广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(0330004-14)
- 作品数：10 被引量：26H指数：4
- 相关作者：卢晟盛卢克焕何若钢房慧伶陆阳清更多>>
- 相关机构：广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西壮族自治区畜牧研究所更多>>
- 发文基金：广西省自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 不同洗卵液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期发育的影响被引量：9
- 2007年
- 探讨不同洗卵液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期发育的影响,以便开发出简易、经济的洗卵液。结果表明,使用TL-Hepes液、DPBS液、TCM-199()液和TCM-199()液作为洗卵液,对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后的早期发育没有显著影响,说明4种洗卵液均可用于猪卵母细胞的洗涤,但DPBS液配制较简易且价格便宜,是最佳的选择。
- 莫品方仇恒滨何若钢蓝海恩黄敏瑞卢晟盛
- 关键词：猪卵母细胞体外成熟体外受精
- β-巯基乙醇对猪卵母细胞体外受精及胚胎发育的影响被引量：1
- 2008年
- 实验探讨了成熟液中添加β-巯基乙醇对猪卵母细胞体外受精和孤雌激活后早期发育的影响,以优化猪早期胚胎体外生产体系。结果发现:成熟液中添加低浓度β-巯基乙醇对猪卵母细胞体外受精和孤雌激活后胚胎的早期发育无明显促进作用,添加浓度过高(≥250μmol/L)反而不利于猪胚胎的早期发育。
- 兰宗宝何若钢莫品方潘天彪黄敏瑞卢晟盛卢克焕
- 关键词：猪卵母细胞体外受精孤雌激活胚胎培养
- 受精液中添加β-ME、BSA和咖啡因对猪卵母细胞体外受精后早期发育的影响被引量：8
- 2008年
- 进行受精液中添加不同浓度的β-ME、BSA和咖啡因对猪卵母细胞体外受精及其早期发育的影响试验。结果表明,在受精液中添加β-ME(2、10、50μmol/L)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育无显著促进作用,当添加浓度过高(250μmol/L)时对早期胚胎发育反而不利;在受精液中添加咖啡因(1、2、4mmol/L)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育无显著的促进作用;在受精液中添加BSA(0.1%、0.2%、0.4%、0.8%)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育有一定的促进作用,并以添加0.4%BSA的效果最好。
- 许丹娜田加运何若钢莫品方蓝海恩黄敏瑞卢晟盛卢克焕
- 关键词：卵母细胞体外成熟体外受精胚胎培养
- 不同浓度Leptin对猪卵母细胞体外成熟和早期孤雌发育的影响被引量：5
- 2008年
- [目的]系统比较了在成熟培养液中添加Leptin对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活胚的发育率和囊胚质量,同时比较了成熟培养液和胚胎培养液添加Leptin对孤雌激活胚发育的影响。[方法]成熟培养液中添加不同浓度Leptin对猪卵母细胞体外成熟和早期孤雌发育能力的影响及囊胚的内细胞团细胞数目,并且研究了成熟培养液和胚胎培养液单独或联合添加Leptin对猪早期孤雌胚胎发育能力的影响及囊胚的内细胞团细胞数目。[结果]成熟培养液中添加不同浓度Leptin(0,10,50,100和200 ng/ml),体外成熟44 h,卵母细胞核成熟率统计分析差异不显著(P>0.05);将核成熟卵母细胞进行化学激活,第2天胚胎卵裂率统计分析差异不显著(P>0.05),但100ng/ml组与其他组第7天的囊胚率及囊胚的总细胞数差异显著(P<0.05);成熟液添加Leptin 100 ng/ml、胚胎培养液添加Leptin 10 ng/ml与其他组第7天的囊胚率及囊胚的内细胞团细胞数差异显著(P<0.05)。[结论]Leptin对卵母细胞成熟和孤雌胚胎发育能力上有相辅相成的作用。
