白,shot-gun方法进行质谱鉴定。利用生物信息学软件WoLFPSORT、SignalP、TMHMM、PHOBIUS对其中经典分泌蛋白进行预测。通过CAZy和PHI数据库进行经典分泌蛋白中碳水化合物水解酶(CAZy)和病原菌寄主互作因子(PHI)注释,BLASTp软件进行RxLx、LysM、Cys Pattern等模体蛋白比对分析。提取的蛋白样品接种感病棉种(军棉1号)进行样品生物学活性及致病性检测。【结果】TCA法、IEX法和UF法制备大丽轮枝菌分泌蛋白,其提取效率分别为1.18、0.96和0.56 mg·L-1。SDS-PAGE电泳检测显示UF法提取的蛋白样品条带少而模糊。而TCA法和IEX法提取的蛋白样品条带较多,样品的纯度也较高;经生物信息学软件预测分析,提取的蛋白样品中含有经典分泌蛋白分别为124、112和75个;质谱鉴定的分泌蛋白中含有潜在致病因子分别为98、85和57个;另外,IEX法制备大丽轮枝菌分泌蛋白效果较好,具有小分子偏好性,且能够保持样品的生物学活性,该蛋白样品接种棉花叶片能够引起萎蔫、坏死的症状。【结论】3种方法提取大丽轮枝菌分泌蛋白,UF法提取效率最低,纯度最差,蛋白数量最少,蛋白样品中含有潜在的毒素蛋白数量也最少,而且对于大体积处理相当耗时。TCA法和IEX法都适合大丽轮枝菌分泌蛋白的制备,但是TCA法制备过程中不能保持样品的生物学活性,后续适合于2-D电泳检测等试验。IEX法首次应用于病原菌分泌蛋白�; 肖红利桂月晶祁伟彦陈捷胤李蕾徐明戴小枫; 关键词：大丽轮枝菌分泌蛋白 LC-MS/MS

细交链孢菌酮酸人工抗原的制备被引量：3: 2014年; 对链格孢霉菌毒素中危害最大的细交链孢菌酮酸进行设计和修饰,系统研究载体、蛋白和偶联方法与条件,结合人工抗原纯化、鉴定的结果,分析影响免疫原合成的各种因素,确定碳二亚胺法偶联细交链孢菌酮酸与牛血清白蛋白可获得偶联比为9.7:1的人工抗原,能够满足动物免疫需求。; 江涛胡媛媛马良张宇昊吴春生; 关键词：人工抗原

链格孢霉毒素细交链格孢菌酮酸人工抗原的合成及其多克隆抗体制备被引量：1: 2016年; 本研究采用肟化法用羧甲基羟胺半盐酸盐对链格孢霉毒素细交链格孢菌酮酸（Tenuaconic acid,TA）进行衍生后引入连接臂,得到了半抗原TAO。通过活性酯法将半抗原TAO分别与牛血清蛋白（Bovine serum albumin,BSA）偶联制备得到免疫原TAO-BSA、与血蓝蛋白（Keyhole Limpet Hemocyanin,KLH）偶联制备得到包被原TAO-KLH。经透析纯化后分别采用紫外光谱、红外光谱扫描法对合成的人工抗原进行初步鉴定,制备得到的人工抗原的偶联比分别为18.3：1、38.7：1。此人工抗原免疫Balb/c小鼠后获得的鼠源抗血清进一步验证了人工抗原合成成功,制备得到特异性识别TA的多克隆抗体。通过ELISA棋盘法确定了最佳包被原浓度以及最佳抗体稀释度并建立了TA间接竞争ELISA检测方法,其灵敏度以半抑制浓度IC50表示为335.55 ng/m L,最低检出限（LOD）为19.00 ng/m L,定量线性检测范围为200.00~1563.00 ng/m L。; 马良张宇昊吴春生苏敏钟红; 关键词：人工抗原多克隆抗体 ELISA

