西京医院科技创新基金(XJCX03M005)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 相关机构：第四军医大学西京医院清华大学更多>>
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- 小鼠胚胎干细胞-聚酯复合物在体多分化特性的初步实验观察
- 2005年
- 目的初步探讨胚胎干细胞聚酯复合物在体多分化特性。方法取BALBc孕鼠3.5d的囊胚,制备内细胞团(ICM)细胞用鼠胚成纤维细胞(MEF)饲养层及条件培养液培养,挑选胚胎干细胞(ES)集落并扩增传代。应用先进快速成形技术(RP)制备聚乳酸聚羟乙酸(PLGA)人工聚酯载体,扫描电镜(SEM)观察其超微结构,并对3mm×3mm×3mm大小的粒度均匀的颗粒型聚酯载体进行Ⅰ型胶原表面修饰。取10只裸鼠,于裸鼠体部左侧皮下植入2粒Ⅰ型胶原表面修饰的颗粒型PLGA聚酯载体并同时复合ES细胞(1×107个)作为实验侧;于裸鼠体部右侧对应部位皮下仅植入2粒Ⅰ型胶原表面修饰的颗粒型PLGA聚酯载体作为对照侧,术后30d取材组织学染色对比观察。结果制备和筛选出生长旺盛、传代稳定的ES细胞。先进RP制备的PLGA聚酯载体具有规则的空间网状支架结构、相互贯通的孔隙及材料表面微孔特征。组织学发现,实验侧植入体内30d,能形成包含各胚层细胞成份的“畸胎瘤”样组织,并可观察到较为典型的软骨细胞、软骨基质以及新生骨,且在多分化新生组织形成的同时载体材料逐渐降解;对照侧术后30d未见多分化新生组织形成,并仍有相对较多的聚酯载体有待降解。实验侧的多分化新生组织形成能力、生物相容性以及聚酯载体的生物可降解性均明显优于对照侧(P<0.01)。结论先进RP技术结合载体材料表面修饰的新工艺,对ES细胞全能分化特性无明显不利影响,将有望适用于以ES细胞为种子细胞的骨、软骨组织工程构建。
- 马兴胡蕴玉颜永年熊卓王哲吕荣王军徐新智李丹
- 关键词：胚胎干细胞聚酯复合物分化
- 仿生活性人工软骨的体外构建及其异位成软骨分化实验研究被引量：6
- 2006年
- 应用先进快速成形技术（RP）制备32枚粒度均匀（尺寸均为4mm×4mm×4mm）的聚乳酸-聚羟乙酸（PLGA）人工载体，该载体经Ⅰ型胶原表面修饰后均分为A、B两组。A组载体复合人骨形态发生蛋白-2基因转染（rAAV—hBMP-2）的兔骨髓基质细胞（MSCs，2×10^4个细胞／枚）；B组每枚载体复合等量、同代次、未基因转染MSCs。体外培养第5d，从两组各取12枚细胞-载体复合物植入裸鼠皮下，术后30d取材观察。结果发现rAAV-hBMP-2转染的MSCs成功表达目的基因。RP制备的PLGA载体具有良好的空间结构，大孔及材料表面微孔孔径分别为300μm和3～5μm。体外培养3～5d，两组载体均复合生长着大量种子细胞。皮下埋植30d，A组植人物形成较为典型的软骨细胞及基质，Ⅱ型胶原蛋白表达阳性；同期B组植人物无软骨组织形成。A组聚酯材料面积百分率显著低于B组（P〈0.01）。结果表明RP结合载体材料表面修饰，能制备出兼具理想孔隙结构和良好生物相容性的组织工程支架载体，该载体高效复合rAAV—hBMP-2转染的MSCs为组织工程软骨构建创造有利条件。
- 马兴胡蕴玉颜永年熊卓吕荣王军徐新智李丹
- 关键词：骨髓基质细胞骨形态发生蛋白-2
