国家自然科学基金(30070904)
- 作品数：12 被引量：42H指数：4
- 相关作者：楼宜嘉郑英赵蕊赵轶张捷更多>>
- 相关机构：浙江大学解放军第117医院浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 对乙酰氨基酚致小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶的激活机制被引量：2
- 2003年
- 目的 探索大剂量对乙酰氨基酚 (Par)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S 转移酶(mGST)活性的影响及其可能的机制。方法 小鼠饮用 1 0 %乙醇 7d以诱导肝药酶 ,Par90 ,1 5 0 ,2 1 0mg·kg-1ip ,在 6h内测定肝mGST活性及谷胱甘肽 (GSH)含量 ,结合二硫苏糖醇(DTT)逆转与N 乙基马来酰亚胺 (NEM)激活效应来探讨mGST活性变化机制 ,并用SDS PAGE和负染凝胶法评价Par对mGST蛋白分子量及含量的影响。结果 ipPar90～ 2 1 0mg·kg-1,在短时间内引起小鼠mGST活性增加 ,GSH含量减少。mGST活性的改变与Par处理之间存在时效及量效关系。Par引起的mGST的激活效应不被二硫键断裂剂DTT逆转 ,NEM在Par激活的mGST半胱氨酸 49巯基 (Cys 49 SH)上总激活效应降低 ;激活的mGST未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论 大剂量Par引起小鼠体内mGST活性增加 ,其激活机制主要与Cys 49
- 郑英楼宜嘉
- 关键词：酶激活微粒体对乙酰氨基酚谷胱甘肽
- 卡介苗联合脂多糖诱发大鼠原代培养肝细胞免疫性损伤模型的构建被引量：6
- 2002年
- 目的 :联合卡介苗 (BCG)和脂多糖 (L PS)构建大鼠原代培养肝细胞免疫性损伤模型 ,用于护肝药物的初步筛选。方法 :预注 BCG12 d的大鼠制备原代肝细胞 ,用 10 mg/ L L PS诱发肝细胞损伤。用联苯双酯 (DDB)、马洛替酯 (ML T)、水飞蓟宾 (SB)和甘利欣 (GRZ)进行防护 ,同法进行整体动物实验 ,以论证该模型的适用性和可靠性。测定血清和上清液中 AST、L DH和一氧化氮 (NO) ;计算肝脾指数 ;进行肝脏病理检查。结果 :体外实验中 ,BCG+L PS组上清液 AST、L DH和 NO明显高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,且呈时间依赖性增加 ,12 h达稳态。DDB、ML T、SB和 GRZ均可明显抑制 12 h的 AST、L DH和 NO。整体实验中 ,BCG和 L PS处理 6 h后血清 AST、NO及肝脾指数明显高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,L DH增加但无统计学差异 (P>0 .0 5 ) ;肝脏病理损伤明显。DDB、ML T、SB和GRZ对上述指标和病理损伤均有不同程度抑制作用。结论 :BCG联合 L
- 郑芹珠王立明楼宜嘉
- 关键词：卡介苗脂多糖原代肝细胞马洛替酯甘利欣
- Activation of microsomal glutathione S-transferase 1 by acetaminophen overdose is related to protein dimer formation
- ＜正＞The liver abundant protein microsomal glutathione S-transferase 1 （MGST1） was activated in case of acetamin...
