福建省自然科学基金(C0310035)
- 作品数：5 被引量：31H指数：4
- 相关作者：叶韵斌陈强李晓峰范南峰陈明水更多>>
- 相关机构：福建省肿瘤医院福建医科大学泉州市中医院更多>>
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- BABL/C×C57BL/6杂交F1代小鼠H22肝癌实体瘤模型的建立被引量：10
- 2006年
- 目的 探讨H22细胞在BABL／CXC57BL／6杂交F1代小鼠的成瘤性，为研究移植物抗肿瘤效应和移植物抗宿主病提供实验对象。方法 BABL／C来源的H22肝癌细胞接种于杂交F1小鼠皮下，观察成瘤状况，并用流式细胞仪检测H22细胞的主要组织相容抗原复合物分子。结果 每只F1小鼠接种2×10^6个H22细胞时，成瘤率为100％，无自发缓解；接种第14天，肿瘤体积的变异系数23％～34％；H22细胞的H-2K。表达率（75．70±9．32）％。结论 H22细胞可成功地接种于F1小鼠皮下成瘤，建立杂交F1代实体瘤动物模型。
- 李晓峰叶韵斌陈强范南峰黄炜伟陈明水
- 关键词：H22肝癌细胞小鼠
- NKG2D及其配体RAE-1、H60在移植物抗肿瘤中的作用被引量：5
- 2007年
- 为探讨NKG2D及其配体RAE-1、H60在单倍体相合(haploidentical)造血干细胞移植介导的移植物抗肿瘤效应中的作用,以皮下接种H22细胞的BABL/c×C57BL/6杂交F1代(CB6F1)小鼠为受鼠,以C57BL/6小鼠的骨髓+脾细胞为供者细胞,分别用抗CD90.2、NK1.1和NKG2D单克隆抗体清除供者T细胞、NK细胞和封闭NKG2D受体,进行单倍体相合细胞移植,观察移植后的抗肿瘤效应,并以半定量RT-PCR法检测移植后小鼠肿瘤组织RAE-1、H60的mRNA表达水平。结果发现:清除供者T细胞、NK细胞和封闭NKG2D的移植均导致移植物抗肿瘤效应的下降,MHC单倍体相合细胞移植后肿瘤细胞RAE-1、H60的mRNA表达水平上升。结论:NKG2D及其配体RAE-1、H60在移植物抗肿瘤效应中的起着重要的作用。
- 李晓峰陈强叶韵斌范南峰陈明水李洁羽陈慧菁陈淑萍周智锋
- 关键词：NKG2D移植物抗肿瘤效应
- MHC半相合脾加骨髓细胞诱发H22荷瘤鼠的抗肿瘤效应被引量：8
- 2006年
- 目的：观察MHC半相合脾加骨髓细胞移植抗小鼠H22实体瘤的效果。方法：以皮下接种H22肝癌细胞的BALB/c×C57BL/6杂交F1代雌性小鼠为受鼠,以健康雌性F1、雄性C57BL/6、雄性C3H小鼠为MHC全相合、半相合、不相合供鼠,观察移植后的抑瘤情况；观察供鼠细胞经^(60)Co照射的MHC半相合移植对WBC、生化和嵌合体的影响；比较供鼠细胞经与不经^(60)Co照射的MHC半相合移植的GVHD情况。结果：供鼠细胞经/不经^(60)Co照射的MHC半相合移植小鼠的肿瘤明显较小,与单纯化疗未进行移植者比较,差异具有统计学意义(P＜0．05)；但受鼠未经化疗预处理的MHC半相合细胞输注没有出现抗肿瘤效应；供鼠细胞经7．5 Gy ^(60)Co照射的MHC半相合移植能明显降低GVHD反应,且对外周血白细胞、生化无不良影响。结论：经7．5 Gy^(60)Co照射的MHC半相合脾加骨髓细胞移植能对H22肝癌细胞产生移植物抗肿瘤效应并降低GVHD反应。
- 陈强李晓峰叶韵斌范南峰黄伟炜陈明水李洁羽陈慧菁陈淑萍周智锋
- 关键词：移植物抗宿主病
- 单倍体相合细胞移植诱发小鼠移植物抗肿瘤效应的分析被引量：4
- 2008年
