国家自然科学基金(21076159)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：路福平刘逸寒李玉佟新伟刘晓光更多>>
- 相关机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 磷脂酰丝氨酸合成酶发酵及反应条件的研究
- 2012年
- 研究重组磷脂酰丝氨酸合成酶表达条件及其用于酶法合成磷脂酰丝氨酸的反应条件。结果表明,在50 mL培养基中,菌体浓度为OD600=0.6时,用0.5 mmol/L的IPTG,在温度为20℃,转速为120 r/min的条件下,诱导12 h后,重组磷脂酰丝氨酸合成酶活力可达1.33 U/mL,是优化前的1.66倍。酶法转化磷脂酰丝氨酸的最适温度为38℃,最适pH为8.0,最适离子是12 mmol/L Mn2+,最适表面活性剂是1.0%Trition X-100。在最适条件下,磷脂酰丝氨酸转化率可达33.15%。
- 王尧刘逸寒李玉刘晓光王建玲路福平
- 关键词：发酵条件
- 枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转氨酶的异源表达被引量：5
- 2012年
- 以野生型枯草芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增获得带有SD序列及谷氨酸棒状杆菌信号肽ΔS0949的BTG基因.将其与大肠杆菌-谷氨酸棒状杆菌穿梭表达载体pXMJ19连接,构建重组质粒pXMJ19-Sbtg转化谷氨酸棒状杆菌ATCC13032.经IPTG诱导后该重组菌发酵液具有交联酪蛋白的能力,表明该重组菌能够实现分泌表达.
- 刘凯刘逸寒张艳田耀路福平
- 关键词：谷氨酰胺转氨酶谷氨酸棒状杆菌信号肽分泌表达
- 大肠杆菌sdaA、sdaB,pgpB基因的敲除及其对磷脂酰丝氨酸合成的影响
- 2013年
- 利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌sdaA、sdaB和pgpB基因,阻断大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成途径中的底物L-丝氨酸和磷酸乙醇酸的部分分解代谢,以达到提高磷脂酰丝氨酸在菌体内含量的目的。将出发菌株和重组菌株进行摇瓶发酵,发酵1 000 min后,采用高效液相色谱法分析磷脂酰丝氨酸的产量。试验结果表明sdaA、sdaB、pgpB基因敲除后,磷脂酰丝氨酸在菌体总磷脂中的含量提高了一倍多,说明通过基因工程手段改变大肠杆菌中磷脂酰丝氨酸合成的部分代谢途径,初步获得磷脂酰丝氨酸产量提高的菌株,具有较好的应用前景。
- 佟新伟杨泓喆李玉路福平
- 关键词：大肠杆菌基因敲除磷脂酰丝氨酸RED重组系统
- pgpA和tdcG基因的敲除对大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成的影响
- 2014年
- 磷脂酰丝氨酸具有改善大脑的认知和记忆的功能,是医药和食品行业重要的原料.为进一步提高大肠杆菌(Escherichia coli)中磷脂酰丝氨酸含量,利用Red重组系统,以可积累磷脂酰丝氨酸的E.coli K12(△sda A△sda B△pgp B)为出发菌株,敲除pgp A和tdc G基因,切断与磷脂酰丝氨酸合成相关的L-丝氨酸和磷脂酰甘油磷酸的分解代谢途径.摇瓶发酵后的检测结果表明,重组菌株E.coli K12(△sda A△sda B△pgp A△pgp B△tdc G)中磷脂酰丝氨酸占菌体总磷脂的比例为2.5%,较出发菌株(1%)提高了1.5倍.
- 刘逸寒乔婧李玉佟新伟刘晓光路福平
- 关键词：磷脂酰丝氨酸大肠杆菌基因敲除代谢