- Qiang Shi
- 文献传递
- 硝普钠对组胺所致离体豚鼠回肠H_1效应的影响被引量：4
- 2002年
- 目的 探讨一氧化氮 (NO)与组胺 (His)对离体豚鼠回肠生理活动的共同调节作用及其可能机理。方法 将离体回肠段固定于含 95 %O2 和 5 %CO2 台氏液恒温测试系统中 (37℃ ) ,分别给予硝普钠 (SNP ,15、15 0、15 0 0 μmol·L- 1)或SNP +硝苯地平(Nif ,2 5、5 0、10 0nmol·L- 1) ,作用 30min ,再累积加入不同浓度的His(0 .0 1～ 10 μmol·L- 1) ,以平衡生理记录仪描记肠段收缩曲线 ,观察SNP和Nif对His引起的回肠H1效应的影响。结果 ①SNP可增强低浓度His(0 .0 1～ 0 .1μmol·L- 1)引起的回肠H1效应 ,随His浓度增高 ,SNP的增强作用减弱 ;②去台氏液中外钙 ,有或无SNP存在时的HisH1效应均呈减弱作用 ,且两者间无显著差别 ;③Nif呈浓度依赖性地抑制His引起的H1效应 ,并浓度依赖性地抑制SNP增强H1效应的作用。结论 SNP可增强离体豚鼠回肠HisH1效应 ,该增强作用可能与回肠平滑肌细胞的外Ca2 + 内流有关。
- 赵蕊楼宜嘉赵轶
- 关键词：硝普钠组胺回肠胃肠活动胃肠道疾病
- 硝普钠抑制脂多糖诱导的大鼠原代培养肝细胞表面细胞间粘附分子-1的表达被引量：3
- 2003年
- 目的 评价模拟肝脏急性炎症期一氧化氮与细胞间粘附分子 1(ICAM 1)表达的关系。方法 用免疫细胞化学技术检测加入不同浓度NO供体硝普钠 (SNP)和 (或 )细菌内毒素 (LPS)后 ,原代培养大鼠肝细胞ICAM 1的表达情况。结果 当培养时间达4h ,各组肝细胞均未见ICAM 1显著表达 ;但当培养至 8,2 4h ,LPS组的肝细胞ICAM 1表达强度明显升高 (P <0 .0 5 ) ,SNP则可呈浓度依赖性地抑制LPS诱导的大鼠肝细胞ICAM 1的表达。结论 SNP可显著抑制LPS诱导的原代培养大鼠肝细胞ICAM 1表达。
- 陈奕楼宜嘉王红莉
- 关键词：一氧化氮粘附
- 微粒体谷胱甘肽S-转移酶与药物代谢被引量：8
- 2003年
- 目的 阐明微粒体谷胱甘肽S 转移酶 (mGST)的研究新进展及其在药物代谢中的作用。方法 综述了近年来对mGST的生物学特性及在肝脏药物代谢中的研究进展。结果 膜结合型mGST超基因家族在药物经肝微粒体解毒代谢、防止脂质过氧化以及抗癌药物耐药性中起到重要的作用。结论 mGST具有重要的药理与毒理学意义 ,具有深入研究的广阔前景。
- 郑英楼宜嘉
- 关键词：药物代谢生物学特性毒理学
- 生理溶液中硝普钠释放一氧化氮巯基通路的动力学研究被引量：10
- 2003年
- 目的 探索台氏液中一氧化氮供体硝普钠 (SNP)在含活性巯基化合物催化下释放一氧化氮 (NO)的动力学特征 ,为体外NO药理作用定量研究提供实验依据。方法 在 37℃恒温避光条件下 ,对NO特异氧化产物NO- 2 以Griess试剂还原显色 ,采用分光光度法 ,比较分别有半胱氨酸 (CYS)、谷胱甘肽 (GSH)、巯基乙醇、青霉胺 (PCA)、N 乙酰半胱氨酸 (NAC)等 5种巯基化合物存在的台氏液中 ,SNP释放NO的情况 (n =3)。结果 2 4 0min内 ,在分别含有 2 5mmol·L- 1 各种巯基试剂的测试系统中 ,有CYS存在时 ,SNP释放NO呈一级动力学 ,速率常数K =0 .1 66 3min- 1 (r =0 .92 6 3) ,稳态浓度为 1 .0 2mmol·L- 1 ;有GSH存在时 ,NO释放呈多相性 ,2 5min达峰值 ,为 0 .53mmol·L- 1 ,1 80min后渐成 0 .36mmol·L- 1 的稳态 ;有巯基乙醇存在时 ,NO释放呈多相反应 ,60min达峰值 ,为 0 .1 1mmol·L- 1 ,1 2 0min后渐成 0 .0 9mmol·L- 1 的稳态 ;有PCA存在时 ,NO的释放成线性 ,释放公式为 :CtPCA=0 .0 742 +0 .0 0 0 2t (r =0 .9979) ;在有NAC存在的测试系统中 ,未测出有NO释放。结论 恒温避光台氏液中 ,SNP通过巯基通路释放NO的动力学特征受到巯基化合物自身的化学结构及空间位置的影响 ;2 4