Development and validation of simple sequence repeat markers from Arachis hypogaea transcript sequences: 2018年; Simple sequence repeats(SSRs) are important molecular markers for assessing genetic diversity in Arachis hypogaea L. and many other crops and constructing genetic linkage maps for important agricultural traits. In this study, 29,357 potential SSRs were identified in 22,806 unigenes assembled from A. hypogaea transcript sequences. Of these unigenes, 1883 and 4103 were annotated and assigned in Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes Orthology and Eukaryotic Orthologous Groups databases, respectively. Among the SSR motifs, mono-(19,065; 64.94%) and trinucleotide(5033; 17.14%) repeats were the most common, and the three most dominant motifs were A/T(18,358; 62.54%), AG/CT(2804;9.55%), and AAG/CTT(1396; 4.76%). Polymerase chain reaction(PCR) primer pairs were designed for 4340 novel SSR markers and 210 new SSRs were validated using 24 A. hypogaea varieties. Of the 210, 191(91%) yielded PCR products, with 37(18%) identifying polymorphisms. The 37 polymorphic SSR markers detected 146 alleles(2–10 alleles per locus), and the average polymorphic information content was 0.403(with a range of 0.077 to0.819). The new SSRs enrich the current marker resources for A. hypogaea and may also be useful for genetic diversity analysis, functional genomics research, and molecular breeding.; Houmiao WangYong LeiLiying YanLiyun WanYan CaiZefeng YangJianwei LvXiaojie ZhangChenwu XuBoshou Liao; 关键词：ARACHIS HYPOGAEA MARKER

光谱法研究黄曲霉毒素B_1与人血清白蛋白的结合反应被引量：14: 2016年; 黄曲霉毒素B1（AFB1）是目前发现的致癌能力最强的真菌毒素,严重危害人畜健康。人血清白蛋白（Human serum albumin,HSA）在结合、运输内源性和外源性等小分子物质方面具有重要的生理功能。研究AFB1与HSA的相互作用机理和作用过程,在分子毒理学上具有重要意义。本研究模拟在人体血液pH条件（pH 7.4,离子强度0.1 mol/L）,通过荧光淬灭、3D荧光法和圆二色谱（Circular dichroism,CD）等光谱方法研究AFB1与人血清蛋白的相互作用。结果表明,AFB1与HSA的内源荧光淬灭属于静态淬灭,AFB1-HSA在298,303,308和313 K4个温度条件下,结合常数均为10-4数量级,结合位点都约为1。根据Van＇t Hoff方程AFB1-HSA体系是熵增焓减的自发过程,分子间主要作用力为疏水作用和氢键。基于Forster＇s能量转移,得知AFB1与HSA结合距离为3.31 nm。竞争结合实验表明,AFB1结合在HSA的siteI位点上,靠近色氨酸Trp-214。通过3D荧光分析,AFB1的结合作用导致了HSA氨基酸残基微环境和二级构象发生变化。圆二色谱的分析结果表明,二者的结合使得HSA的α-螺旋含量增加。; 江涛马良张宇昊王佳曼; 关键词：黄曲霉毒素B1 人血清白蛋白光谱法

三元超分子荧光增敏快速检测黄曲霉毒素M_1被引量：4: 2016年; 根据黄曲霉毒素M_1(aflatoxin M_1,AFM_1)的荧光特性,研究β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)及其衍生物(β-CDs)、金属盐(Hg^(2+))与AFM1形成的三元超分子体系及对AFM1荧光增强作用,并探索超分子包合物形成的机理。甲基-β-CD-Hg^(2+)-AFM_1三元体系中,当溶剂组成为体积分数20%甲醇溶液,Hg^(2+)、M-β-CD与AFM_1物质的量比分别为6.6×10~4∶1、5.80×10~5∶1时,荧光增强倍数可达到4.5倍。光谱法、热力学方法表明AFM1能进入M-β-CD空腔,从而减少荧光淬灭,增强荧光检测的灵敏度。利用Benesi-Hildebrand双倒数法和Van’t Hoff热力学方程研究超分子体系的包合常数与热力学常数,初步探讨超分子反应机理。该荧光增敏技术检测AFM_1,在0.01~2.00μg/L范围内分析线性良好,相关系数R^2为0.999 2,检出限为0.0026μg/L。这种衍生方法具有灵敏、简单、高效、经济等优点,乳品中除铁元素以外的大多数强化微量元素对测定无干扰作用,可应用于奶制品中AFM1的快速检测。; 马良张宇昊江涛苏敏涂春蓉; 关键词：黄曲霉毒素M1 超分子体系荧光增强包合

国家重点基础研究发展计划(2013CB127803)

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