内蒙古自治区自然科学基金(2009MS0402)
- 作品数：8 被引量：13H指数：3
- 相关作者：赵艳红张燕军李金泉刘志红苏蕊更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学内蒙古大学更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- JC-1单标法和JC-1/PI双标法荧光探针检测山羊附睾精子线粒体膜功能的研究
- 2011年
- 为准确、全面研究超低温冷冻技术对山羊附睾精子线粒体膜电位的影响效果,本试验采用荧光探针JC-1单标和JC-1/PI双标2种荧光染色方法,通过流式细胞仪和荧光显微镜两种检测手段对精子线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,MMP)变化进行检测分析,用JC-1单独染色,能准确、快速地区分高、低MMP精子,但不能明确区分精子的存活状态,采用JC-1与碘化丙啶(Propidium iodide,PI)双标法,则能明显判定精子的存活状态。通过对绒山羊附睾精子在冷冻前和解冻后线粒体膜电位检测,结果表明,单标记后高MMP精子尾部呈橙红色,低MMP精子尾部为绿色;双标后死亡精子头部呈红色(PI+)。对两种检测手段的比较研究,结果显示,荧光显微镜能够有效地区分出高、低MMP及死精子,但对于活精子中MMP的高低检测效果不理想;流式细胞仪则能够有效地区分活精子MMP的高低,而且结果准确,速度快,敏感性高。试验表明,两种检测方法相关性很高,分析同一处理样品时用JC+%和JC+/PI-%检测结果呈显著正相关(r=0.815,r=0.982,P<0.01)。因此,对于精子线粒体MMP的分析,采用JC-1单染与JC-1/PI双染的方法,利用流式细胞仪与荧光显微镜进行联合检测,能比较全面、准确的反映出精子线粒体的功能状态。
- 柴局高日明张家新孟克格日乐王惠梅赵艳红王志新张文广李金泉
- 关键词：山羊精子线粒体膜电位
- 内蒙古绒山羊褪黑激素受体1a基因外显子1克隆及序列分析被引量：3
- 2011年
- 参考GenBank上已发表的绵羊(登录号:15 U14109)、人(登录号:U14108)、牛(登录号:U73327)、鼠(登录号:U52222)等物种褪黑激素受体(melatonin receptor 1a,MTNR1a)基因cDNA序列设计引物,以内蒙古绒山羊基因组DNA为模板进行PCR扩增,得到257 bp的基因片段,将扩增产物进行克隆测序后与GenBank数据库进行序列同源性比较。结果表明,绒山羊MNTR1a基因外显子1序列与已发表的绵羊和牛该基因序列同源性分别为99%和96%,说明所得到的序列为绒山羊MNTR1a基因的外显子1序列。利用DNAStar软件分析,得到该基因序列的257个核苷酸。该序列包括5′UTR 23个核苷酸、翻译起始密码子ATG和N端78个氨基酸编码序列。
- 孙永明张燕军李国华刘志红王志英于新蕾赵艳红
- 关键词：绒山羊克隆
- 内蒙古绒山羊下丘脑中MTNR1a基因的表达被引量：2
- 2014年
- 本试验从内蒙古绒山羊下丘脑中提取总RNA,根据已发表的相近物种MTNR1a序列设计引物,利用逆转录多聚酶链式反应技术及组织原位杂交技术检测褪黑素受体基因MTNR1a在内蒙古绒山羊下丘脑中的表达及其分布,结果显示:MTNR1a基因在内蒙古绒山羊下丘脑中广泛表达,说明下丘脑是褪黑激素作用的靶器官。结果提示:褪黑激素对绒山羊季节性繁殖的影响有可能与下丘脑分泌的某些激素相互作用而发挥其生物学功能的。
- 郑再明刘志红张燕军苏蕊赵艳红李金泉
- 关键词：内蒙古绒山羊RT-PCR原位杂交下丘脑
- PRLR基因在内蒙古绒山羊下丘脑、垂体及卵巢中的表达被引量：3
- 2012年
- 许多研究已表明PRLR基因是影响山羊繁殖力的一个候选基因。课题以内蒙古阿尔巴斯绒山羊为研究对象,利用RT-PCR技术检测PRLR基因在内蒙古绒山羊生殖轴的表达。结果表明,PRLR基因在内蒙古绒山羊下丘脑、垂体、卵巢中均有表达,说明下丘脑、垂体、卵巢是催乳素作用的靶器官,同时也阐明催乳素对内蒙古绒山羊的繁殖力的影响是通过与靶器官受体基因结合来发挥其功能的,为进一步探讨催乳素对内蒙古绒山羊繁殖影响的作用途径及调控机理奠定基础。
- 赵艳红王志英石玲郑竹清王琳李金泉
- 关键词：PRLR内蒙古绒山羊
- MTNR1a基因在内蒙古绒山羊垂体中的表达
- 材料与方法全部试验材料均取自阿尔巴斯种羊场内蒙古绒山羊成年羊脑垂体组织,一部分于液氮保存并提取总RNA,反转录成cDNA,以cDNA为模板,利用所设计的跨内含子引物进行RT-PCR扩增,扩增产物用1.2%琼脂糖凝胶电泳检...