- 任子利赵彦玲何若钢卢晟盛陆阳清蓝海恩潘天彪黄敏瑞卢克焕
- 关键词：卵母细胞孤雌激活LEPTIN
- 有无透明带猪卵母细胞电激活参数的优化及体外培养方式的建立被引量：1
- 2008年
- [目的]摸索无透明带猪体外成熟卵母细胞(ZFOs)电激活的条件和无透明带孤雌激活胚胎(ZFEs)的体外培养方式,为手工克隆法生产广西巴马小型猪体细胞核移植奠定基础。[方法]用不同场强、脉冲时程和脉冲次数激活ZIOs、ZFOs,用不同培养方式(微滴法和微穴法)培养ZIEs和ZFEs,检查第7天的囊胚率及囊胚的总细胞数。[结果]有带猪体外成熟的卵母细胞电激活最佳场强和脉冲时程为125 V/(mm.80μs),微滴法培养的囊胚发育率为(30.54±11.06)%;无带猪体外成熟的卵母细胞电激活最佳场强和脉冲时程为85V/(mm.80μs),微穴法培养,其囊胚发育率为(12.77±6.98)%;单次脉冲的激活效果好于多次脉冲。[结论]对有无透明带胚胎的培养方式,微穴法培养无透明带胚胎,微滴法培养有带胚胎较合适,一次脉冲可以有效激活卵母细胞。
- 任子利赵彦玲何若钢卢晟盛陆阳清蓝海恩潘天彪黄敏瑞卢克焕
- 关键词：电激活
- 不同渗透压及山梨醇浓度对猪体外受精卵早期发育的影响被引量：10
- 2008年
- 探讨胚胎培养液中不同渗透压及山梨醇浓度对猪体外受精卵早期发育的影响。结果表明，用NaCl调节渗透压时，猪体外受精卵的囊胚率随着渗透压的升高而增加，当渗透压为320-335mOsm时囊胚率最高；而用山梨醇调节渗透压时，以1．8mg／mL山梨醇调节渗透压至270-285mOsm的效果较好；同一渗透压水平下，培养液中添加山梨醇与未添加的处理组间差异不显著。说明本研究条件下，适当提高胚胎培养液渗透压有利于猪体外受精卵的早期发育。
- 兰宗宝王修文何若钢卢晟盛张玲房慧伶蓝海恩黄敏瑞卢克焕
- 关键词：猪卵母细胞胚胎培养渗透压
- 精子浓度和授精前孵育时间、精卵共孵育时间对猪卵母细胞体外受精效果的影响被引量：3
- 2008年
- 研究探讨精子的浓度和授精前孵育时间、精卵共孵育时间对猪卵母细胞体外受精及进一步早期发育的影响。试验结果表明,在本研究条件下进行猪卵母细胞体外受精时:(1)精子的适宜浓度为1×106个/ml;(2)精子洗涤后不需要孵育就可直接用于授精;(3)精卵共孵育3h效果较好。
- 兰宗宝许惠艳何若钢房慧伶蓝海恩黄敏瑞卢晟盛卢克焕
- 关键词：卵母细胞胚胎培养
- 不同化学激活方法和电激活参数对猪体外成熟卵母细胞早期孤雌发育的影响被引量：2
- 2006年
- 本研究探讨了不同化学激活方法和不同电激活参数对猪体外成熟卵母细胞早期孤雌发育的影响。利用屠宰场猪卵巢卵母细胞，在体外成熟培养44～48h后，将核成熟卯母细胞分别用：（1）不同化学激活方法[①10％乙醇＋10μg／mL放线菌酮；②2．5mmol／L氯化锶＋10μg／mL放线菌酮；③5μmol／L离子霉素＋2．5mmol／L 6-二甲氨基嘌呤（6-DMAP）；④200μmol／L硫柳汞＋8mmol／L二硫苏糖醇进行激活处理；⑤对照组——不用任何激活剂（试验1）]；（2）用不同电场强度和脉冲时程进行电激活（试验2），之后放入胚胎培养液中进行体外培养7d。研究结果显示：（1）4种不同化学激活方法处理卵子的1原核形成率、2原核形成率和原核形成率都显著比对照组的高（P〈0．05），其中离子霉素＋6-DMAP组的2原核形成率和总原核形成率最高，分别为（23．1±3．5）％和（65．2±3．5）％，显著比其他处理组的都高（P〈0．05）；（2）4种不同化学激活方法处理组的囊胚率都比对照组的高（P〈0．01），其中离子霉素＋6-DMAP组的卯裂率及囊胚率最高，分别为（46．6±18．5）9／5和（5．6±4．2）％；（3）本研究所用的4种不同化学激活方法对猪4-细胞孤雌胚SDS—PAGE电泳的蛋白质表达图谱没有显著影响；（4）电场强度为1．7kV／cm、脉冲时程为50和70μs时猪体外成熟卯母细胞激活效果最好，卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数分别为：（77．4±9．7）％，（12．4±3．7）％，17．6±5．9和（75．1±10．6）％，（12．3±2．6）％，19．1±8．1。以上结果说明：（1）本研究所用的4种化学激活方法均能有效激活猪体外成熟卵母细胞，其中离子霉素＋6-DMAP的激活效果最理想；（2）在本实验室条件下，采用1．7kV／cm的电场强度、50～70μs的脉冲时程均能有效的激活猪体外成熟卵母细胞；（3）本研究所用�
- 卢晟盛魏凤房慧伶陆阳清卢克焕王爱德
- 关键词：卵母细胞体外成熟孤雌发育胚胎培养
- 乙二胺四乙酸钠、能量基质、氨基酸对猪卵母细胞的体外成熟和早期孤雌发育的影响
- 2006年
- 本研究探讨了：（1）成熟培养基中葡萄糖和丙酮酸钠剂量对猪卵母细胞体外成熟极体排放率的影响；（2）培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、牛磺酸和亚牛磺酸的剂量对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响，同时探讨不同浓度乙二胺四乙酸钠（EDTA—Na）对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响。利用屠宰场猪卵巢卵母细胞，在含不同剂量葡萄糖十丙酮酸钠的成熟液中体外成熟44～48h，计算其极体排放率（试验1），进行化学法孤雌激活后，在含不同剂量的葡萄糖＋谷氨酰胺＋牛磺酸＋亚牛磺酸与不同浓度的EDTA—Na的培养基中体外培养，计算孤雌激活胚的第48小时卵裂率和第168小时囊胚率（试验2）。结果表明：（1）葡萄糖＋丙酮酸钠在l倍剂量（浓度分别为3．05mmol／L和0．91mmol／L）时，猪卵母细胞体外成熟的核成熟率为（59．3±5．0）％，当其剂量加倍时，猪卵母细胞体外成熟的核成熟率极显著下降（P〈0．01），为（51．0±4．4）％；（2）随着EDTA—Na添加浓度的增加，猪孤雌激活胚的的囊胚发育率不断上升，添加浓度达到50μmol／L时囊胚率最高（7．2±4．1）9／6，超过此浓度后囊胚率开始下降，培养基中添加适当浓度（25—100μmol／L）的EDTA—Na对猪孤雌激活胚的囊胚发育率具有有利作用（P〈0．05），添加浓度达到200μmol／L时其有利作用消失；（3）培养基中葡萄糖＋氨基酸的剂量过高（葡萄糖、谷氨酰胺、牛磺酸、亚牛磺酸的浓度分别大于5．55，1．0，7．0，5．0mmol／L）对猪孤雌激活胚的卵裂率无显著影响（P〉0．05），但对其囊胚发育率有不利作用（P〈O．05）。本研究得出以下结论：（1）适当浓度（25～100μmol／L）的EDTA—Na对猪早期胚胎体外发育具有促进作用；（2）培养基中能量基质剂量过高会抑制猪卵母细胞体外成熟；（3）培养基中能量基质十
- 卢晟盛魏凤兰宗宝房慧伶陆阳清卢克焕王爱德
- 关键词：氨基酸卵母细胞孤雌激活
- 乙二胺四乙酸钠对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响被引量：1
- 2006年
- 本研究探讨了乙二胺四乙酸钠（EDTA—Na）对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响。利用屠宰场猪卵巢卵母细胞，在不添加或添加不同浓度EDTA—Na的成熟培养液中体外成熟44～48h，挑选核成熟卵母细胞进行孤雌激活，然后移到不添加或添加不同浓度EDTA—Na的胚胎培养液中进行体外培养168h。结果说明：（1）成熟液中添加适当浓度（25～100μmol／L）EDTA—Na对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用，在EDTA—Na浓度为100μmol／L时，效果最佳；（2）胚胎培养液中添加适当浓度（25～100μmol／L）EDTA—Na，对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用，在EDTA—Na浓度为100μmol／L时，效果最佳；（3）成熟液和胚胎培养液中同时添加100μmol／LEDTA—Na对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用；（4）成熟液或／和胚胎培养液中添加不同浓度EDTA—Na，对体外成熟培养后的猪核成熟卵母细胞及孤雌激活后的4-细胞孤雌胚SDS—PAGE电泳的蛋白质表达图谱都无显著影响。
- 卢晟盛魏凤刘红波房慧伶陆阳清卢克焕王爱德
- 关键词：卵母细胞体外成熟孤雌激活胚胎培养
