国家自然科学基金(31071713)
- 作品数：12 被引量：92H指数：5
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- 解淀粉芽孢杆菌HF-01发酵条件优化被引量：51
- 2013年
- 为探讨解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliqruefaciensHF-01菌株液体发酵条件，提高其活性次级代谢产物的产量，以茵体生物量和发酵液拮抗柑桔绿霉病菌PenicilliumdigitatumSacc．活性为指标，采用单因子试验和正交设计方法对菌株的最适发酵培养基成分及发酵条件进行优化。结果表明，菌株HF-01最适发酵培养基为葡萄糖3．0％、酵母提取粉0．5％、氯化钠0_3％、硫酸镁0．1％；最佳发酵培养条件为初始pH值6．0～6．5、培养温度28℃、培养时间48h、250mL三角瓶装液量90mL、接种量体积分数6％、摇床转速130r·min-1。在最佳发酵培养基和培养条件下，菌株HF-01抑菌能力提高37．3％；25℃条件下，优化后所得发酵滤液处理柑橘果实4d后，发病率为31．7％，病斑直径为25．9mm，显著低于优化前所得发酵滤液的发病率56．7％和病斑直径48．1mm。
- 洪鹏安国栋胡美英耿鹏桑松
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌发酵条件优化单因子试验正交试验
- 捕食螨的抗药性研究进展被引量：3
- 2012年
- 抗药性捕食螨的应用是IPM中生防和化防相结合的重要措施之一。本文综述了农药对捕食螨的影响、捕食螨抗药性现状、抗药性机制、抗药性监测方法、交互抗性及遗传改良等,并介绍了抗药性捕食螨的应用现状及前景,旨在充分保护和利用捕食螨,使生物防治与化学防治有机结合。
- 赵海明唐良德胡美英耿鹏安国栋
- 关键词：捕食螨农药抗药性IPM
- 重叠延伸PCR法构建小菜蛾化学感受蛋白1基因突变体研究被引量：3
- 2011年
- 【目的】探索重叠延伸PCR法在昆虫化学感受蛋白基因点突变上的应用,研究半胱氨酸(Cys32)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(PlxyCSP1)结合特性的影响。【方法】用计算机软件模拟PlxyCSP1上Cys32突变前后的蛋白三级结构以及与配体化合物的结合情况,确定点突变位点。根据扩增得到的PlxyCSP1序列设计并合成重叠引物,利用重叠延伸PCR法,将PlxyCSP1上的Cys32突变成色氨酸(Trp32),获得突变体PlxyCSP1-M。将突变后的基因与载体pET-32a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)。【结果】分子对接图显示,配体可以顺利进入PlxyCSP1的结合口袋,而无法进入PlxyCSP1-M的结合口袋。结合能预测显示,配体化合物与PlxyCSP1的结合能均为正值,与PlxyCSP1-M的结合能均为0。突变后的重组质粒测序结果表明,Cys32(TGC)已突变为Trp32(TGG),经IPTG诱导,该菌表达了分子质量约为36 ku的融合蛋白。【结论】Cys32是影响PlxyCSP1结构和功能的重要氨基酸残基。Cys32突变为Trp32后,PlxyCSP1-M结合特性发生了变化,不能与配体化合物正常结合。
- 任珍珍刘晶晶柳晓磊陈永李珣胡美英
- 关键词：小菜蛾重叠延伸PCR
- 柑橘绿霉病拮抗细菌的筛选及其抑制效果被引量：5
- 2013年
- 从根际土壤中筛选出1株对柑橘绿霉病菌Penicillium digitatum Sacc.具有较强拮抗活性的菌株HA-01。采用平板对峙法,测定了该菌株对柑橘绿霉病菌、柑橘青霉病菌Penicillium italicum、柑橘酸腐病菌Geotri-chum candidum等12种果蔬病原菌的拮抗活性。结果表明,菌株HA-01对12种供试病原菌均有不同程度的拮抗作用,表现出广谱抗菌活性。菌落形态观察、生理生化特性分析、16S rDNA序列同源性比对以及特异性PCR检测结果表明,该菌株为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。对马水橘的活体接种试验表明,菌株HA-01的发酵液、菌悬液和发酵滤液处理3 d后柑橘绿霉病的发病率均低于20%,病斑直径均在2.00 cm以下,而对照发病率为94.44%,病斑直径为3.60 cm。
- 安国栋洪鹏胡美英魏娜陈牧宇
- 关键词：拮抗细菌解淀粉芽孢杆菌
- 甜菜夜蛾PAP基因克隆及在高温胁迫下其表达量的变化被引量：2
- 2011年
