陕西省自然科学基金(2003C2039)
- 作品数：3 被引量：10H指数：3
- 相关作者：史皆然师长宏吴昌归李元戚好文更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学实验动物中心更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胞壁表达Der p2的重组BCG对BALB/c小鼠Th细胞免疫应答的影响被引量：8
- 2005年
- 目的:观察接种以膜蛋白形式表达屋尘螨抗原Der-p2基因的重组BCG(rBCG),对BALB/c小鼠Th细胞免疫应答的影响。方法:以生理盐水为对照,分别将rBCG和BCG经腹腔注射接种于6～8wk龄和新生BALB/c小鼠,用ELISA法测定小鼠血清、脾脏T细胞培养上清(STLCS)中IL4、IFN-γ水平,用双色荧光标记流式细胞仪法测定脾脏细胞Th细胞亚群。结果:接种rBCG和BCG后,成年和新生小鼠血清和STLCS中IL4水平较对照组显著降低、IFN-γ水平显著升高;无论成年鼠还是新生鼠,在CD4+的脾脏细胞中,IFN-γ+细胞的比例明显升高,而IL4+细胞比例明显降低;此外,在两个年龄组小鼠,接种rBCG者脾细胞均产生了较BCG组更高水平的IFNγ;同时,用rBCG免疫的两组小鼠脾脏CD4+IFN-γ+的细胞比例也明显高于BCG免疫各组。结论:无论rBCG还是BCG通过腹腔注射免疫,均可诱导不同年龄BALB/c小鼠产生Th1免疫应答;表达在rBCG细胞壁上的Derp2被当成BCG的成分,为机体免疫系统所识别,抗原再次接触进一步刺激了Derp2特异性的Th1应答。这些结果表明,胞壁型抗原重组BCG可作为有效的疫苗,特异性地调节Th1/Th2平衡。
- 史皆然张新海师长宏曹云新吴昌归李元范雄林戚好文
- 关键词：卡介苗免疫应答
- 分泌表达Der p2的重组BCG的构建与鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的构建并鉴定能够分泌表达外源蛋白——屋尘螨抗原(Derp2)的基因重组卡介苗(rBCG)。方法采用PCR技术,从结核分枝杆菌H37Rv基因中扩增信号肽Alpha抗原(α-ss)的穿膜区基因,经测序鉴定后克隆入胞内表达Derp2的rBCG中。通过Westernblot鉴定目标抗原在rBCG中的表达。结果经测序证实,所克隆的α-ss信号肽基因序列正确,构建的Derp2-rBCG能完成在大肠埃希菌(E.coli)和牡牛分枝杆菌细胞之间的穿梭,并介导抗生素抗性基因表达。外源基因Derp2表达于BCG培养上清。结论成功构建了以分泌方式表达外源蛋白的Derp2-rBCG。
- 史皆然师长宏吴昌归李元戚好文李别虎范雄林
- 关键词：基因重组卡介苗
- 胞壁型rBCG经口服免疫可以诱导BALB／c小鼠产生抗原特异性TH1应答被引量：3
- 2007年
- 目的 观察胞壁型重组BCG（rBCG）经口服接种后对BALB／c小鼠TH细胞免疫应答的影响。方法 以100ml／L甘油为对照，分别将BCG和以膜蛋白形式表达屋尘螨抗原Derp2的rBCG经口服接种于8周龄BALB／c小鼠，109CFU／d，连续5d，用夹心EIASA测定小鼠血清、脾脏T淋巴细胞培养上清（SCS）和肠道相关淋巴细胞培养上清（GGS）中IL-4、IFN-γ水平，用双色荧光标记-流式细胞术测定脾脏淋巴细胞（SLC）和肠道相关淋巴细胞（GLC）中TH细胞亚群。结果免疫4周后，ELISA结果表明：BCG和rBCG两组血清和SCS的IFN-γ水平较对照组升高，IL-4水平降低；但两组小鼠GCS仅见IFN-γ水平升高。流式细胞测定结果表明：在CD4^＋的SLC中，BCG和rBCG免疫小鼠的IDl2R黠细胞比例升高，而CD30^＋细胞比例降低；在CD4^＋的GLC中，BCG和rBCG免疫小鼠的IFN-γ^＋细胞比例升高；至免疫后8周，上述改变进一步明显，但BCG和rBCG两组之间差异无统计学意义。体外给予抗原刺激后，rBCG组小鼠变化更加显著，而BCG组则无明显改变。但GCS的IL-4水平始终无法测得；同时GLC中IL-5^＋细胞比例仍持续较低。结论无论rBCG还是BCG通过口服免疫，均可诱导BALB／c小鼠产生TH1优势免疫应答；而胞壁型Derp2-rBCG诱导产生的TH1优势应答具有Der p2抗原特异（记忆）性。
- 史皆然张金山师长宏吴昌归
- 关键词：重组卡介苗口服免疫辅助性T淋巴细胞