- 赵蕊赵轶楼宜嘉
- 关键词：硝普钠一氧化氮药动力学
- 拟炎症高NO大鼠原代培养肝细胞的信号转导途径研究被引量：1
- 2002年
- 目的 :通过对信号分子 NO在原代培养大鼠肝细胞所经由的信号转导途径研究 ,探索炎症急性期肝细胞高 NO的生物学意义 ,及药物可能作用的新靶点。方法 :采用 NO供体硝普钠 (SNP)模拟肝脏急性炎症期高 NO环境 ,Griess法测定 NO的特异氧化终产物 NO2 - / NO3- 。测定肝细胞中 c GMP的浓度和肝细胞培养液中 GSNO的浓度 ,由此分别了解在原代培养大鼠肝细胞模型 ,NO经由 c GMP通路信号转导 ,还是经由非 c GMP通路信号转导的途径。结果 :1.5 4 3mmol/ L SNP释放 NO达峰值分别为 ,以 2 5 mmol/ L GSH为 NO释放通路 ,30 min时为 (0 .6 3± 0 .0 6 ) mmol/ L ;以 2 5 mmol/ L L - Cys为活性巯基通路 ,2 5 min时为 (0 .98± 0 .11) mmol/ L。 SNP与原代培养大鼠肝细胞共孵育过程中 ,随着孵育时间的延长及 SNP浓度的增高 ,细胞内 c GMP含量与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;培养液中 GSNO浓度也有增高。与对照组比均有显著差异 (P<0 .0 5 )。结论 :NO供体 SNP在含有巯基(GSH和 Cys)的肝细胞培养液中可持续释放 NO,通过 c GMP依赖性通路和 c GMP非依赖性通路—— GSNO通路进行信号转导 。
- 陈奕王红莉楼宜嘉
- 关键词：一氧化氮肝炎原代培养肝细胞信号转导环磷酸鸟苷
- 大鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶简易制备法对活性影响被引量：6
- 2002年
- 目的 :研究大鼠肝微粒体简易制备法对微粒体谷胱甘肽巯基转移酶 (m GST)活性的影响。方法 :用聚乙二醇 6 0 0 0 (PEG 6 0 0 0 )法和钙沉淀法制备大鼠肝微粒体 ,并与巯基烷化剂 N-乙基顺丁烯二酰亚胺 (NEM)共孵育 ,分别测定不同制备法所获 m GST活性。结果 :PEG 6 0 0 0法和钙沉淀法制备的肝微粒体 ,其 m GST活性分别为0 .15 ,0 .0 8μmol· min- 1 · ml- 1 ;NEM可使其活性分别显著增加至 1.797和 2 .375倍 (P<0 .0 0 1) ;洗涤纯化后 ,分别增加至 NEM活化前的 2 .35 0和 4 .12 7倍 (P<0 .0 0 1) ;其中 NEM与微粒体共孵育最适浓度为 5～ 10 mmol/ L ,最佳激活时间为 1～ 2 min。结论 :经 PEG 6 0 0 0法和钙沉淀法高速离心制备的微粒体 ,分离制备时间短 ,方法简单易行 ;钙沉淀法制备的 m
- 郑英张捷楼宜嘉
- 关键词：肝微粒体谷胱甘肽转移酶
- 苯丁酸氮芥及环磷酰胺对大鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶的激活被引量：1
- 2007年
- 目的探索苯丁酸氮芥(CHB)和环磷酰胺(CP)在体外是否通过烷化激活大鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶(mGST)。方法微粒体粗提物与CHB或CP体外共孵育,测定mGST催化动力学改变,结合N-乙基马来酰亚胺(NEM)再激活实验和结合二硫苏糖醇(DTT)逆转实验,研究酶激活机制。结果CHB或CP浓度(0～5mmol.L-1)与时间(0～5min)依赖性地激活mGTS。增强的mGST活性能被NEM进一步增强,不被二硫键断裂剂DTT逆转,NEM对CHB或CP活化后的mGST活性的增强效应与NEM单独的增强效应无差异。结论CHB或CP体外可激活大鼠肝mGST,激活机制可能与mGST的Cys49的巯基被CHB或CP修饰激活有关。
- 郑英李杨张捷楼宜嘉
- 关键词：酶激活微粒体谷胱甘肽转移酶苯丁酸氮芥环磷酰胺谷胱甘肽