- 紫色酸性磷酸酯酶(purple acid phosphatase,PAP)在生物逆境胁迫中具有至关重要的作用,而在昆虫中此类基因极少见于报道。首次克隆和分析了甜菜夜蛾PAP基因cDNA 3’末端序列,在GenBank登录后,获得序列号为HM566114,其长为759个碱基对,推测编码252个氨基酸。此多肽序列具有高度保守性,其相似性分别为:埃及伊蚊(Aedes aegypti)84%;黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)52%,赤拟谷盗(Tribolium castaneum)50%。为了研究高温对甜菜夜蛾PAP基因表达量的影响,利用RT-PCR技术,检测30℃,35℃,40℃胁迫下甜菜夜蛾2龄幼虫体内PAP基因表达量的变化,其中设对照组为25℃。结果表明:高温对甜菜夜蛾2龄幼虫PAP基因表达具有明显的诱导作用,30℃,35℃,40℃分别处理10,20 h的表达量均显著高于对照组25℃分别处理的10,20 h(P<0.05)。相比于对照组,在30℃处理20 h的表达量最高,表明PAP基因的表达与其抗高温能力之间存在一定的关系。
- 胡振龚亮张彦博胡美英
- 关键词：甜菜夜蛾CDNA克隆半定量RT-PCR
- 牵出技术在蛋白质相互作用研究中的应用被引量：2
- 2011年
- 蛋白质与蛋白质的相互作用参与生命体内的许多生物学过程,关于蛋白质相互作用的研究是人们了解蛋白质功能、揭开生命奥秘的关键所在。牵出(pull-down)技术作为一种简单、经济、行之有效的一种体外验证蛋白质与蛋白质之间的相互作用的实验技术,近几年受到了科研人员的青睐。本文阐述了该技术的基本原理和技术特点,总结了近年来牵出技术在生命科学领域中的应用情况,以及由此衍生的新技术的研究进展。
- 易欣柳晓磊胡美英
- 关键词：蛋白质相互作用
- 昆虫化学感受蛋白基因的进化分析被引量：5
- 2011年
- 从基因库中调取已完成测序的昆虫化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)基因序列和氨基酸序列,共涉及昆虫7个目23个种的59个基因。应用MEGA 5.0形成了这59个基因的系统发育关系树,并计算CSPs基因在昆虫中的核苷酸替换速率。对非同义替换速率和同义替换速率进行比较的结果显示,CSPs基因在昆虫中总体上受到负选择作用。用PAML软件位点-特异模型检测到6个受到正选择作用的位点,其中5个位于功能重要的区域。
- 柳晓磊翁群芳胡美英李亚楠易欣
- 关键词：昆虫化学感受蛋白基因进化
- 6%阿维·氯苯酰悬浮剂防治甘蓝小菜蛾的药效被引量：2
- 2012年
- 应用6%阿维·氯苯酰悬浮剂防治甘蓝小菜蛾,连续两年田间药效试验结果表明:该药剂防治甘蓝小菜蛾效果较好,对甘蓝安全,且速效性好,持效期长。在有效成分为37.80～47.25 g/hm2剂量下,施药后3、7、14 d的防治效果分别为72.70%～80.87%、79.65%～88.09%和74.24%～85.51%,相当于或好于对照药剂18 g/L阿维菌素乳油8.1 g/hm2(有效成分)处理和5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂30 g/hm2(有效成分)处理的同期防效,说明6%阿维.氯苯酰悬浮剂是防治甘蓝小菜蛾较为理想的药剂。
- 赵海明耿鹏胡美英易欣邓乐晔安国栋
- 关键词：甘蓝小菜蛾
- 昆虫嗅觉感受机制的研究进展被引量：5
- 2014年
- 昆虫感受外界化学信号是由嗅觉系统控制的,多种蛋白参与了这一过程,昆虫嗅觉参与其与外界的信息交流,使昆虫对寄主的选择、寻找配偶、觅食、群居、忌避及信息传递等行为作出反应。对嗅觉系统的结构、重要的相关蛋白及化学信号的传导机制等方面的最新研究进展进行了综述,并对昆虫的嗅觉机制的研究与应用进行了展望。
- 王培丹易欣王政齐江卫翁群芳桑松
- 关键词：昆虫嗅觉系统
- 桔小实蝇非典型气味受体Orco基因的克隆与表达谱分析被引量：5
- 2013年
- 为探讨非典型气味受体基因Orco的功能,采用RT-PCR和RACE方法克隆获得桔小实蝇Bacto-cera dorsalis(Hendel)Orco受体的全长cDNA序列,命名为Bdor/Orco(GenBank登录号为EU621792)。测序结果表明Bdor/Orco开放阅读框全长1 422bp,编码473个氨基酸残基。对其组成成分、疏水/亲水区域、信号肽、蛋白质二级结构,以及分子进化关系等进行了预测与推断,分析结果表明Bdor/Orco与其他昆虫的Orco具有较高的氨基酸序列一致性,特别是C末端。对该基因在桔小实蝇成虫不同组织和发育时期表达量的荧光定量PCR分析,结果表明Bdor/Orco主要是在桔小实蝇成虫触角中表达,头部(去除触角)、雌虫前足和翅中也有较高的表达;桔小实蝇在各个发育时期的表达水平不同,在刚羽化雌成虫中的表达量最高。
- 赵海明易欣胡美英安国栋王会冬黄林
- 关键词：桔小实蝇气味受体克隆表达谱