- 目的:异基因造血干细胞移植是治疗恶性肿瘤的一种有效方法,但在异基因造血干细胞移植时,如何在减轻移植物抗宿主病的同时保留并加强移植物抗肿瘤效应是目前临床面临的一大课题。观察输注经与未经60Co照射的单倍体相合细胞治疗CB6F1小鼠肝癌模型中移植物抗宿主病临床表现,探讨输注经照射单倍体相合细胞在治疗实体瘤中减轻移植物抗宿主病的作用。方法:实验于2006-03/2007-03在福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室和福建省疾病预防控制中心动物房完成。①实验材料:来源于BABL/C小鼠的肝癌H22细胞株由武汉大学中国典型培养物保藏中心提供。SPF近交系小鼠由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:以皮下接种肝癌细胞(H22)的CB6F1(BABL/C×C57BL/6杂交鼠,简称F1)雌性小鼠为受体鼠,经环磷酰胺腹腔化疗后,取C57BL/6小鼠的新鲜骨髓及脾脏细胞作为供体细胞,供体细胞分为经60Co照射和未经60Co照射。将F1小鼠随机分为3组:单纯化疗组、化疗+未经60Co照射细胞组、化疗+经60Co照射细胞组。观察3组小鼠移植物抗宿主病表现,并给予临床评分。③实验评估:于移植后第17天取小鼠皮肤、肠、肝、脾组织制备病理切片,观察移植物抗宿主病病理学改变所反应的情况,并检测小鼠瘤重和抑瘤率。结果:①化疗+经60Co照射细胞组小鼠移植物抗宿主病的临床表现明显轻于化疗+未经60Co照射细胞组(P<0.05)。②化疗+经60Co照射细胞组小鼠的皮肤、肠、肝、脾组织移植物抗宿主病的细胞病理学改变轻于化疗+未经60Co照射细胞组。③单纯化疗组与化疗+未经60Co照射细胞组、化疗+经60Co照射细胞组瘤重比较差异显著[(1.34±0.45)g,(0.6±0.38)g,(0.28±0.15)g,P<0.05]。化疗+未经60Co照射细胞组抑瘤率为55.22%,化疗+经60Co照射细胞组抑瘤率为79.22%。�
- 林浩叶韵斌李晓峰陈强
- 关键词：NST
- KIR不相合的NK细胞对乳腺癌细胞的体外杀伤作用被引量：7
- 2007年
- 目的:研究自然杀伤(natural killer,NK)细胞表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer immunoglobulin-like recep-tor,KIR)和HLA-Cw配体不相合的异基因NK细胞对乳腺癌细胞的体外杀伤作用;分析杀伤活化受体NKG2D及其MICA配体表达水平与NK细胞对乳腺癌细胞杀伤敏感性之间的关系。方法:取10例健康人及5例乳腺癌患者外周血10ml,采用MACS系统NK细胞免疫磁珠分选试剂盒负向分选高纯度NK细胞。取乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-435s和SK-Br3)和NK细胞各1×105个,碱裂解法抽提DNA,PCR-SSP方法分别检测HLA-Cw位点、KIR位点表达。MTT法检测KIR相合与不相合组的NK细胞对乳腺癌细胞的杀伤率。流式细胞术检测NK细胞NKG2D表达水平以及RT-PCR方法检测乳腺癌细胞MICA表达。结果:MACS系统分选出的NK细胞,经流式细胞术检测,其纯度在90%以上;KIR与HLA-Cw相合组的NK细胞对乳腺癌细胞株的杀伤率明显高于不相合组,G1组和G2组NK细胞对MDA-MB-435s(G1组)杀伤率分别为(73.2±14.5)%和(34.2±7.6)%,对SK-Br3(G1组)杀伤率为(67.3±12.5)%和(36.5±7.7)%,而对MCF-7(G2组)杀伤率分别为(36.7±8.5)%和(76.5±11.7)%。结果还显示,3株乳腺癌细胞均表达MICA分子;NK细胞与MCF-7细胞共培养,可上调NK细胞表面NKG2D的表达。结论:NK细胞对乳腺癌细胞的杀伤并非由KIR的不相合机制介导;乳腺癌细胞表面表达的MICA分子可上调NK细胞表面NKG2D的表达,激发NK细胞对乳腺癌细胞的细胞毒效应。
- 叶韵斌周智锋郑蕊蕊陈强林建银李洁羽
- 关键词：自然杀伤细胞杀伤细胞免疫球蛋白样受体