- 赵艳红刘志红杜晨光张燕军苏蕊李金泉
- 文献传递
- 内蒙古白绒山羊附睾精子冷冻效果的研究
- 2011年
- 本试验把不同温度下的样品分成3个处理组,通过检测精子与繁殖力有关的重要指标研究3个处理组的冷冻效果,结果显示,在3个不同的环境下收集附睾,室温下(19℃)收集附睾精子(处理1组)的冷冻效果最好,解冻后活率为(55.0±3.4)%;4℃下收集的精子(处理2组)冷冻解冻后的活率为(35.0±2.5)%;37℃下收集的精子(处理3组)的冷冻效果较差,解冻后活率为(23.0±2.5)%。通过对处理组中冷冻和解冻后两个阶段的精子指标的测定,研究了精子活率与其他指标的关系,得出白绒山羊附睾精子能够成功的保存。
- 柴局张燕军张家新高日明孟克格日乐王惠梅张文广李金泉
- 关键词：附睾精子冷冻保存
- MTNR1a基因在内蒙古绒山羊卵巢中的表达
- 从内蒙古绒山羊卵巢中提取总RNA,根据已发表的相近物种MTNR1 DNA序列设计引物,利用RT-PCR技术对内蒙古绒山羊褪黑素受体基因MTNR1a进行PCR扩增,结果在内蒙古绒山羊卵巢中检测到了MTNR1基因的表达。
- 赵艳红玉荣刘志红张燕军李金泉
- 关键词：内蒙古绒山羊RT-PCR卵巢
- 文献传递
- 褪黑激素受体1a基因在内蒙古绒山羊垂体中的表达被引量：4
- 2012年
- 本试验从内蒙古绒山羊脑垂体中提取总RNA,根据已发表的相近物种褪黑激素受体1a(melatonin receptor 1a,MTNR1a)基因序列设计引物,利用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应(real-time quantitative,RT-PCR)技术、组织原位杂交技术检测MTNR1a基因在内蒙古绒山羊垂体中的表达。结果显示,通过RT-PCR方法检测到MTNR1a基因在内蒙古绒山羊垂体中表达,利用原位杂交技术进一步确定MTNR1a基因在垂体中表达分布。结果提示,垂体是褪黑激素作用的靶器官,褪黑激素对绒山羊季节性繁殖的影响有可能是与垂体分泌的某些激素相互作用而发挥作用的。
- 郑竹清石玲王梦一吴敬刘志红张燕军苏蕊赵艳红
- 关键词：内蒙古绒山羊RT-PCR原位杂交垂体
- 内蒙古绒山羊4个群体遗传多样性分析被引量：1
- 2012年
- 选用30个微卫星座位,对内蒙古绒山羊4个种群(阿尔巴斯、二狼山、乌珠穆沁、阿拉善)的176份样本进行遗传多样性检测,结果表明,内蒙古绒山羊4个群体均具有丰富的遗传多态性。4个种群的期望杂合度(He)、平均多态信息含量(PIC)和平均有效等位基因数(Ne)分别为0.735 4～0.783 2、0.623 6～0.639 1、2.57～4.92;阿尔巴斯绒山羊与二狼山绒山羊遗传距离较近;阿拉善绒山羊与乌珠穆沁绒山羊遗传距离则较近。此研究为开展内蒙古绒山羊种质特性研究及资源保护和利用提供了科学依据。
- 赵艳红王梦一苏蕊刘志红武瑞兵张燕军李金泉包跃先
- 关键词：绒山羊微卫星
- 内蒙古绒山羊孤核受体RORα部分cDNA克隆及序列分析被引量：1
- 2010年
- 依据已发表的牛、狗、人、小鼠等哺乳动物孤核受体RORα基因序列设计跨内含子引物,以内蒙古绒山羊cD-NA为模板进行RT-PCR扩增,得到417bp的基因序列,将扩增产物进行克隆测序后与GeneBank数据库进行序列同源性比较分析:绒山羊RORαcDNA扩增序列与牛、狗、猪和小鼠的同源性分别为98.3%、95.4%、95.2%和87.8%;与牛、猪、人、马、鼠相比RORα基因氨基酸序列同源性非常高,说明所获得序列为内蒙古绒山羊RORαcDNA序列,而且各种哺乳动物的RORα基因保守性较强。
- 赵艳红孙永明刘志红张燕军李金泉
- 关键词：绒山羊克隆
