国家教育部博士点基金(20095317110001)
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
- 相关作者：高永军徐蔚曹毅方绍龙廉坤更多>>
- 相关机构：昆明医科大学昆明医学院第二附属医院福建医科大学更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 停循环相关脑损伤的大鼠海马线粒体COX蛋白获取及验证
- 2014年
- 为了明确不同脑温停循环对大鼠海马线粒体差异蛋白质的影响,探讨深低温停循环的脑保护机制,研究以16G导管和22G留置针分别穿刺颈内静脉和尾动脉,建立大鼠闭胸式体外循环模型.并在该模型下完成常温（35.5~37.5℃）和深低温（〈27℃）状态下停循环10 min,提取海马组织并纯化线粒体,电镜超微结构显示线粒体纯度和完整性均良好,可以进行下一步研究.按照蛋白质组学要求取线粒体蛋白质匀浆,SDSPAGE预实验显示标本符合蛋白质组学的需要.最后进行i-TRAQ标记的蛋白质组学分析,获取7个差异蛋白质（依据表达量〉1.5倍或〈0.67倍,p〈0.05）.之后对其中的差异蛋白质——细胞色素C氧化酶进行深入研究,免疫荧光染色精确定性表明线粒体和细胞质的COX蛋白在NTCA和DHCA组间的分布是有差异的,Western-blot半定量分析提示3组之间COX蛋白表达量无明显变化（p〉0.05）,由此判断急性期深低温停循环的脑保护作用与其减少线粒体蛋白质COX向胞质的释放有关。
- 高永军曹毅袁勇张喜兵赵宁辉徐蔚
- 关键词：免疫荧光细胞色素C氧化酶深低温停循环
- 基于相对和绝对定量核素标记技术的大鼠海马线粒体蛋白质组学研究
- 2014年
- 目的筛查深低温停循环时大鼠海马线粒体的差异蛋白质。方法以16G导管和22G留置针分别穿刺颈内静脉和尾动脉建立大鼠停循环10min模型，提取海马组织并纯化线粒体，超微结构验证，采用核素标记相对和绝对定量技术联合液相色谱-串联质谱技术获取肽段信息，Mascot2．2软件查库鉴定和分析获取差异蛋白质。结果共筛查到差异蛋白质8个（表达量2倍以上且P〈0．05），包括囊泡分拣蛋白45、无活性的磷脂酶c、假想蛋白loe365985、猫眼综合征染色体蛋白和Tid．1长亚型5个已知蛋白质，另外3个为未知蛋白质。结论通过8个线粒体差异蛋白质的变化发挥深低温停循环的脑保护作用。
- 高永军韩秀丽曹毅赵瑜袁勇徐蔚
- 关键词：海马线粒体差异蛋白质组学深低温停循环
- 常温缺血后选择性超深低温对猴脑Bc1-2和Bax表达的影响
- 2012年
- 目的观察猴脑常温缺血0 min、10 min、15 min、20 min后选择性脑超深低温断血流复苏对Bc1-2和Bax蛋白表达的影响.方法健康成年恒河猴15只,雄性,随机分为4组,0 min组(双侧颈动脉常温下阻断0 min后行脑选择性超深低温灌注,即热缺血0 min,简称0 min组,n=4),10 min组(方法同上,n=4),15min组(n=4),20 min组(n=3).依照昆明医学院第二附属医院神经外科前期方法建立模型,术后行神经功能缺失评分.实验猴灌注或复苏死亡后立即开颅取脑,长期存活猴饲养到术后4周处死开颅取脑.免疫组织化学法检测猴额叶神经细胞Bc1-2和Bax的表达水平.结果 0 min组、10 min组安全复苏并长期存活,术中、术后血流动力学稳定,术后神经功能评分无异常;15 min组长期存活2只,重残1只,死亡1只;20 min组则全部死亡.免疫组化结果表明:4组间相互比较,Bax的表达逐渐增高(P<0.05).10 min组、15 min组、20 min组3组间猴脑额叶Bc1-2表达明显逐渐降低,3组间差异有统计学意义(P<0.05);0 min组与20 min组比较差异有统计学意义(P<0.05);0 min组较10 min组、15 min组猴额叶Bc1-2的表达无明显差异,无统计学意义(P>0.05).结论超深低温能显著降低Bax的表达,促进Bc1-2的表达,从而起到脑保护的作用.
- 高永军王韬李冉李宝成蒲军徐蔚
- 关键词：选择性超深低温猴脑断血流BC1-2
- 深低温停循环对大鼠额叶皮质Smad2和Smad4表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨深低温停循环对缺血缺氧大鼠额叶皮质信号转导分子2(Smad2)和信号转导分子4(Smad4)表达的影响.方法 40只SD大鼠经随机分组(其中4只为预灌注血液供体)后采用体外插管法建立大鼠闭胸式体外循环模型,三组动物分别经深低温停循环(DHCA,n=12,脑温<20℃,停循环10 min)、常温停循环(NTCA,n=12,脑温36.5℃～37.5℃,停循环10 min)和常温不停循环(NC,n=12,脑温36.5℃～37.5℃)处理后,快速断头取额叶皮质,液氮保存.免疫组化染色后图像分析系统处理判断Smad2和Smad4在缺血早期大鼠额叶皮质的表达情况.结果 Smad2和Smad4在DHCA组中较NTCA组和NC组表达均有明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Smad2和Smad4在NTCA组中较NC组表达有升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论缺血缺氧可诱导大鼠额叶皮质Smad2和Smad4的表达,而深低温可以进一步促进额叶皮质内Smad2和Smad4的表达,反应性地增强脑损伤保护因子TGF-β1的作用,从而发挥脑保护作用.
- 高永军曹毅廉坤黄清方绍龙徐蔚
- 关键词：SMAD2SMAD4额叶皮质深低温停循环
- 建立大鼠深低温停循环模型时心率和呼吸的变化及相关性分析
- 2010年
- 目的：建立大鼠深低温停循环模型并观察其对动物心率和呼吸的影响。方法36只SD大鼠随机分为三组：深低温停循环组（DHCA，n=12，脑温〈20℃，停循环10min）、常温停循环组（NTCA，n=12，脑温36．5℃～37．5℃，停循环10min）和常温不停循环组（NC，n=12，脑温36．5℃～37．5℃），采用体外插管法建立大鼠闭胸式体外循环模型，完成各分组要求后快速断头取额叶皮质。期间持续监测心率、呼吸、SPO2和中心体温等。结果各组动物均顺利完成体外循环控制温度，且停循环对心率和呼吸有明显的影响。结论大鼠可通过体外循环实现全脑深低温状态，过程中心率呼吸变化存在明显的相关关系。
- 高永军曹毅廉坤黄清卫昕伟方绍龙付国平徐蔚
- 关键词：深低温停循环心率
- 深低温停循环对大鼠海马神经元线粒体超微结构的影响被引量：1
- 2013年
- 本研究旨在观察深低温停循环（DHCA）技术本身对海马线粒体超微结构的影响，现报道如下。
- 高永军曹毅陈飞雄方绍龙赵金喜李旭辉徐蔚
- 关键词：线粒体超微结构深低温停循环海马神经元
